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Myélogramme et
Hémogramme Normal
C.Roumier, oct 2011
COMPTE RENDU MINIMUM D’UN HÉMOGRAMME
(ANDEM 1998)
Analyse biologique la plus prescrite en france
1 : Numération Globulaire
Leucocytes
Ht
GR
VGM
CCMH
TCMH
NP
2 : Formule Leucocytaire
Granulocytes neutrophiles
Granulocytes éosinophiles
Granulocytes basophiles
Lymphocytes
Monocytes
Autres types cellulaires
+/- morphologie des éléments nucléés
Hémogramme : analyse biologique comprenant 3 groupes de données
La numération des GR associée à la détermination de la concentration
en Hb et des constantes erythrocytaires VGM, IDR, CCMH, TCMH.
La numération et la formule leucocytaire
La numération plaquettaire
Un prélèvement unique de sang
un automate “compteur automatique de cellules ” :
hémogramme automatisé.
Très bonne reproductibilité
Rapidité d’obtention des résultats
Abaissement du coût de l’analyse
Vérification manuelle au microscope :
Présence d’ anomalies réalisation d’un frottis sanguin
Interprétation au microscope, après coloration MGG
Renseignements qualitatifs : établissement d’une formule « manuelle »,
Description d’anomalies morphologiques des cellules normales ( hématies, leucocytes,
plaquettes),et identification de cellules anormales.
Granulocytes
Lymphocyte
Monocyte
Plaquette
Blastes
Hématie
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Anisocytose : hétérogénéité de taille des GR (défini par un IDC >15%), anisocytose plaquettaire
Hypochromie : GR pâles. S’accompagne d’un TCMH <27 et un CCMH <32
Polychromasie : présence d'hématies de couleur variable (anémies régénératives,
dysérythropoïèses, nouveaux-nés)
Poïkilocytose : hématies de forme et de taille très variée
Schizocytes : Présence de globules rouges fragmentés provenant d'un obstacle sur le parcours
sanguin (SHU), demande spécifique recherche de schizocytes.
Hématies en cible : Hématies au contenu clair avec renforcement central : aspect de cible
Hématies en rouleaux : dysglobulinémie , anomalie de viscosité sanguine
Corps de Howell-Jolly : résidu nucléaire de taille variable qui se voit sous la forme d’une inclusion
de taille variable rouge foncée (normalement éliminé par la rate splénectomie (ou asplénie
fonctionnelle)
Sphérocytes : globule rouge de petite taille apparente avec disparition de la zone claire centrale.
(sphérocytose héréditaire, AHAI)
Dacryocytes : hématies en forme de larme, ou de poire. fibroses médullaires
Drépanocytes : hématies allongées en forme de faux, accès drépanocytaires
Hématies ponctuées : contenant de nombreuses petites ponctuations sombres, basophiles
(témoin d'une anomalie de synthèse de l'hémoglobine)
Anisochromie
Schizocytes
CHJ
INDICATIONS DE L'HÉMOGRAMME (1)
1) Signes généraux évoquant une diminution d'une ou plusieurs
lignées sanguines :
• Syndrome anémique : pâleur et/ou signes d'anoxie (palpitations,
dyspnée…)
• Syndrome hémorragique aigu, purpura, ecchymoses ou
hématomesanormaux…
• Syndrome infectieux inexpliqué, persistant, récidivant ou grave.
• Une atteinte de l'état général : asthénie, anorexie, amaigrissement, fièvre au
long
• cours, douleurs osseuses…
2) Des signes évoquant une augmentation d'une ou plusieurs
lignées sanguines :
• Érythrose cutanée ou prurit à l'eau chaude
• Thromboses artérielles ou veineuses,
• Syndrome tumoral : adénopathies, splénomégalie.
3) Certaines situations systématiques ou bilans :
• Grossesse
• Médecine du travail
• Médecine de dépistage
• Bilans pré-opératoires
• Bilans pré-thérapeutiques
• Suivis thérapeutiques
4) Urgence
• Un état de choc
• Une pâleur intense
• Une angine ulcéro-nécrotique ou résistante aux
antibiotiques
• Une fièvre élevée après prise de médicament, surtout après
chimiothérapie
• Traitement antimitotique
• Une fièvre résistante aux antibiotiques
• Un purpura pétéchial avec syndrome hémorragique
HEMOGRAMME NORMAL
 Cellules sanguines :
-> terminales
-> éléments fonctionnels de lignées
-> nombre très élevé et durée de vie courte
Production / j
Nombre total
(en milliard)
Durée de vie
Production / sec
(en milliard)
GR
20 000
120 j
200
2 500 000
PN
500
24 h
50
625 000
PLQ
1 000
7j
100
1 250 000
=> nécessité de production importante et continue
 Volume sanguin : de 250 ml chez le Nné à 5 l chez l ’adulte
 Étude des éléments fonctionnels des lignées hémato :
-> leucocytes : formule sanguine
-> hématies : Hb, Ht, VGM, TCMH, CCMH
-> plaquettes : taux, VPM
 Valeurs normales variables en fonction de l’age et du sexe
Le temps préanalytique : de l’acte de prescription de l’analyse jusqu’à la réalisation
pratique de cette même analyse.
La prescription : 2 cas
Bilan systématique : pas d’information cliniques
Bilan d’exploration sur un patient ayant une situation clinique connue.
Réalisation du geste
Sujet au repos assis ou couché, à distance de tous stress, effort physique, repas.
Tenir compte du cycle nycthéméral,.
Eviter les ponctions pendant perfusion , nutrition parentérale…
microméthode au talon chez le nouveau-né,
 au bout du doigt chez les patients diffciles à prélever
Perturbations
Préanalytiques
Stress patient
Conséquences sur
l’échantillon
Démargination des
granulocytes
Prélèvement difficile
Retentissement sur hémogramme
Valeur leucocytaire augmentée
Formule leucocytaire perturbée
« Fausse polynucléose »
Fausse thrombopénie
Activation plaquettaire
Agrégation plaquettaire
Particularités liées au patients Agregation des plaquettes sur Fausse thrombopénie
EDTA
Réaliser formule sur tube citraté
Mauvaise homogénéisation
Caillots
Numération irréalisable
du tube
Risque d’obturation des tubulures
de l’automate
Anomalie entrainant une
microcaillots
inefficacité partielle de
anticoagulant
( amorce de coagulation avant
entrée du sang dans tube ou
quantité de sang non adaptée
à la quantité d’anticoagulant)
Agglutinine Froide
Dépôt d’Ig sur hématies
Prélèvement sur tubulure de
perfusion
Variation pression osmotique
Dilution
Résultats erronés avec
modification de tous les paramètres
de l’hémogramme Leuco, Hb, HT,
NP
Perturbation du VGM et des
constantes érythrocytaires.
Valeurs fausses de Leuco, Hb, Ht,
NP,
Modification du VGM, gonflement
des hématies
Anomalies majeures de l’hémogramme
Anémie = hypoxie des organes vitaux
Agranulocytose, lymphopénies extrêmes = infections
Thrombopénies = hémorragies
Polyglobulies et hyperleucocytoses massives = hyperviscosité
Polyglobulies, hyperplaquettoses = thromboses veineuses et artérielles
Hyperéosinophilies essentielles = lésions tissulaires
 Dangers sérieux, aspects cliniques multiples
 Urgence biologique annonce une urgence clinique
 L ’hémogramme apporte des repères chiffrés essentiels dans la démarche du
diagnostic médical
 Des logigrammes d’investigations cliniques et paracliniques précieux et
expérimentés
Diagnostic du mécanisme, de la “maladie”, de l’agent étiologique causal
HÉMOGRAMME ET VALEURS DE RÉFÉRENCE
Préalables
Méthodologiques :
standardisation :
des condition de prélèvement (ponction veineuse franche, tube
EDTA)
des méthodes de mesure des paramètres (automate)
du mode d ’expression des résultats
Physiologiques
Nyctémère, alimentation, tabagisme, alcool, effort physique,
altitude, prise de médicaments, stress, grossesse
Groupe de population: age, sexe,ethnie
Groupes physiologiquement homogènes
 Valeurs ref : GR, GB, NP
Hématies(Tera/l)
600
Leucocytes(Giga/l)
500
Plaquettes(G/l)
400
300
200
100
e
m
Fe
m
e
m
Ho
m
an
s
10
à
3
à
6
12
an
s
an
1
m
oi
s
0
3
Na
is
sa
nc
e
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Numération des Globules Rouges
Les paramètres calculés
• Ht = Hématocrite Ht = (GR x VGM)/10
• TCMH = Teneur cellulaire moyenne en hémoglogine.
Hb g/100 ml x 10
TCMH =
Nb GR 10 6/mm3
• CCMH = Concentration cellulaire moyenne en hémoglobine.
Hb en g/100 ml
CCMH =
x 100
Ht
 Valeurs ref : constantes érythrocytaires
VGM( fl)
120
TCMH( pg)
100
CCMH( g/dl)
80
60
40
20
à
3
e
m
e
m
Fe
m
6
à
60
Ho
m
an
s
12
an
s
an
1
oi
s
m
Hémoglobine( g/dl)
3
Hématocrite( %)
10
Na
is
70
sa
nc
e
0
50
40
30
20
10
e
m
Fe
m
e
m
Ho
m
an
s
10
à
3
à
6
12
an
s
an
1
oi
s
m
3
Na
is
sa
nc
e
0
Valeurs de référence : numération globulaire et paramètres erythrocytaires
1ère semaine
Hématies
10.6/µL
(Tera/L)
Leucocytes
10³/µL
(Giga/L)
Plaquettes
10³/µL
(Giga/L)
Hémoglobine
g/dL
8 jours à 3
mois
3 mois à 3 ans
3 à 6ans
6 à 15 ans
Adulte
H : 4,5 à 5,8
5,0 à 6,0
3,8 à 4,8
3,6 à 5,2
4,1 à 5,3
4,0 à 5,4
F : 3,8 à 5,4
10,0 à 30,0
6,0 à 18,0
6,0 à 15,0
5,0 à 13,0
5,0 à 11,0
4,0 à 10,0
150 à 400
150 à 400
150 à 400
150 à 400
150 à 400
150 à 400
H : 13,5 à 17,5
14,5 à 22,5
10 à 16
10,5 à 13,5
10,5 à 13,5
11,5 à 14,5
F : 12,5 à 15,5
H : 40 à 50
Hématocrite
%
44 à 58
VGM fl
100 à 120
85 à 96
70 à 86
73 à 89
77 à 91
82 à 98
TCMH pg
34 à 38
24 à 34
23 à 31
24 à 30
24 à 30
> ou = 27
38 à 44
36 à 44
36 à 44
37 à 45
F : 37 à 47
 Valeurs ref : formule sanguine
100%
90%
80%
70%
60%
50%
PNB
PNE
MO
40%
30%
20%
10%
Lc
PNN
0%
Nouveau né
1 an
Nouveau
né
Polynucléaires
neutrophiles
6,0 à 26,0
(G/l)
Polynucléaires
éosinophiles 0,02 à 0,85
(G/l)
Polynucléaires
basophiles
0 à 0,64
(G/l)
Lymphocytes
2,0 à 11,0
(G/l)
Monocytes
0,4 à 3,1
(G/l)
4 ans
10 ans
Adulte
1 an
4 ans
10 ans
Adulte
1,5 à 8,5
1,5 à 8,5
1,8 à 8,0
2,0 à 7,5
0,05 à 0,7
0,02 à 0.65
0 à 0,6
0,04 à 0,8
0 à 0,2
0 à 0,2
0 à 0,2
0,01 à 0,2
4,0 à 10,5
2,0 à 8,0
1,5 à 6,5
1,0 à 4,0
0,05 à 1,1
0 à 0,8
0 à 0,8
0,2 à 1,0
Valeurs de référence :formule leucocytaire
en 109/L
1ère
semaine
8 jours à 3
mois
3 mois à 3
ans
3 à 6 ans
6 à 15
ans
Adulte
Polynucléaires
neutrophiles
6,0 à 26,0
1,5 à 8,5
1,5 à 8,5
1,5 à 8,5
1,8 à 8,0
1,8 à 7,5
Polynucléaires
éosinophiles
0,2 à 0,85
0,2 à 1,2
0,05 à 0,7
0,02 à
0,65
0 à 0,6
0,1 à 0,4
Polynucléaires
basophiles
0 à 0,64
0 à 0,2
0 à 0,2
0 à 0,2
0 à 0,2
0 à 0,2
Lymphocytes
2,0 à 11,0
2,0 à 11,0
4,0 à 10,5
2,0 à 8,0
1,5 à 6,5
1,0 à 4,5
Monocytes
0,4 à 3,1
0,05 à 1,1
0 à 0,8
0 à 0,8
0 à 0,8
0,2 à 1,0
Numération des Globules Rouges
• L'IDC ou RDW
Les paramètres calculés
– L'IDC est une valeur statistique correspondant au CV % calculé sur la
distribution des rouges = coefficient d'anisocytose.
50
100
200
IDC Normal
< 15,5%
50
100
200
IDC Elevé
18 %
50
100
200
IDC très Elevé
35 %
Numération des Plaquettes
Les paramètres calculés
• Le Thrombocrite
– Tct = VMP x Nb de Plaquettes
• L'IDP ou PDW
– Indice de distribution plaquettaire
Réticulocytes
La numération des réticulocytes ne fait pas partie de l’hémogramme
Analyse spécifique
Valeurs normales des réticulocytes : 25 à 100 (Giga/L)
Interprétation- deux temps
• Paramètres de la numération ligne par ligne : variation
quantitative
• Paramètres de la formule (valeur absolue)
• Variation qualitative (commentaire morphologie des
cellules)
Confronter résultats à
•La population de référence
•aux conditions cliniques
Evaluer éventuelle hémodilution
Certaines anomalies doivent faire suspecter une hémopathie maligne.
•
•
•
•
•
•
anémies non microcytaires arégénératives
bicytopénies et pancytopénies
myélémie
hyperlymphocytose en dehors du syndrome mononucléosique,
monocytose en dehors d’un syndrome inflammatoire,
présence de cellules anormales
Examens complémentaires
• Reticulocyte
• Myélogramme
• Bilan d’anémie etc
Myélogramme
1. DEFINITION
• Le myélogramme correspond à une analyse quantitative et
qualitative de frottis médullaires réalisés après ponctionaspiration de moelle osseuse généralement au niveau du
sternum.
• Examen est réalisé dans un but diagnostic (suspicion
d’hémopathie maligne, de métastases médullaires, de
leishmanioses viscérales…) ou de suivi de la pathologie
préalablement diagnostiquée.
Myélogramme
Le prélèvement :
Adulte : ponction au niveau sternal ou dans l’os iliaque (épines iliaques
antéro-supérieures, crête).
Enfant : os iliaques
Nouveau-né: plateau tibial face antéro-interne.
Trocart de Mallarmé et pour faible quantité de moelle (quelques frottis) on
utilise une aiguille plus fine (aiguille pour PL pédiatrique avec mandrin)
Aspiration mélange de moelle et de sang
Suc médullaire en grumeaux étalé sur les lames de verre
La ponction de MO n’a pas de véritable contre-indication
(éviter de prélever lors des coagulopathies sévères).
Prescription : associer
• Un hémogramme
• Un minimum de renseignements cliniques indispensables à une bonne
lecture et interprétation du myélogramme.
Lecture
•
•
•
•
Celle-ci comporte 3 temps successifs, tous 3 indispensables :
appréciation générale des frottis médullaires
appréciation cytologique et morphologique
décompte des éléments cellulaires
Coloration des étalements May Grunwald Giemsa
Lecture des frottis médullaire au microscope
Etude cytologique fine et rapide
(résultat disponible en quelques heures)
Apprecier
• la richesse (grossissement 10X)
(Un prélèvement pauvre peut traduire une aplasie médullaire, une myélofibrose,
ou une dilution du matériel prélevé par du sang )
• la présence de MK, les pourcentages des différentes lignées
• la présence éventuelle de cellules non hématopoiètique (métastases)
Etablir :
•la répartition de cellules des différentes lignées cellulaires.
(Une formule est réalisée sur tous les éléments nucléés autres que les mégacaryocytes )
Explorations complémentaires éventuelles :
• coloration spécifique du fer (Perls)
•
colorations cytochimiques utiles à la classification des
leucémies aiguës (myéloperoxydase, estérases)
• études immunocyto-chimiques (mise en évidence de marqueurs
par l‘utilisation d'anticorps monoclonaux spécifiques: ICC ou
CMF)
• analyse cytogénétique avec établissement du caryotype des
cellules médullaires
• Analyse des marqueurs en biologie moléculaire
Enfant (1 mois - 2 ans)
Adulte
Nouveau né (< 2
jours)
Blastes indifférenciés
<2
2 - 4*
0.5 - 2
Myéloblastes
0.5 - 1
0.5 - 1
0.5 - 2
Promyélocytes
1-2
1-2
1-5
Myélocytes
5 - 10
3-6
5 - 15
Métamyélocytes
15 - 20
5 - 15
15 - 20
Polynucléaires
30 - 50
15 - 20
25 - 35
Lignée éosinophile
1-4
1-4
1-4
Lignée basophile
0.5 - 1
0.5 - 1
0.5 - 1
Proérythroblastes
0.5 - 2
0.5 - 2
0.5 - 2
Ery. basophiles
1-4
1-3
2-5
Ery. polychromatophiles
5 - 10
5-8
6 - 12
Ery. acidophiles
6 - 10
6 - 10
6 - 10
Lymphocytes
10 - 18
30 - 50
5 - 15
Plasmocytes
0
0 - 0.5
0.5 - 2
Monocytes
0.5 - 2
0.5 - 2
0.5 - 2
Lignée neutrophile
Lignée érythroblastique