Transcript Groupes sanguins examens IH V3 - ifsi du chu de nice 2012-2015

TRANSFUSION
Groupes sanguins érythrocytaires
(système ABO, système RH et système KELL
Les examens en immuno-hématologie



1900 Landsteiner découvre le 1er système
des groupes sanguins : le système ABO
1940 valide le système Rhésus
1952 Dausset met en évidence le système
HLA des GB
Les groupes sanguins érythrocytaires


Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas
des antigènes présents (ou non) à la surface des globules
rouges
Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique
(Rhésus), d’autres dans les glycolipides sur la face externe
de la Mb du GR (ABO)
Les groupes sanguins érythrocytaires




Génétiquement induits et déterminés
indépendants les uns des autres
Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe
d’individus dans une espèce donnée
29 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge
Le plus connu et le plus ancien : le système ABO,
le plus important du fait de son implication en transfusion
sanguine et pour la transplantation d’organe
Système
Numéro
Symbole
Gène(s)
Localisation du gène
ABO
001
ABO
ABO
9q34.2
MNS
002
MNS
GYPA, GYPB, GYPE
4q28.2-q31.1
P
003
P
P1
22q11.2-qter
Rh
004
RH
RHD, RHCE
1q36.13-q34.3
Lutheran
005
LU
LU
19q13.2
Kell
006
KEL
KEL
7q33
Lewis
007
LE
FUT3
19q13.3
Duffy
008
FY
DARC
1q22-q23
Kidd
009
JK
SLC14A1
18q11-q12
Diego
010
DI
SLC4A1
17q21-q22
Yt
011
YT
ACHE
7q22.1
Xg
012
XG
XG
Xp22.32
Scianna
013
SC
SC
1p34
Dombrock
014
DO
DO
12p12.3
Colton
015
CO
AQP1
7p14
Landsteiner Wiener
016
LW
LW
19p13.3
Chido Rodger
017
CH/RG
C4A, C4B
6p21.3
H
018
H
FUT1
19q13.3
Kx
019
XK
XK
Xp21.1
Gerbich
020
GE
GYPC
2q14-q21
Cromer
021
CROM
DAF
1q32
Knops
022
KN
CR1
1q32
Indian
023
IN
CD44
11p13
OK
024
OK
CD147
19p13.3
RAPH
025
MER2
MER2
11p15.5
JMH
026
JMH
-
-
I
027
I
-
-
GLOB
028
P
-
-
GIL
029
GIL
-
-
RHAG
030
RHAG
-
-
Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et
nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)
Antigènes
N°
1
2
3
4
5
01
ABO
A
B
A,B
A1
02
MNS
M
N
S
s
U
03
P1
P1
04
RH
D
C
E
c
e
05
LU
Lua
Lub
06
KEL
K
k
Kpa
Kpb
07
LE
Lea
Leb
08
FY
Fya
Fyb
Fy3
09
JK
Jka
Jkb
Jk3
6
7
8
ce
Ce
Cw
Le système ABO



Le système ABO présente deux caractéristiques qui
sont à l’origine des méthodes de groupage et
expliquent son rôle important en transfusion et lors
des transplantations :
La présence ou l’absence des antigènes A et/ou B à
la surface des GR
La présence ou l’absence des anticorps naturels
anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants
aux antigènes absents sur les GR
Les antigènes du système ABO
Les antigènes du système ABO
Groupe
sanguin
Antigènes
membranaires
Anticorps
sériques
Fréquence
en France
A
A
anti-B
45%
B
B
anti-A
9%
O
H
anti-A et anti-B
43%
AB
A et B
aucun
3%
Répartition des Ag ABH dans
l’organisme


à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes
et des plaquettes
présents sur de nombreuses cellules de l’organisme
(cellules épithéliales, endothélium vasculaire,
secrétions salivaires, cellules rénales) à l’exception
de l’os, des neurones et de la cornée
Les anticorps naturels,réguliers





Naturels : Présents dans le plasma d’un sujet en dehors de
toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou
grossesse)
Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent
pas sur leur GR
Réguliers : existent constamment chez les individus ne
possédant pas l’antigène correspondant
Apparaissent chez l’enfant entre 0 et 6 mois (suite à l’hétéro
immunisation par les bactéries de la flore intestinale)
Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du
risque d’incident dès la 1ère transfusion incompatible
Les anticorps immuns, irréguliers


N’existent pas à l’état naturel
Apparaissent à la suite d’une immunisation
préalable : grossesse ABO incompatible
Détermination du groupe ABO
Le groupage ABO repose sur deux épreuves
qui doivent être concordantes :
Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent
consiste à rechercher par une technique
d’agglutination les antigènes présents sur les
hématies
GR à tester (antigènes à déterminer) +
sérums tests connus (anticorps monoclonaux
anti-A et anti-B)
Réaction d’agglutination
Agglutination
Formation d’un réseau
Absence d’agglutination
Agglutination
Interprétation difficile :
Double population avec le sérum test
anti-A
- Patient A transfusé en O
- Patient ayant subi une allogreffe de
moelle (A/O ou O/A)
Détermination du groupe ABO
Epreuve sérique dite de Simonin
Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers
dirigés contre les antigènes absents
Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus
Le groupe ne sera définitif qu’à la suite de 2
déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements
sanguins différents
Groupage ABO
BETH VINCENT
anti-A
anti-B
SIMONIN
GR A
GR B
O
_
_
+++
+++
A
+++
_
_
+++
B
_
+++
+++
_
AB
+++
+++
_
_
Règles de compatibilité ABO
POUR LES GLOBULES ROUGES

SYSTEME ABO
A
identité
A
Ac anti-B
O
donneur
universel
O
Ac antiA
Ac antiB
compatibilité
compatibilité
Ac anti-A
B
B
identité
A
B
pas
d'Ac
AB
receveur
universel
Règles de compatibilité ABO
POUR LE PLASMA
A
O
AB
B
Le système RH (Rhésus)






Système complexe de groupe sanguin
On compte 52 antigènes appartenant à ce système
En pratique courante seuls 5 sont à connaître :
D, C, c, E, e
La présence de l’antigène D défini le groupe Rhésus positif
(85%)
son absence le groupe Rhésus négatif
Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou
l’absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e
Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur
la membrane du GR
Les antigènes
ANTIGENES
Fréquence en France
D (RH1)
85%
C (RH2)
70%
E (RH3)
30%
c (RH4)
80%
e (RH5)
98%
Phénotype Rhésus (RH) du receveur
(fréquence en France)
Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre
prioritaire
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
(0,34)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
(0,20)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
(0,12)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)
(0,12)
D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)
(0,04)
D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
(0,02)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
(0,01)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
(0,15)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
Les Anticorps du système Rhésus




Toujours acquis, secondaires à une alloimmunisation, lors d’une transfusion ou d’une
grossesse
Probabilité d’apparition fonction de l’immunogénicité
L’antigène Rh standard (D) est le plus immunogène
puis dans l’ordre E, c et e
de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le
placenta, responsables de la symptomatologie
présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère
Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né
Règles de compatibilité Rhésus
POUR LES GLOBULES ROUGES
Rh -
Rh + = Ag D+
Les autres systèmes érythrocytaires





Importance transfusionnelle car certains de
leurs antigènes sont fortement immunisants
Système KELL: l’Antigène K est un puissant
immunogène pour les sujets K- (91% de la
population K-)
Système Duffy : antigène Fya et Fyb
Système MNS : antigène S et s
Système Kidd : antigène Jka et JKb
Les autres systèmes érythrocytaires
L’absence d’un Antigène dans l ’un de ces systèmes
ne s’accompagne pas d’anticorps naturels, comme
dans le système ABO, mais une transfusion ou une
grossesse peuvent provoquer la formation d’anticorps
immuns (allo-immunisation) responsables
ultérieurement d’accidents transfusionnels ou de
MHNN
Les examens immunohématologiques






Groupage ABO RH1 (RhD)
Phénotypage RH et Kell
Phénotypage étendu
Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)
Epreuve de compatibilité au laboratoire
Tests de Coombs
 Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité :
Type d’analyse
Nombre de ml sur anticoagulant
Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1
5
RAI chez l’adulte
5
ABO.RH1 et RH.K et RAI chez l’adulte
5
RAI chez le nouveau-né
5
ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né
5
Titrage et dosage pondéral anti-RH1
Nombre de ml sur tube sec ou
anticoagulant
15
Test de Kleihauer
5
Bilan de réaction transfusionnelle
5
Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né
5
AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI
10
Test de Coombs Direct (TCD)
5
-Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe.
 Exigences relatives aux documents accompagnateurs :
-Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe
-Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription
-Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement
-Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance
-Nature des analyses demandées
-Renseignements cliniques éventuels
-Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau d’urgence.
5
10
Les examens immunohématologiques
Groupage ABO RH1




correspond à la détermination du groupe ABO indissociable
de la recherche du Rhésus standard D
le groupage est considéré comme définitif si les résultats
sont concordants sur deux déterminations sur 2
prélèvements différents
Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte
périnatal
La transmission électronique des résultats est la règle pour
la délivrance des PSL
Phénotype Rhésus Kell




Recherche grâce à l’utilisation de sérums tests anti-C,
anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou l’absence à
la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C
(RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1)
Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel
Contexte pré et périnatal
Validation de l’identification d’anticorps antiérythrocytaires
Phénotype étendu
Recherche de la présence ou l’absence des
antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb
(système Duffy), S, s (système MNS)
 Champ d’application :
- patient présentant un anticorps irrégulier dans l’un
des systèmes concernés
- à titre préventif chez patients devant recevoir des
transfusions itératives
- patients en instance de greffe

Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un
maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour
après la transfusion



Examen consistant à dépister et identifier les
anticorps dirigés contre les antigènes
érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à
étudier grâce à une gamme d’hématies tests
Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures
Validité 72H
Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
Champ d’application :
 Obligatoire chez tout patient susceptible
d’être transfusé
 Contexte de greffe ou de transplantation
 Contexte pré ou périnatal
 Chez le patient transfusé itératif en bonne
place au cours des séries de transfusion
 Chez le patient transfusé dans le cadre du
suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1
mois après le dernier épisode transfusionnel)
CAT en cas d’urgence hémorragique
Urgence vitale immédiate : distribution sans délai
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
pas de groupe ni de RAI si non disponibles
CGR O sans hémolysines
Urgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutes
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
pas de RAI si non disponible
nécessité de groupe ABO conforme
Urgence « relative » : délai de distribution de 2 - 3 heures
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
nécessité de groupe et RAI conformes
CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE
Dans le cadre d’un dépôt d’urgence ayant en stock des CGR :
O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe
O+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe
En fonction de D et Rhésus-Kell
Patient
D
CGR à transfuser
Rhésus Kell
D non connu
non connu
O-D-C-E-c+e+K-
D négatif
connu ou non
O-D-C-E-c+e+K-
D positif
non connu
O+D+C+E-c-e+K-
D positif
connu : C+
O+D+C+E-c-e+K-
D positif
connu : C-
O-D-C-E-c+e+K-
Epreuve directe de compatibilité au
laboratoire EDCL




Qualification biologique du don
Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du
CGR à transfuser (l’objectif étant de détecter
certains Ac masqués par la présence d’autres Ac,
ou des Ac rares)
Validité 72H
Champ d’application :
Receveur présentant ou ayant présenté un ou
plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytaires
Nouveau-né présentant un test de Coombs positif
ou né de mère allo-immunisée
Test de Coombs


Permet la mise en évidence de la
sensibilisation in vivo des hématies humaines
par des anticorps grâce à l’utilisation d’un
réactif appelé antiglobuline humaine
Champ d’application :
Maladie hémolytique du nouveau-né
Incident transfusionnel
Anémie hémolytique autoimmune
Recherche d'anticorps fixés sur les
hématies
Ac non spontanément
agglutinables
Hématies fœtales
ayant fixé l'Ac
+ anti-gammaglobulines humaines
complexe agglutinant