第四届畜牧科技论坛PPT

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叶酸对宫内发育迟缓仔
猪肝脏基因表达影响
刘静波
四川农业大学动物营养研究所
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主要内容
1
2
3
4
5
选题背景
研究目的及意义
试验设计
试验结果与讨论
结论
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1.选题背景
哺乳动物胚胎
或器官妊娠期
生长发育受损
<66%平均体重
猪
15-20%
宫
内
发
育
迟
缓
(IUGR)
原因
疾病
胎盘功能异常
环境应激
养分摄入不足
影响
存活率,生长性能,养分利用率
胴体组成及长期健康状况
分子机制
基因组甲基化模式异常
相对稳定改变基因表达
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1.选题背景
叶酸
一碳单位代
谢的重要辅
因子可通过
调节蛋氨酸
循环影响基
因组甲基化
模式。
DNA甲基化
一碳单位与
基因组
‘’CG岛‘’
C上第五个C
原子的共价
结合。
影响
改变染色体
构象,影响
转录因子与
基因启动子
的结合,从
而调控基因
表达。
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叶酸调节一碳单位代谢
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叶酸对DNA甲基化及基因表达影响
C -- Control
R -- Maternal protein restriction
RF-- Maternal protein restriction + folic acid
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IUGR对一碳单位代谢相关基因表达影响
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2.研究目的及意义
①验证不同诱导宫内发育迟缓途
径对基因表达影响是否存在差异。
②研究叶酸对基因表达调控
是否具有物种特异性。
③探索母体添加叶酸是否可改善IUGR
对肝脏一碳基团代谢负面影响。
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研究意义
完成本研究可为认识和深入研究母体叶酸营
养对IUGR仔猪肝脏一碳单位代谢和基因表
达影响积累资料。
为通过营养途径解决IUGR对胎儿后天生长
发育影响奠定基础。
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3.试验设计
妊娠母猪
对照组(C)
试验组(FS)
12头母猪
12头母猪
基础饲粮
基础饲粮+叶酸
叶酸1.3mg/kg NBW 1.4-1.5kg 叶酸30mg/kg
8头 NBW IUGR 0.8-0.9kg 8头 NBW
8头 IUGR
8头 IUGR
基础饲粮参照NRC(1998)配制,常规饲养管理
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测定指标及方法
①放疫法测定分娩仔猪血清叶酸含量。
②荧光定量PCR检测目的基因相对表达量。
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一碳单位代谢相关基因
甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT1A,MAT2A)
DNA甲基化转移酶-1(DNMT-1)
亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)
胱硫脒-β-合酶(CBS)
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能量代谢与氧化应激相关基因
过氧化物酶增殖物激活受体(PPARα, PPARγ )
糖皮质激素受体(GR)
瘦素受体(ob-R)
乙酰辅酶A氧化酶(AOX)
△Ct计算目的基因相对表达量,SPSS13.0统
计软件进行方差分析和多重比较。
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4.试验结果与讨论
添加叶酸对血清叶酸含量影响
血清叶酸含量 (nmol/L)
对照组(C,叶酸1.3ppm)
处理组(F,叶酸30ppm)
NBW+C
IUGR+C
NBW+FS
IUGR+FS
19.24±1.26B
18.23±1.65B
27.30±1.58A
25.65±1.81A
同行标注大写字母不同表示差异极显著(P<0.01),小写字母不同表示差异显著
(P<0.05)。下表(图)同。
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叶酸对一碳单位代谢相关基因表达量影响
NBW+C
NBW+F
IUGR+C
IUGR+F
1.4
a
1.2
1
a
a
a a
a a
a
0.8
0.6
b
a a
b
ab
b b
b
0.4
0.2
0
MAT1A
MAT2A
CBS
MTHFR
DNMT1
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叶酸对能量代谢相关基因表达量影响
3
NBW+C
NBW+F
IUGR+C
IUGR+F
A
2.5
a
2
1.5
B B
1
B
A
ab
b b
B B
a a
AB
b b
0.5
0
PPARα
PPARγ
GR
ob-R
AOX
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大鼠上研究显示母体添加叶酸影响后代肝脏PPARα
基因表达量,但对PPARγ无显著影响。
本次试验以猪作为研究对象,发现叶酸影响仔猪肝
脏PPARγ基因表达量,但对PPARα无显著影响。
说明叶酸对基因表达调控具有物种特异性。
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CBS和ob-R基因表达量主要受体重影响,叶酸添加
无改善效应。
CBS和ob-R基因表达调控受内分泌影响,妊娠期养
分摄入决定激素分泌,体重是养分摄入的体现。
叶酸改变ob-R基因表达量,但不同猪种之间存在差异。
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5.结论
自然情况下发生IUGR显著影
响新生仔猪肝脏一碳单位代谢
和能量代谢相关基因表达量
结
论
增加妊娠母猪饲粮叶酸含量
可在很大程度上缓解IUGR对
仔猪肝脏基因表达影响
叶酸对基因表达调控具有基
因特异性,物种间存在差异
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四川农业大学动物营养研究所
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