实验十二 过氧化物酶活性的 测定 ——愈创木酚比色法   一、实验目的 1、掌握过氧化物酶活性测定的原理 2、熟悉酶液提取方法,掌握愈创木酚法测定 过氧化物酶(POD)活性方法。   二、实验原理   RH2+ H2O2→2H2O + R    过氧化物酶(POD)可以清除代谢过程中的H202,反应 中被氧化的物质可以是多种多样的,因而其生理效 应也具有多样性,但清除H202毒害作用是共同的。    在H202存在时,过氧化物酶可将邻甲氧基苯酚(即 愈创木酚)氧化成红棕色的4一邻甲氧基苯酚,其 红棕色的物质可用分光光度计在436nm处测定其消  光值,产物浓度与A436成正比,即可求出该酶的活 性。   三、实验步骤   1.酶液提取    ⑴称取样品适量(如果皮1g)    ⑵研磨:剪碎置于研钵中,再加少许水和石英砂,研磨成 匀浆。    ⑶定容:把研钵中的研磨物,移入100ml容量瓶中定容。    ⑷离心:取一定量离心沉淀(10000r/min冷冻离心 20min)。    ⑸酶液保存:再取其上清液保存在冰箱(或冷处)备用。   2.酶活性测定 ⑴标准曲线制作:取7个10ml刻度试管编号,分别加入 5g/ml的英格盐溶液10.0、8.0、6.0、4.0、2.0、1.0、0 m1, 然后稀释至刻度。其浓度分别为每毫升含5、4、3、2、1、 0.5、0g的4一邻甲氧基苯酚。用分光光度计在470nm处测定 其消光值。以消光值为纵坐标,以4一邻甲氧基苯酚浓度为横 坐标绘制成标准曲线。 ⑵测定:在20ml刻度试管中,分别加入pH5.0醋酸缓冲 液1ml,0.1%邻甲氧基苯酚1ml及酶溶液1ml(如酶活性较强, 可稀释10倍后再取1ml),摇匀后,置于30℃恒温水浴5分钟 达平衡后,立即加入0.08%H2O2溶液1ml并混匀,1分钟后生 成红棕色的4一邻甲氧基苯酚的溶液。立即倒人比色杯中,测 定其消光度。重复三次,并设对照,用1ml蒸馏水代替0.08% H2O2。从标准曲线上求出相应的4一邻甲氧基苯酚的含量 (1g 4一邻甲氧基苯酚相当干1单位的愈创木酚)。   四、 实验结果 1.酶活力单位定义:每分钟增加0.01 A436nm值为一个酶活 力单位(U)。  ΔA436×D 酶活力(U) = 0.01×W×t 式中: ΔA436 ——反应时间内OD变化值。 W ——植物鲜重(g)。 t  ——反应时间(min)。  D ——稀释倍数 (即酶提取液体积÷反应系统内酶液体积)   2.计算不同测定时间的反应速度(v),作出v与t 的曲线图并观察反应速度与时间的关系。 POD酶活力大小:以最初的反应速度(v)来表示POD酶 活力; 记录实验主要步骤,求出过氧化物酶的活性。  过氧化物酶活性=  ΔA436×VT W×t  式中: ΔA436 ——反应时间内OD变化值。 VT ——提取酶液总体积(mL)。 W ——植物鲜重(g)。 t ——反应时间(min)。   五、讨论分析  ⑴过氧化物酶的变化说明了什么?  ⑵试述过氧化物酶测定原理? 
实验十二 过氧化物酶活性的 测定 ——愈创木酚比色法 一、实验目的 1、掌握过氧化物酶活性测定的原理 2、熟悉酶液提取方法,掌握愈创木酚法测定 过氧化物酶(POD)活性方法。 二、实验原理  RH2+ H2O2→2H2O + R  过氧化物酶(POD)可以清除代谢过程中的H202,反应 中被氧化的物质可以是多种多样的,因而其生理效 应也具有多样性,但清除H202毒害作用是共同的。  在H202存在时,过氧化物酶可将邻甲氧基苯酚(即 愈创木酚)氧化成红棕色的4一邻甲氧基苯酚,其 红棕色的物质可用分光光度计在436nm处测定其消 光值,产物浓度与A436成正比,即可求出该酶的活 性。 三、实验步骤  1.酶液提取  ⑴称取样品适量(如果皮1g)  ⑵研磨:剪碎置于研钵中,再加少许水和石英砂,研磨成 匀浆。  ⑶定容:把研钵中的研磨物,移入100ml容量瓶中定容。  ⑷离心:取一定量离心沉淀(10000r/min冷冻离心 20min)。  ⑸酶液保存:再取其上清液保存在冰箱(或冷处)备用。 2.酶活性测定 ⑴标准曲线制作:取7个10ml刻度试管编号,分别加入 5g/ml的英格盐溶液10.0、8.0、6.0、4.0、2.0、1.0、0 m1, 然后稀释至刻度。其浓度分别为每毫升含5、4、3、2、1、 0.5、0g的4一邻甲氧基苯酚。用分光光度计在470nm处测定 其消光值。以消光值为纵坐标,以4一邻甲氧基苯酚浓度为横 坐标绘制成标准曲线。 ⑵测定:在20ml刻度试管中,分别加入pH5.0醋酸缓冲 液1ml,0.1%邻甲氧基苯酚1ml及酶溶液1ml(如酶活性较强, 可稀释10倍后再取1ml),摇匀后,置于30℃恒温水浴5分钟 达平衡后,立即加入0.08%H2O2溶液1ml并混匀,1分钟后生 成红棕色的4一邻甲氧基苯酚的溶液。立即倒人比色杯中,测 定其消光度。重复三次,并设对照,用1ml蒸馏水代替0.08% H2O2。从标准曲线上求出相应的4一邻甲氧基苯酚的含量 (1g 4一邻甲氧基苯酚相当干1单位的愈创木酚)。 四、 实验结果 1.酶活力单位定义:每分钟增加0.01 A436nm值为一个酶活 力单位(U)。 ΔA436×D 酶活力(U) = 0.01×W×t 式中: ΔA436 ——反应时间内OD变化值。 W ——植物鲜重(g)。 t ——反应时间(min)。 D ——稀释倍数 (即酶提取液体积÷反应系统内酶液体积) 2.计算不同测定时间的反应速度(v),作出v与t 的曲线图并观察反应速度与时间的关系。 POD酶活力大小:以最初的反应速度(v)来表示POD酶 活力; 记录实验主要步骤,求出过氧化物酶的活性。 过氧化物酶活性= ΔA436×VT W×t 式中: ΔA436 ——反应时间内OD变化值。 VT ——提取酶液总体积(mL)。 W ——植物鲜重(g)。 t ——反应时间(min)。 五、讨论分析  ⑴过氧化物酶的变化说明了什么?  ⑵试述过氧化物酶测定原理? 
中華基督教會協和書院  中一至中三級  中期評估報告 家長會 學務委員會   時間  活動 (地點)  7:00 家長講座 (一) (禮堂) (30’) 「如何解讀中期評估報告」 7:30 – 8:30  班主任與家長座談會 [派發中期評估報告] (課室)  負責人  級別  王振達 助理校長  中一至 中三級  班主任  中一至 中三級   家長講座 如何解讀  中期評估報告   評估的意義是……   評估的意義: 在此過程中教 師找出和診斷 學生在學習上 遇到的困難, 進而提供有效 的回饋,使學 生改善他們的 學習。   促進學習的評估 採用不同的評估模式,從 而對學生在不同方面的能 力和學習,有更全面的了 解;並回饋教師和學生, 作為改善學習與教學的基 礎。   促進學習的評估 評估可以是  總結性評估 進展性評估    促進學習的評估 總結性評估   多在學與教過程完結前進 行,主要著重學習結果。   促進學習的評估 進展性評估   在日常教學或學年中, 非正式或正式地進行, 著重學習過程和學習 進度。   不同的評估模式 考試 統一測驗 小測 課業 專題研習 學習歷程檔案 課堂表現 …… 等等   不同的評估模式 統一測驗(Common Test)  「測驗月」 (上學期) 十一月星期一上午  測考內容較少, 應有足夠時間溫習  不會大量減少課時  培養良好的學習習慣   評估表的設計  班名次   全級成績分析  ¼位數 ¾位數 平均分 中間數 最高分  73.2 47.8 63.3 79.1 73.0 68.1 79.1 75.6    怎樣透過評估表去 促進學生的學習成效  了解學習進度 肯定學習成果 檢討不足之處 檢視學習策略 製定改善方案   學習支援措施 功課班 (中一、中二) 中三、中四級學習支援計劃 飛鷹計劃   學習支援措施(初中) 功課班 (中一、中二) 配合中一、中二級家課政策  學生在一個月內遲交功課達七 次,須出席兩天放學後之功課 班;同一個月份內,每額外累 積一次遲交功課記錄,須出席 功課班一天。    其他學習支援措施 中三、中四級學習支援計劃         目標:支援中三、中四級上學期考試成績稍遜 的學生。 對象:中三、中四級學習信心稍遜,但態度良 好的學生。(由老師提名參加) 導師:現就讀大學或大專課程的校友 內容:歷奇活動、學習技巧訓練等等 日期:待定   其他學習支援措施 飛鷹計劃 (I)第一階段        目標:支援各級上學期考試成績全級末10名學生。 對象:各級上學期考試成績全級末10名學生。 導師:現就讀大學或大專課程的校友 日期: 2014
中華基督教會協和書院 中一至中三級 中期評估報告 家長會 學務委員會 時間 活動 (地點) 7:00 家長講座 (一) (禮堂) (30’) 「如何解讀中期評估報告」 7:30 – 8:30 班主任與家長座談會 [派發中期評估報告] (課室) 負責人 級別 王振達 助理校長 中一至 中三級 班主任 中一至 中三級 家長講座 如何解讀 中期評估報告 評估的意義是…… 評估的意義: 在此過程中教 師找出和診斷 學生在學習上 遇到的困難, 進而提供有效 的回饋,使學 生改善他們的 學習。 促進學習的評估 採用不同的評估模式,從 而對學生在不同方面的能 力和學習,有更全面的了 解;並回饋教師和學生, 作為改善學習與教學的基 礎。 促進學習的評估 評估可以是 總結性評估 進展性評估  促進學習的評估 總結性評估  多在學與教過程完結前進 行,主要著重學習結果。 促進學習的評估 進展性評估  在日常教學或學年中, 非正式或正式地進行, 著重學習過程和學習 進度。 不同的評估模式 考試 統一測驗 小測 課業 專題研習 學習歷程檔案 課堂表現 …… 等等 不同的評估模式 統一測驗(Common Test)  「測驗月」 (上學期) 十一月星期一上午  測考內容較少, 應有足夠時間溫習  不會大量減少課時  培養良好的學習習慣 評估表的設計 班名次 全級成績分析 ¼位數 ¾位數 平均分 中間數 最高分 73.2 47.8 63.3 79.1 73.0 68.1 79.1 75.6 怎樣透過評估表去 促進學生的學習成效 了解學習進度 肯定學習成果 檢討不足之處 檢視學習策略 製定改善方案 學習支援措施 功課班 (中一、中二) 中三、中四級學習支援計劃 飛鷹計劃 學習支援措施(初中) 功課班 (中一、中二) 配合中一、中二級家課政策  學生在一個月內遲交功課達七 次,須出席兩天放學後之功課 班;同一個月份內,每額外累 積一次遲交功課記錄,須出席 功課班一天。  其他學習支援措施 中三、中四級學習支援計劃      目標:支援中三、中四級上學期考試成績稍遜 的學生。 對象:中三、中四級學習信心稍遜,但態度良 好的學生。(由老師提名參加) 導師:現就讀大學或大專課程的校友 內容:歷奇活動、學習技巧訓練等等 日期:待定 其他學習支援措施 飛鷹計劃 (I)第一階段      目標:支援各級上學期考試成績全級末10名學生。 對象:各級上學期考試成績全級末10名學生。 導師:現就讀大學或大專課程的校友 日期: 2014