Transcript 动物细胞培养课件

利用植物细胞可
以培育成植物体，
那么，你能否利
用动物细胞大量
繁殖动物体，从
而保护这些濒危
动物呢？
白
鳍
豚
“水中的大熊猫”
中国一级重点保护动物
世界12种最濒危动物之一
2.2 动物细胞工程
动物细胞培养
常用
技术
手段
动物细胞核移植
动物细胞融合
生产单克隆抗体
(基础)
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
1.动物细胞培养的概念：
从动物机体中取
出相关的组织，将
它分散成单个细胞，
然后放在适宜的培
养基中，让
这些细胞生长和增
殖。
（1）需分散成单个细胞；
（2）需要在培养基上培养；
（3）动物细胞培养的实质是
细胞增殖。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
1.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？
2.为什么要将组织块分散成单个细胞？
3.如何将组织块分散成单个细胞？由此可说明细胞间的物质是什么成份？用胃
蛋白酶行吗？为什么？胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？
4.动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？
5.培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？如此时细胞数量并未达
到人们的需求，应该怎样办？
6.什么叫细胞贴壁？什么叫细胞的接触抑制？
6.如何理解原代培养和传代培养？
7.传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？
8.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
9.动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
取动物组织块
一. 动物细胞培养
2.动物细胞培养的过程：
剪碎组织
用胰蛋白酶处理
分散成单个细胞
制成细胞悬液
转入培养液中
进行原代培养
贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单
个细胞，制成细胞悬液
转入培养液中
进行传代培养
放入二氧
化碳培养
箱中培养
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
2.动物细胞培养的过程：
(1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做
动物细胞培养材料？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞
增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养
(2)为什么要将组织块分散成单个细胞？
成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
2.动物细胞培养的过程：
(3)如何将组织块分散成单个细胞？
先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理
(4)由此可说明细胞间的物质是什么成份？
细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质
(5)用胃蛋白酶行吗？为什么？
不能，因为两者的最适pH不同，而正常组织
细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近
(6)胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？
不会，因为胰蛋白酶处理时间短暂
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
2.动物细胞培养的过程：
细胞贴壁
细胞的接触抑制：当贴壁
细胞分裂生长到表面相互
接触时，细胞就会停止分
裂增殖
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
2.动物细胞培养的过程：
(7)动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？
易于培养细胞贴壁，进行生长增殖
(8)培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞
就会停止分裂增殖
(9)如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？
将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理分散，
摇晃，继续培养
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
2.动物细胞培养的过程：
(10)如何理解原代培养和传代培养？
动物组织消化后的初次培养就是原代培养，接触抑
制后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养
(11)传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？
不都能，发生突变，朝着癌细胞方向发展
(12)人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为有少部分还发生突变
(13)动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个
向癌细胞方向发展
体？
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增
多，不能发育成新的动物个体
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
3.动物细胞培养的条件：
生物体
内的细
胞是生
活在什
么样的
环境呢？
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
3.动物细胞培养的条件：
①无菌、无毒的环境
（无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液）
②营养
（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、
微量元素、动物血清、血浆等）
③温度和pH
（接近动物体温；pH为7.2~7.4）
④气体环境
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
3.动物细胞培养的条件：
动物细胞培养液的主要成分是什么？
较植物组培培养基有何独特之处？
主要成分：
葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元
素、维生素、血清、血浆等。
独特之处有：
1、液体培养基
2、成分中有血清、血浆等
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
一. 动物细胞培养
4.动物细胞培养技术的应用：
①生产有价值的蛋白质制品（如病毒疫苗、
干扰素、单克隆抗体）
②培养基因工程的受体细胞
③检测有毒物质
④用于生理、病理、药理等研究
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
葡萄糖、血清、
培养基特有成分 蔗糖、植物激素
血浆
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育
无病毒植株等
获得细胞或
细胞产物
巩固训练
1.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ D ）
A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养
2.讨论：动物细胞培养如何检测有毒物质毒性的大小？
用含有一定浓度有毒物质的细胞培养液和正
常细胞培养液同时培养正常细胞，通过对照
观察变异细胞的百分数来确定其毒性强弱