Transcript A primer congenitalis glaucoma (PCG)
A primer congenitalis glaucoma (PCG) aktív esetfelkutatásai és géndiagnosztikája
Béres J, Vas Sz, Kalmár L, Sényi K, Andrikovics H, Tordai A OSZMK VRONY NETT XIX. Nemzetközi Kongresszusa Győr 2011. április 26-27
Glaucoma(zöldhályog)
• Fokozott szembelnyomással járó kórkép, következménye: a látóideg – progresszív károsodása, fokozatos látótércsökkenés – Felnőtt lakosság 2%-a érintett – Primer vagy szekunder • Nyílt vagy zárt zugú • Felnőttkori, gyermekkori és fiatal – felnőttkori ill. veleszületett • Genetikai háttér
PCG (buphtalmos)
• Abnormális trabekuláris hálózat (IOP↑) • Öröklődés • Autoszómális recesszív, de pszeudodominancia!
• Genetikai heterogenitás • GLC3A (2p21,
CYP1B1
), GLC3B (1p36), GLC3C (14q24.3-q31.1) • MYOC • Fenotípusos heterogenitás • Penetrancia változó (40-100%) (Bejjani, 2000) • Földrajzi különbségek Nyugati országok: 1:10.000-20.000
Közel-Kelet: Szlovák cigányok: 1:2500 1:1250 (Francois et al. 1980) 3 (Gencik et al. 1982)
CYP1B1
5’ CYP450 szupercsalád tagja metabolizál: karcinogének, szteroidok, retinolsav, melatonin a szemben ill.15 egyéb humán szövetben előfordul rekombinációs eseményekre hajlamos növekedésben és differenciálódásban is részt vesz (szem ?) Exon 1 Exon 2 Exon3 3’ hinge régió H I hélix K J hélix hélix meander L hélix hem kötő régió 4
A CYP1B1 szembetegségekben
• Kandidáns gén: PCG, Péter anomália, Rieger anomália aniridia, írisz hypoplasia, … • Ritkán kandidáns: POAG-ban • Módosító: POAG-ban (MYOC) • JOAG 5
Módszerek 1. – PCR-RFLP
( enzimmel történő emésztés, gélelektroforézis)
178 bp
PCR termék
29 bp konstans hasítási hely 129 bp 20 bp hasítási hely a normál allélen 1 2 3 4 5 6 252 bp 186 bp 1 emésztetlen PCR-termék 2,3 - Homoz igóta normal genotípus 4 - Heteroz igóta genotípus 5 - Homoz igóta mutáns genotípus 6 Molekulatömeg marker
6
3% agaróz gél, ethidium-bromide festés
Módszerek 2.- szekvenálás
7
Eredmények- populációgenetika
Glu387Lys
egészséges magyarországi
romák
mutáció gyakorisága között (PCR-RFLP) Észak Magyarország Dél Magyarország Vizsgált romák száma 207 150 Allélfrekvencia (%)
1,5
0 Hordozó gyakoriság (%) 3 0 Összevetés irodalmi adatokkal (Plasilova et al.1999) Szlovák romák 158 5 10 8
9
9 beteg 3 beteg 2 beteg 7 beteg
Össz: 21
Eredmények- mutációk
CYP1B1 gén kódoló szakaszaiban talált mutációk
Glu387Lys/Glu387Lys Met1Thr/Gly61Glu g.4673insC/g.7901_7913
g.4673insC/g.4340delG
g.7901_7913/ Glu229Lys/ -/-
Roma szárm.
CYP1B1 mutáció Betegség kezdet
+ _ _ _ 100 % 33 % születéskor születéskor születéskor 6 hónapos !
Születéskor Kivétel: 1 (6 hónapos) 10
Eredményeink összevetése irodalmi adatokkal PCG beteg
Szlovák romák (Plasilova, 1999) Magyar romák (jelen vizsg., 2003) Arabok (Bejjani, 2002) Európaiak (Sitorus, 2003) Magyarok (jelen vizsg., 2003) Brazilok (Stoilov, 2002) Japánok (Mashima, 2001)
CYP1B1 mutáció
n=43 n=10 n=62 n= 9 100% 100% 92% 11% n=14 n=52 21% 42% n=65 17%
Összefoglalás
• A PCG genetikai háttere hazánkban élesen elkülönül roma és nem roma betegek esetében (Glu387Lys) • Az északi és déli romapopuláció között a Glu387Lys allélgyakoriságban különbség • Nem roma betegek esetében a CYP1B1 csupán 33%-ban volt felelős a betegségért • Egyéb lókuszok szerepe 12
Hogyan tovább?
• További betegek vizsgálata CYP1B1-re • Egyéb gének vizsgálata (MYOC, …) • Kapcsoltsági vizsgálatok (családok) • Fenotípus-genotípus összefüggések keresése (mért paraméterek) •Problémák: •Származás, rokonházasság • beteg követése •compliance 13