Transcript DNA hybridization PPT (491Kbyte)

201421020 박수현
201421022박희란
201421024김지원
1. DNA HYBRIDIZATION
2. 원리
3. 방법
INdex
1. DNA HYBRIDIZATION
DNA HYBRIDIZATION
DNA 서역의 풀에서 유전적 유사
성을 측정하기 위한 분자 생물학
적 기법을 뜻하며,
hybridization 이라는 것은 유
전자의 개념으로 봤을 때 DNA나
RNA는 ATGCU와 같은 염기를
이루게 된다.
출처. http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/nucleic.php
예로 들면 3`TTAACCGG5`의
DNA가 있다고 할 때 여기에 상
보적인 ‘5`AATTGGCC3`의
DNA또는 DNA를 부착시키는 것
을 의미한다. 이러한 DNA의 상
보성에 의해 한 가닥DNA가 상대
DNA를 인식하고 결합하는 성질
을 이용하는 것이 DNA 부합화
2. 원리
Hybridization의 원리
두 가닥으로 되어 있는 DNA를 열처리 하거나 화학적
인 처리를 하여 한 가닥 DNA로 만드는 과정을 변성
Denaturation 이라 하며,
다시 온도를 내려주거나 화학적으로 원상 복구해 주
면 각각 한 가닥으로 변성되었던 DNA가 상보적인 염
기서열을 가진 상대 DNA와 다시 두 가닥으로 결합하
는데 이 과정을 Nucleic acid hybridization 이라고
한다.
출처. http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/nucleic.php
3. 방법
혼성화의 방
법
1.예비 혼성화 반응
막의 크기에 맞는 양
의예비 혼성화 반응
용액을 넣고 막이
용액에 완전히 적셔
지도록 한 다음
42℃, 2~3시간 반
응시킨다.
출처 :chanjae.net/434
2. 혼성화 반응
예비 혼성화 반응 용액을 버리며
혼성화 반응 용액에 끓는 물 중에
서 변성시킨 후 급냉한 탐침을 첨
가한 다음 막에 부어준다.
1~2시간 반응시킨 다음 100℃로
가열한 탐침을 첨가하여 잘 혼합
하고 65℃에서 하룻밤 혼성화 반
응시킨다. 혼성화 반응 용액 중
덱스트란 설페이트는 혼성체 형
성속도를 증가시키는 목적으로
또 Denhardt 용액이나 청어 정자
DNA는 백그라운드를 낮게 억제
하는 목적으로 첨가하고 있다.
혼성화 반응에서 온도는 매우 중
요한 조건으로 탐침의 융해온도
(Tm)는 탐침과 상보적 배열인 혼
Thank
YOU