Agencia Federal Médico - Biológica Centro de Investigación Nacional Instituto de Inmunología Moscú, Rusia Abordajes novedosos para el desarrollo de vacunas en el Instituto de Inmunología Desarrollo - Producción - Introducción

Managua, Nicaragua, 26-28 de noviembre del 2014

Retos • Infecciones recién emergidas (VIH, Ébola) • Incremento de las infecciones viejas (tuberculosis, malaria, hepatitis)

La vacuna eficaz y la vacunación representan la mejor manera de controlar las enfermedades de importancia social

Requerimientos • • • Seguridad Eficiencia Especificidad

Evolución de las vacunas • Vacunas tradicionales (virus / bacterias enteros, vivos o atenuados) • Vacunas de virus fraccionados • Vacunas sub-unitarias • Vacunas basadas en los productos recombinantes (virus recombinante, vacunas de ADN, antígenos recombinantes)

Vacuna eficaz y vacunación: vacunas tradicionales Virus / bacterias atenuadas o muertas

Vacuna eficaz y vacunación: vacunas tradicionales • Efectos secundarios • Los casos en que no podemos usar virus atenuados o muertos por razones de seguridad (VIH) • No podemos cultivar el virus o los títulos son demasiado bajos • La producción (fabricación) requiere altos estándares de seguridad

Evolución de las vacunas

Vacunas de virus fraccionados: partes de virus /bacterias destruidas Vacunas sub-unitarias: antígenos purificados

Vacuna eficaz y vacunación: enfoques nuevos • Antígenos novedosos: (virus recombinantes, vacunas de ADN, antígenos recombinantes) • Adyuvantes nuevos • Diseño nuevo para lograr la eficiencia y seguridad mejoradas

Vacuna ideal: seguridad, eficiencia, especificidad • Dosis baja, antígeno estándar • Mejora de la memoria inmunológica – menos revacunación o ninguna • Corrección fenotípica de la respuesta inmune • Vacunación efectiva de las personas con inmunodeficiencia

Vacuna ideal: seguridad, eficiencia, especificidad (continuado) • Manejo de la respuesta inmune • Vacunación terapéutica • La superación de las barreras biológicas • Dirección de entrega de antígenos

Antígenos nuevos (sub-unidad, recombinante): ventajas y retos Ventajas: • Producción de cantidades suficientes de antígenos estándar altamente purificados • Seguridad o inocuidad Retos • El nivel de la respuesta inmune • Inmunogenicidad

Corrección fenotípica de control genético de la respuesta inmune (la inmunización con T, conjugado GAL polielectrolito) (Т,Г)-A-Л 120 100 80 60 40 20 CBA no PE C57BL + PE

Т-independencia de la respuesta inmune al conjugado Ag-PE 140 120 100 80 60 40 20 4 3 2 1 BSA BSA-PE BGT BGT-PE nu/+ nu/nu nu/+ nu/nu

Nueva tecnología: las vacunas de subunidades de polímero El uso de soluble en agua sintética - adyuvante inmuno-modulador polioxidonio

N О N СН 2 СН 2 + N Br _ N СН 2 СН 2 n

ММ 60000 - 100000D

Mecanismos de acción polioxidonio al sistema inmunológico humano Polioxidonio

Neutrófilos Monocitos / macrófagos Células NK Las células dendríticas Formas de O2 Activo Matanza de microbios extra-celulares Citotoxicidad c o-estimuladore s IL-12 Activación de células Th1 Expresión HLA-DR Presentación de antígenos Síntesis del interferón alfa  Defensa Antiviral Factor estimulante de colonias Citocinas TNF, IL-6, IL-1 Anti-inflamatorias Formas de nitrógeno activo Leucopoyesis Defensa anti Bacteriana Células T & В Matanza de microbios Extra-celulares

La primera vacuna de subunidad de polímero que desarrollamos: Grippol®, vacuna contra la gripe

Virus de la gripe hemaglutinina y neuraminidasa

+

Adyuvante inmune А (Н 1 N 1 ) А (Н 3 N 2 ) В

+

POLYOXIDONIUM ® Ag 5 µg PO 500 µg

Triple disminución de la dosis

Evolución de la vacuna contra la gripe

VACUNAS DE VIRUS COMPLETO Muerto o vivo VACUNAS DE SUB UNIDADES VACCIGRIP NANO-VACUNA DE SUB-UNIDADES DE POLÍMERO GRIPPOL REACTOGÉNICO DE EFECTIVIDAD BAJA DOSIS EFECTIVA 100 MKG EFECTIVA TOXICIDAD BAJA DOSIS EFECTIVA 15 MKG EFECTIVIDAD ALTA NO TÓXICAS DOSIS EFECTIVA 5 MKG

El uso de Polyoxidonium® mejora la inocuidad y eficiencia de la vacuna • El PO interactúa con subunidades HA subunits y la unión de múltiples puntos, produciendo así las estructuras estables de 117-220 nm • Estas estructuras imitan los viriones de la gripe 80-120 nm • La forma de presentación de las estructuras PO-HA al sistema inmune es similar a la forma de presentación del virus de la gripe nativa Resultado: inducción de la respuesta inmune adecuada

El uso de la vacuna contra la gripe, Grippol® Número de personas vacunadas con GRIPPOL: • 2007 – 8 mln p • 2008 – 14 mln • 2009 – 22 mln • 2010 – 26 mln • Total > 100 millones de personas

Vichrepol, vacuna experimental contra el VIH

La proteína recombinante rec(24-41) Inmunomodulador Polyoxdonium P oly -His р24 gр41

Estructura Vichrepol

N O N CH 2 CH 2 n … Br N + CH 2 CO rec (24-41) C NH N N O H CH 2 CH 2 m

Vacuna Vichrepol contra el VIH: Resultados de ensayos clínicos de la Fase I: inocuidad

Tolerancia - Bien tolerada Reacciones Adversas

-

Ninguna incidencia de eventos adversos de toxicidad local o sistémica, auto-inmunidad o alergia a la vacuna

-

Ninuna hiper-sensibilidad inmediata o retardada Seguridad (inocuidad)

-

Ningún cambio en los parámetros clínicos o Bioquímicos debido a la vacunación

La respuesta inmune de Vichrepol se correlaciona con la dosis

mcg/inyección 2.5 mcg 25 mcg respondieron / temas 12 1/3 2,5 mcg 1/3 5 mcg 2/3 10 mcg 3/3 25 mcg 3/3 50 mcg 10 8 6 4 2 1 0 2.1.1.

3.1.1.

5.1.1

.

6.2.1.

9.2.1.

14.2.1

13.3.1 15.3.1 21.3.2

18.4.1 20.4.1 30.4.1 24.5.1 26.5.1 29.5.1

Identificación del paciente

Vacuna Vichrepol contra el VIH: Resultados de las pruebas clínicas en la I Fase: inmunogenecidad • Vichrepol induce Ab anti-VIH en voluntarios inmunizados • Entre más alta es la dosis, más alta es la respuesta inmune en el individuo y es más alto el número de respuestas al tratamiento por grupo.

Resumen: Vichrepol es un producto seguro e inmune-génico

Vichrepol incluido en las listas de calificación de IAVI

Nuestras vacunas: vacunas contra las alergias Alergoide + Polioxidonium

Principales medidas de creación allergotropine purificación del alergeno nativo creación de su forma alergoide mediante modificación química - Conjugación del alergeno con el - Inmuno-modulador Polyoxidonium Alergoide Polyoxidonium

N О N СН 2 СН 2 + N Br _ CН 2 С N СН 2 СН 2 О NН аllergoid n

Estimulación de células Th1 por el Polyoxidonium (PО)

Presentación del Antígeno (alérgeno) Th0 IFN γ CD80/86 CD28 PО MHC-II TCR DC MP МN DC - célula dendrítica MP – macrófagos MN - células mononucleares Reconocimiento de MHC-II-péptido y co-estimulación Th1 TNF α IL-2

1200

Los resultados de SAIC con alérgeno y allergotropines

1000 800 600 400 200 0 1 5 9 13 17 No de inmunizaciones 21 25 29 33 - ALLERGOTROPINES 37 41 45 - ALERGENO

Nuestros alergo-trópicos allergotropins

Nuestras vacunas: vacunas contra infecciones entéricas

La construcción de las vacunas lipopolisacárido

Enzima O- LIPOSACHARIDE (LPS) LPS(O-antígeno) cápsula

Vianvac®: la vacuna contra la fiebre tifoidea, VI polisacárido, líquido

Enzima Vi-antígeno Nucleus Sip ABCD LPS(O-antigen) cápsula Salmonella entérica sv typhi Кd=0,25 Cromatografía de gel de Vi-antígeno Sefacril S-1000, 0,2М NaCl

Vianvac®: la vacuna contra la fiebre tifoidea, VI polisacárido, líquido Inscrita en 14 países, incluyendo 6 países de la región de Asia 

cromatográficamente puro



el alto nivel de seguridad



esquema de inyección única



el rápido (2-3 semanas) inicio de la respuesta inmune adaptativa



vacunación efectiva de los niños desde los 3 años de edad

Shigellvac®: Vacuna contra la disentería Sonnei

También se ha desarrollado la vacuna contra la disentería de Flaeckner 2a,1b)



Cromatográficamente puro



Alto nivel de seguridad



Esquema de inyección única



Rápido inicio (2-3 semanas) de la respuesta inmune adaptativa



Vacunación efectiva para niños desde los 3 años de edad



Alto grado de sero-conversión, independiente de los antecedentes en los niveles de anticuerpos

Vacuna anti choque para profilaxis de choque endo-septico y corrección

120 100 80 60 40 20 0 Vacuna Control 12 24 36 48 64 72 86 Vacunación Corrección Respuesta inmune Las cepas patógenas Competencia de toxinas por el sitio de unión Vacunación 72 horas Endotoxina 3 mg por ratón

Vacuna candidata anti-shock NT LPS

Tecnología experimental de bajo lipopolisacárido toxina (NT-LPS) y su producción de derivados desarrollado La serie piloto de NT-LPS y sus derivados emitida Baja lipopolisacárido tóxica (NT-LPS) de Shigella sonnei Se ha preparado docmentación científica y técnica: un proyecto de regulaciones experimentales e industriales para la producción de NT LPS Se realizaron estudios pre-clínicos de NT-LPS

Nuestras vacunas Vacuna recombinante conjugada de subunidad de polímero contra la tuberculosis Vacuna combinada contra la hepatitis A y B "Hepol-А + В"

Los nuevos adyuvantes-inmune-moduladores

Construcciones muramil-peptidas Poli-electrolitos sintéticos –immune moduladores (-СH 2 -CH-) n (-СН 2 -CH-) n СН 3 (-CH 2 -CH-) n + Х С 2 H 5 + X CH 2 CH 2 C 2 H 5 n + X C 2 H 5 CH 2 CH 2 n-m + X CH CH 2 C 6 H 5 2 CH 2 m

Vacunas desarrolladas en el Instituto de Inmunología: producción de gran escala • Grippol® - vacuna contra la gripe • Vianvac® - vacuna contra la fiebre tifoidea • Shigellvac® - vacuna contra la shigellosis Sonnei

Vacunas desarrolladas en el Instituto de Inmunología (continuación) • VICHREPOL, vacuna candidata contra el VIH/SIDA: completadas las pruebas clínicas de la Fase I • Vacunas contra enfermedades alérgicas: investigaciones clínicas en desarrollo • Vacuna contra la hepatitis (A&B combinadas): estudios pre-clíncos completados • Vacuna contra la tuberculosis: estudios de laboratorio • Vacuna contra el cáncer: estudios de laboratorio

Estamos abiertos a la cooperación • El registro, comercialización, distribución • La producción manufacturera • El desarrollo de las nuevas vacunas y adyuvantes • Investigación en el ámbito de la búsqueda de nuevas tecnologías para la preparación y construcción de la vacuna

¡Gracias por su atención!

¡Gracias!