Transcript 3.2.2. L'auxèse et l'histogenèse On peut tuer les cellules par du méthanol bouillant.

3.2.2. L'auxèse et l'histogenèse
On peut tuer les cellules par du méthanol bouillant. Cette technique conserve les
polysaccharides insolubles dans l'alcool. Associée éventuellement à une action de protéase,
elle permet de transformer l'échantillon en un fantôme (ghost) réduit au réseau tridimensionnel
de ses parois cellulaires. L'utilisation d'un extensomètre permet alors de mesurer les propriétés
des parois soumises à des tensions programmées.
Schéma d'un extensomètre.
Celui-ci utilise un capteur de
pression (mesure des
pressions ou tensions
exercées sur l'échantillon) et
une vis micrométrique
manipulée par un moteur
asservi (mesure des
déplacements). L'échantillon
placé entre 2 pinces peut
ainsi être soumis à une
tension connue et sa
déformation enregistrée.
Extensibilité des parois cellulaires :
L'expérience a été réalisée à l'aide de segments de 1cm prélevés dans un hypocotyle de
soja vert en croissance, incubés 3 heures avec ou sans auxine. Les échantillons sont
tués par du méthanol bouillant puis les fantômes obtenus sont placés dans
l'extensomètre et soumis à une tension de 50 grammes puis relâchés. La déformation de
l'échantillon est mesurée en continu.
Extensibilité de fantômes de paroi d'hypocotyles de soja à différents pH
Vitesse d'élongation d'échantillons vivants d'hypocotyles de soja aux mêmes pH
Explication de l'élasticité de la paroi : déformation des hémicelluloses sans
modification de la structure de la paroi
Intervention de l'expansine dans la réalisation d'une déformation plastique.
Suite à la mise en présence d'auxine, conjointement à l'élongation cellulaire,
on observe une baisse de pH (de 0,4 unités) après un temps de latence de
8 à 10 minutes. Expériences réalisées sur des hypocotyles de Soja
La redistribution de l'auxine suite à la géoréception
A droite un mutant pin ne possède plus de gravitropisme.
La protéine pin est une protéine membranaire
Localisation d'aux.1, responsable
du transport de l'auxine
Les modifications de l'organisation cellulaire au cours de la croissance
(cellules de racine)
Les épaississements de lignine des
trachéides et vaisseaux du xylème
Portion d'une cellule élaborant la paroi secondaire : on repère de nombreux
dictyosomes, du réticulum développé et des microtubules à proximité de la membrane.
Composition et organisation du
réseau non répétitif de la lignine des
parois
Ponctuations et perforations dans des vaisseaux vrais