Transcript Seminarpräsentation

Biotechnologische
Laborübungen
Referenten
 Mag. Alfred Langeder
Fa. Schott-Eppendorf
 Dr. Renate Pfleger
BA für Milchwirtschaft Wolfpassing
 Mag. Susanne Baumgartner
Fa. bioMérieux
Organisatorisches
 Seminarprogramm
 Seminarorte
Mo / Di
Wolfpassing
Mi
Wieselburg
 Unterkunft - Fahrgelegenheit
 Mittagessen
 Exkursion am Mittwoch
Ziele des Seminars
– Überblick über die Biotechnologie geben
– Grundlagen der Biotechnologie vermitteln
– Lehrinhalte der BT-Übungen festlegen
– Laborausstattung zusammenstellen
– Beschaffung wichtiger Materialien
– Möglichkeiten
aufzeigen
dieses
Gegenstandes
Grundlagen und Lehrinhalte
der Biotechnologischen
Laborübungen
Definition Biotechnologie
Biotechnologie ist die integrierte Anwendung
von Natur- und Ingenieurwissenschaften
mit dem Ziel, Organismen, Zellen, Teile von
Zellen und molekulare Analoge technisch
zu nutzen.
European Federation of Biotechnology EFB
Biologie, Chemie und Technik
Traditionelle Arbeitsgebiete
 Technische Mikrobiologie
 Technische Biochemie
 Bioverfahrenstechnik
 Industrielle Mikrobiologie
 Angewandte Mikrobiologie
Meilensteine der Biotechnologie
Vor 8000 Jahren: Sumerer aus dem Zweistromland zwischen Euphrat und
Tigris brauten schon ein alkoholisches Getränk
1683 erste mikroskopische Betrachtung von Bakterien und Hefezellen
1857 Beschreibung der Milchsäurebakterien (Pasteur)
1870 Grundlegende Methoden der Bakteriologie (Koch, Petri, ...)
1929 Entdeckung des Penicillins (Fleming)
1942 Beginn der Penicillin-Herstellung
1973 Neukombination von DNA: “Gentechnologie”
1982 Insulin aus gentechnischer Produktion mit Bakterien
Bildungs- und Lehraufgabe
Der Schüler soll
elementare
mikrobiologische
Arbeitsmethoden
selbstständig
durchführen können.
die hygienische Unbedenklichkeit von Lebensmitteln und daraus
abgeleiteten
Erzeugnissen
in
allen
Produktionsund
Vermarktungsstufen beurteilen können.
aufbauend auf den Kenntnissen der Biologie und Chemie den
interdisziplinären Charakter der Biotechnologie kennen lernen.
die Ergebnisse seiner Untersuchungen interpretieren können.
sich seiner Verantwortung für die menschliche Gesundheit bewusst
sein.
Lehrstoff
Einführung in die mikrobiologische Arbeit:
Mikrobiologische
Präparate,
Mikroskopieren,
Konzentrationsbestimmungen, Keimgruppennachweise;
Nachweis und Kultivierung:
Isolierung, Identifizierung, Verdünnungsreihen, Stammerhaltung,
Kultivierung, Produktion;
Kontrollmethodik der Personal- und Betriebshygiene;
Biotechnologische Analytik und Verfahren:
Hemmstoffe, Wuchsstoffe, Stoffwechselprodukte, Gel-Elektrophorese,
Fermentationen;
Begriffe und Definition des
aseptischen Arbeitens:






Keim: vermehrungsfähiger Mikroorganismus
Steril: frei von vermehrungsfähigen Mikroorganismen
jeglicher Art (Phagen, Viren, Sporen miteinbezogen)
Aseptisch:
arbeiten
unter
Bedingungen,
die
Fremdorganismen ausschalten
Kontamination: Anwesenheit von Fremdorganismen
Desinfektion: weitgehende Abtötung von Mikroorganismen auf Oberflächen
Dekontamination: weitgehende Abtötung von Mikroorganismen in Nährmedien
Kultivierung von MO
 Bouillonkulturen
 Agarstrich-/Stichkultur
 Kultivierung auf Agarplatten
 Koch`sches Plattengussverfahren
 Spatel-Verfahren
 Petrifilm-Methode
 MPN-Technik / Titer
Fraktionierter Ausstrich
2
1
1
2
3
3
5
4
Koch´sches
Plattengussverfahren
Most probable number MPN
1 ml
1 ml
1 ml
V1
Probe
1 ml
V2
1 ml
V3
1 ml
V0
1 ml
V1
1 ml
1 ml
V2
V3
Titer - Presence/Absence
Probe
V0
1 ml
Beispiel Wasser
Untersuchtes Produkt: Trinkwasser nicht aufbereitet
Kriterium
Gesamtkeimzahl bei 22°C
Gesamtkeimzahl bei 37°C
Coliforme
E. coli
Enterokokken
Grenzwerte
100/ml
20/ml
Negativ/100ml
Negativ/100ml
Negativ/100ml
Nachweis von Hemmstoffen

Agardiffusionsverfahren:
Papierscheibchen-methode nach Galesloot
Brillantschwarz-Reduktionstest
LMBG 01.0042-52(EG) Kap. VIII
 Joghurt-Test nach FRANK
 Penzymtest
 Charmtest
 ELISA Immunologischer Test

(BR-Test)
§35
Methoden zur Bestimmung der
KZ von Oberflächen
 Abklatschverfahren: Schwämmen, RODAC-
Platten, Bacto-Strip-Streifen, AgaroidStangen
 Abstrichverfahren
 Abschwemmverfahren
 Überschichtungsverfahren
Bestimmung der Luftkeimzahl
 Sedimentationsverfahren
 Gelatine-Membranfilter-Verfahren
 Impingment-Verfahren
 Impaction-Verfahren
DANKE
für ihre Aufmerksamkeit