Transcript 1. Mikrobiológiai módszer

PARENTERÁLIS KÉSZÍTMÉNYEK GYÁRTÁSÁNAK
KORSZERŰ SZEMPONTJAI
A parenterális gyógyszerkészítmények injekció, infúzió, vagy
implantáció útján az emberi vagy állati testbe juttatásra szánt,
steril készítmények
A parenterális készítmények
csoportosítása:
Felhasználásuk előnyei:






injekciók,
infúziók,
koncentrátumok injekciók,
infúziók készítéséhez,
porok injekciók, és infúziók
készítéséhez,
implantátumok.






Igen kedvező biohasznosulás
Eszméletvesztés esetén is
alkalmazható gyógyszerformák
Teljes értékű parenterális
táplálás megvalósítása
Citosztatikus additivek ex
tempore készítése
Védőoltások alkalmazása
Bakteriális, virális és gombás
megbetegedések hatékony
kezelésének formája
A szervezet homeosztázisának
helyreállítása
Parenterális készítmények sajátosságai
Speciális követelmények


sterilitás
pirogén mentesség
Alkalmazott segédanyagok









oldószerek
izotonizáló szerek
pH korrigensek
oldékonyságot növelők
mikrobiológia stabilizátorok
inert gázok
antioxidánsok
felületaktív anyagok
viszkozitás növelők
Pirogén vizsgálatok
Biológiai módszer






Egészséges
Váltivarú
Legalább 3kg
Max.5ml/ttkg a vizsgálandó
oldat
Fülvénába
Rektális hőmérés
Bakteriális endotoxin
vizsgálatok






A módszer: gél-koagulációs
módszer határérték-vizsgálat
B módszer: gél-koagulációs
módszer: félkvantitatív
vizsgálat
C módszer: turbidimetriás
kinetikus módszer
D módszer: kromogén
kinetikus
E módszer: kromogén
végpont módszer
F módszer: turbidimetriás
végpont módszer
LIMULUS POLYPHEMUS
Nyílt keringési rendszere van. Az immun
rendszere az egyetlen vérsejtjéből, az
amöbocitából áll. (érdekesség, hogy kék
vére van: haemocianin (réz van a vas
helyett)) Az amöbocita oblong alakú,
amely granulákban tartalmazza a
koagulogént.
Lefejik a vért. Ez csak az amöbocitákat
és a szérumot tartalmazza.
Centrifugálják, az amöbociták alulra
kerülnek. Leöntik a tetejéről a szérumot,
sóoldattal átmossák az amöbocitákat.
Összegyűjtik és BET vizzel addig
mossák, míg megduzzadnak és
kipukkadnak (lizálnak). Megtisztítják a
sejtmaradványoktól és fagyasztva
szárítva hozzák forgalomba
Néhány készítmény maximális dózisa és endotoxin
küszöbértéke
Név
Dózis
Endotoxin limit
(EU/mg, ml)
Név
Dózis
Endotoxin limit
(EU/mg, ml)
---
0,25
Gentamicin szulfát
3,00 mg
1,70
Humán szérum albumin
10,00 ml
0,50
Fruktóz
10,00 ml
0,50
Amphotericin B injekció
1,00 mg
5,00
Hydrocortison acetát
1,07 mg
4,67
Atropin szulfát
0,09 mg
55,60
Lidocain HCl injekció
4,50 mg
1,10
Kálcium klorid
25,00 mg
0,20
Phenobarbitál Na inj.
20,00 mg
0,30
Chlorpromazin HCl
0,72 mg
6,90
Morphin szulfát
0,29 mg
17,00
Dexamethason acetát szuszp.
0,23 mg
21,74
Neomycin szulfát
3,80 mg
1,30
Dextróz <5%
10,00 ml
0,50
Procain HCl
8,60 mg
0,60
Digitoxin injekció
0,045 mg
111,00
Ringer Injekció
10,00 ml
0,50
Digoxin injekció
0,025 mg
200,00
Tetracyclin HCl
10,00 mg
0,50
Dopamin HCl
0,30 mg
16,67
Vancomycin HCl
15,00 mg
0,33
Ephedrin szulfát injekció
3,00 mg
1,70
Injekciónak való víz (WFI)
Sterilezési módszerek és körülmények
Sterilezés gőzzel (autoklávozás)
Bacillus stearothermophilus
Sterilezés száraz hővel
Bacillus subtilis
Sugársterilezés
Bacillus pumilus
Gázsterilezés
Bacillus stearothermophilus
Sterilezés szűréssel
Pseudomonas diminuta
Sterilitás vizsgálatok
Sterility Assurance Level (SAL érték)
1. Mikrobiológiai módszer
2. Parametrikus felszabadítás
Lehetőleg a végső tartályban sterilezzünk,(egyébként
baktériumszűrés, aszeptikus gyártás alkalmazható) a
sterilitásvizsgálat helyett a hatóság engedélyezheti a
paraméteres, a gyártási dokumentáció adatain alapuló
felszabadítást.
EOQ: A paraméteres felszabadítás a felszabadításnak egy
olyan rendszere, amely kellő biztosítékát adja annak, hogy a
termék megfelel az előírt minőségnek azon információk
alapján, melyeket a gyártási folyamat során gyűjtöttünk,
illetve teljesültek a specifikus GMP követelmények is.
Parametrikus felszabadítás
Előnyök
A sterilitási teszthez felhasznált minta megtakarítása
(pl. 20 db/klávciklus)
Gyártási ciklusidő, a készletek csökkentése
(a sterilitási teszt időtartama ált. két hét)
A vizsgálati költség eliminálása, beleértve a teszthez szükséges
kitet, egyéb anyagokat és a munkaerő árát is.
AZONBAN
Amennyiben a hatóság megadta a PF jogát, a későbbiekben nincs
arra lehetőség, hogy egy gyártási probléma esetén, egy ismételten
elrendelt sterilitási vizsgálat alapján döntsünk a termék
felszabadíthatóságáról!!!!
Sterilitás biztosítási rendszer
Kockázati besorolás
Kockázat elemzés sematikus ábrája
Biotechnológia
A biotechnológia általánosságban a mikroorganizmusok növényi, valamint állati részek
hasznosítható anyagok termelésére való alkalmazását foglalja magába.
Gyógyszerészeti biotechnológia a gyógyszerészet területén felhasználható alapanyagok
biotechnológiai úton való előállítását jelenti.
A gyógyszeranyagok gyártására felhasználható gazdaszervezetek:
Prokarióta Escherichia coli
Eukarióta élesztő
Kínai hörcsög petefészek (Chinese Hamster Ovary, CHO)
Biotechnológiai úton előállított fehérjék:
Hematopoetikus növekedési faktorok
Interferonok, interleukinek
Izulinok
Növekedési hormonok
Rekombináns koagulációs faktorok, trombolitikus ágensek
Monoklonális antitestek
Fehérjék tulajdonságai:
Elsődleges szerkezet kapcsolódó aminosavak sorrendje
Másodlagos szerkezet α-hélix, β-redő struktúra
Harmadlagos szerkezet másodlagos szerkezeti elemek kombinációja
Biotechnológiai gyógyszerek
A kismolekuláktól való
különbségük
 nagy molekulatömeg
 heterogenitás
 immunogenitás
kockázata
 karakterizálásuk analitikai
módszerekkel nehéz






Injekciók, gyártásuk igen
körülményes
Kíméletes technológia
(hő, fény, pH, kevertetés,
rázás)
Sterilitás biztosítása
szűréssel
Pirogén mentesség
Primer
csomagolóanyagok
kompatibilitása
Raktározási körülmények
A fehérjék bomlása
Deamináció
Oxidáció
Aggregáció
Az aggregáció lehetséges útvonalai
Liofilezés
n szubl 
N  p szubl
2  n  M  R T
ahol,
N = Avogadro-féle szám
M = a szublimálandó anyag molekulatömege (víznél 18)
pszubl = a szublimációs nyomás
d ln p
dT

 szubl
RT
2
ahol,
Λszubl = szublimációs hő
Liofilezés
Fecskendők I.
DUPHAR-féle fecskendő
Megtöltött és összeszerelt
Preject Mono
Megtöltött és összeszerelt
Preject Duo
Fecskendők II.
Vetter-féle kétkamrás fecskendő
Izolátortechnika
Termelősor
Dekontaminálás H2O2-al
Szárítás
A relatív nedvességtartalom csökkentése 20% alá
H2O2 koncentráció beállítása
H2O2 injektálása a kívánt értékre
Szanitálás / dekontaminálás
A H2O2-vel telített levegő cirkuláltatása
Kilevegőztetés
A H2O2 koncentráció csökkentése a citalytic converteren
keresztül
Friss levegővel való átszellőztetés
Anyag ki/beadások izolátorba
Steril, pirogén mentesített üvegek
Pl. alagúton keresztül folyamatosan beadása a töltés ütemében
Termék
Zárt sterilezett csővezetéken keresztül
Dugók, kupakok betétek beadására
Steril anyagbeadó (RTP)
Mintavéte
„Off line” vizsgálatok
Petri Dish
Monitorozáshoz szükséges anyagok
Szerszámok
Javításhoz szükséges anyagok
Sterilezett gépalkatrészek
Másik kiszerelési forma
Izolátor további előnyei
• Nincs szükség steril ruhára
• LF alatt csak kesztyűvel lehet benyúlni
• CNC -be tehető, így akár természetes fénybe
is helyezhető a berendezés
•Hatékony és megbízható, megismételhető
tisztítási eljárások építhetők be
•Integritás elvégezhető működés előtt és után
– Tf ≤ 0,25%