Transcript Παρουσίαση

Θεμέλια Ιατρικής
Athens
National
University
Χημεία
Βιολογία
Γενετική
Μαθηματικά
Φυσική
Χημεία & Ιατρική
Athens
National
University
Κατανόηση
Φυσιολογίας
Παθολογίας
Ουσιώδης
Διάγνωση
Θεραπεία νόσων
Athens
National
University
National University
of Athens
Greece
Ιατρική & Χημεία
Κατανόηση της παθογένειας του Νεογνικού
Λύκου:
Μελέτης επιτόπων και συμπληρωματικών
επιτόπων των αυτοαντιγόνων
Χαράλαμπος Μ. Μουτσόπουλος
Dept. of
Pathophysiology
Medical School
Μάιος, 2011
Αυτοάνοσα Νοσήματα
Athens
National
University
Ορισμός
Ανάπτυξη
Αυτοαντισώματων
Αυτοδραστικών Τ λεμφοκυττάρων
Βλάβη ιστών
Μετάδοση Νόσου
Άνθρωπος → Πειραματόζωο
Άνθρωπος → Άνθρωπος
Αυτοάνοσα Νοσήματα
Athens
National
University
Νεογνικός Λύκος
Παθογενετικά αντισώματα
Μητέρα  έμβρυο: αντί-Ro/La αντισώματα
Πρόκληση νεογνικού λύκου
Δερματικές εκδηλώσεις
Προσβολή καρδιάς
Hai B et al. Arthritis Rheum 2002;46:1572-9
Αντι-Ro/La RNP αποκρίσεις
Athens
National
University
Ασθενείς
Σύνδρομο Sjögren (60%)
Συστηματικός Ερυθηματώδης Λύκος (67%)
Άλλα αυτοάνοσα νοσήματα (5%)
Αντιγονο-καθοδηγούμενη διαδικασία
Ro52
Δια- και ένδο- μοριακή εξάπλωση (spreading)
Νεογνικός Λύκος (NLS)
Athens
National
University
Autoantibody-positive Mothers
(anti-Ro/SSA and/or anti-La/SSB)
Autoantibody classes or subclasses
No differences
Antibodies recognizing epitopes of
Ro60 or La
Need of an early detection marker
Tseng et al, J Rheumatol 1996
Fritsch et al, Arthritis Res Ther 2005
Συνεργασία Ερευνητικών Ομάδων
Athens
National
University
Κατανόηση των στόχων αυτοανοσίας
Επίτοποι αυτοαντιγόνων
Τμήμα Παθοφυσιολογίας, Ιατρική Σχολή, Εθνικό Καποδιστριακό Παν/μιο Αθηνών
Στέα ΕΑ
Ρούτσιας ΙΓ
Τζιούφας ΑΓ
Εργαστήριο Βιοχημείας, Τμήμα Χημείας, Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων
Σακαρέλλος Κ.
Σακαρέλλου M.
Hospital for Joint Diseases, School of Medicine, New York University
Buyon JP,MD
Clancy RM, PhD
Επίτοποι
Athens
National
University
“Αυτοαντιγόνα”
Athens
National
University
Μελέτη των επιτόπων, γιατί;
Μελέτη των παθογενετικών μηχανισμών/αιτιολογία
Βελτίωση των διαγνωστικών εργαλείων
Καθορισμός των κλινικών ομάδων & υπο-ομάδων
Ανάπτυξη ειδικών ανοσοθεραπειών
Επίτοποι του La/SSB
Athens
National
University
Επικαλυπτόμενα συνθετικά πεπτίδια (20aa)
Ευαισθησία
Ειδικότητα
αντι-289-308
74%
85%
αντι-349-364
89%
95%
Tzioufas et al Clin. Exp. Immunol 1997
Yiannaki et al, Clin. Exp. Immun 1998
Athens
National
University
Συμπληρωματικοί επίτοποι
Σχεδιασμός συμπληρωματικών επιτόπων
Athens
National
University
5’
3’
3’
5’
“Two polypeptide chains assembling ribonuclease A are
encoded by complementary RNAs”
L.B.Mekler Biofizika 1969
La/SSB επίτοποι & συμπληρωματικοί επίτοποι
Athens
National
University
Επίτοποι:
A289NNGNLQLRNKEVTWEVLEG308
G349SGKGKVQFQGKKTKF364
Συμπληρωματικοί επίτοποι:
S308FEYFPSHFFVPELEVTIIC289
K364FRFLALKLYFSFTRP349
Routsias JG et al., Mol Med 2002
Αντισώματα έναντι του κύριου επιτόπου &
Athens
National
University
συμπληρωματικού επιτόπου του La/SSB
Ανιχνεύονται σε ορούς αντι-La/SSB (+) ασθενών με σύνδρομο Sjögren &
Συστηματικό Ερυθηματώδη Λύκο
G349SGKGKVQFQGKKTKF364
K364FRFLALKLYFSFTRP349
51%
83%
επίτοπος
Συμπληρωματικός επίτοπος
Routsias et al., Mol Med 2002
Αντισώματα έναντι των συμπληρωματικών
πεπτιδίων των κύριων La/SSB επιτόπων
Κεκαθαρμένα αντισώματα έναντι των συμπληρωματικών
πεπτιδίων
Coated with anti- epitope
289-308 F(ab΄)2
Δεσμεύονται στους ιδιοτύπους των αντισωμάτων
OD (405nm)
Athens
National
University
Routsias et al., Mol Med 2002
Αντισώματα έναντι των συμπληρωματικών
Athens
National
University
πεπτιδίων των κύριων La/SSB επιτόπων
Κεκαθαρμένα αντισώματα έναντι των αντι-συμπληρωματικών πεπτιδίων
Αναστέλλουν τη δέσμευση των αντισωμάτων έναντι των La/SSB
Routsias et al., Mol Med 2002
Αντισώματα έναντι των συμπληρωματικών
Athens
National
University
πεπτιδίων των κύριων La/SSB επιτόπων
Ανοσοποιήσεις των ποντικών Balb/c με
πεπτίδιο
συμπληρωματικό πεπτίδιο
Οδήγησαν σε ανοσολογικές αποκρίσεις (ανίχνευση
αντισωμάτων) έναντι
πεπτιδίου & συμπληρωματικού πεπτιδίου
Ανοσοποίηση με SOC-pep289-308
Ανοσοποίηση με SOC-cpep289-308
Routsias et al., J Autoimmunity 2003
Ιδιότυποι & αντι-ιδιότυποι των αντισωμάτων
Athens
National
University
Υπόθεση δημιουργίας δικτύου
Antigen
anti-idiotypic antibodies
Idiotypic/anti-idiotypic network
idiotypic
antibodies
Ομοιόσταση του ανοσολογικού συστήματος ρυθμίζεται από
Αναγνώριση/αλληλεπίδραση των ιδιοτυπικών & αντιιδιοτυπικών αντισωμάτων  δημιουργία δικτύου
Ουδετεροποίηση των ιδιοτυπικών αντισωμάτων
Abbas AK, Cellular and Molecular Immunology, Saunders, 5th edition
Συμπληρωματικά πεπτίδια:
Athens
National
University
Ανιχνευτές των αντι-ιδιοτυπικών αντισωμάτων
Νεογνικός Λύκος (NLS)
Athens
National
University
La/SSB: Ιδιοτυπικές/αντι-ιδιοτυπικές αποκρίσεις
Μητέρες με αυτοάνοσα νοσήματα Αριθμός ασθενών
(Ν=63)
Ομάδα A
εγκυμοσύνη με NLS
29
Ομάδα B
υγιής εγκυμοσύνη /
ιστορικό NLS
10
Ομάδα C
υγιής εγκυμοσύνη
24
Τα δείγματα προέρχονταν από την ερευνητική βάση του Νεογνικού Λύκου της ΝΥ
(Research Registry for Neonatal Lupus, NY)
Jill Buyon & Robert Clancy, Hospital for Joint Diseases, New York University, School of
Medicine
Δεν υπήρχαν στατιστικά σημαντικές δημογραφικές, κλινικές & ορολογικές διαφορές
μεταξυ των ασθενών των τριών ομάδων
Stea et al., Arthritis Rheum 2006
Νεογνικός Λύκος (NLS)
La/SSB: Ιδιοτυπικές αποκρίσεις
100
Percentage (%)
Athens
National
University
80
NS differences, Fisher’s exact test
pep349-364
60
pep289-308
40
20
0
Group A (n=29)
Group B (n=10)
Group C (n=24)
Α: NLS pregnancy, Β: healthy pregnancy, history of NLS C: healthy pregnancies
Stea et al., Arthritis Rheum 2006
Νεογνικός Λύκος (NLS)
La/SSB: αντι-ιδιοτυπικές αποκρίσεις
(επιβεβαιώνονται με συμπληρωματικά πεπτίδια)
100
Percentage (%)
Athens
National
University
cpep349-364
cpep289-308
80
60
40
*
p<0.0001
**
(p=0.0151)
20
0
Group A (n=29) Group B (n=10) Group C (n=24)
Α: NLS pregnancy, Β: healthy pregnancy, history of NLS C: healthy pregnancies
Stea et al., Arthritis Rheum 2006
Νεογνικός Λύκος (NLS)
Athens
National
University
La/SSB: αντι-ιδιοτυπικές αποκρίσεις
Συμπεράσματα
Μητέρες υγιών παιδιών:
 επιπολασμός των αντι-ιδιοτυπικών αντισωμάτων
κατά του La/SSB
έχουν ένα ενεργό αντι-ιδιοτυπικό δίκτυο που στοχεύει τα
αντισώματα έναντι του La/SSB
Εξέταση αυτής της αντι-ιδιοτυπικής απόκρισης μπορεί
να είναι χρήσιμη για την πρόγνωση των εγκυμοσύνων
με χαμηλό κίνδυνο
Νεογνικός Λύκος (NLS)
Athens
National
University
La/SSB: αντι-ιδιοτυπικές αποκρίσεις
Προτεινόμενος ρόλοσ
NLS
Healthy
La
La
La
La
La
La
La
Placenta
Apoptotic cardiocyte
Fetal circulation
La
Placenta
Apoptotic cardiocyte
Fetal circulation
Ρόλος των ιδιοτυπικών/αντι-ιδιοτυπικών αντισωμάτων:
Athens
National
University
Μητέρες υψηλού κινδύνου για παιδί με νεογνικό λύκο
που έχουν δεχθεί θεραπεία με IVIg
Μητέρα υψηλού
κινδύνου για παιδί με
νεογνικό λύκο
Ενδοφλέβια
ανοσοσφαιρίνη
(IVIG)
Που έχει γεννήσει
προηγούμενα παιδί με
κολποκοιλιακό
αποκλεισμό
Νεογνικός Λύκος
Athens
National
University
Κατανόηση παθογένειας – πρόταση για
θεραπεια
Κατανόηση παθογένειας
Ανεπάρκεια ελέγχου της διόδου των
αυτοαντισωμάτων από τη μητέρα στο παιδί
Πρόταση για στοχευμένη θεραπεία
Ενδοφλέβια ανοσοσφαιρίνη
Stea E et al., Arthritis Rheum., 2006
Routsias JG, et al., Arthritis Rheum., 2011
Athens
National
University