Transcript anti-mitochondrie - CEFO-P-SD

LES AUTO-ANTICORPS EN PRATIQUE
COURANTE
Dr. M.Delire Pédiatrie, Immunologie
Dr. M.P.Lallemand Biologie Clinique
LES MALADIES AUTO-IMMUNITAIRES:
NOTIONS GÉNÉRALES
Dr.M.Delire
PHYSIOPATHOLOGIE
• Les maladies auto immunes sont la
conséquence d’une rupture de la tolérance
immune aux antigènes du soi.
• Les mécanismes de tolérance immune sont:
→ centraux (thymus et moelle osseuse)
→ périphériques
MÉCANISMES CENTRAUX DE TOLÉRANCE
IMMUNE


Les lymphocytes-T auto réactifs sont
éliminés au niveau du thymus
Les lymphocytes-B auto réactifs sont
éliminés avant sortie de la moelle osseuse
MÉCANISMES PÉRIPHÉRIQUES DE TOLÉRANCE
IMMUNE
Les mécanismes centraux de tolérance
immune sont incomplets, et un certain
nombre de lymphocytes auto réactifs y
échappent
 Ces lymphocytes circulants sont maintenus
inactifs par toute une série de mécanismes
 Les maladies auto immunes peuvent donc
avoir une origine centrale (thymus),ou
périphérique

Les lymphocytes-T sont responsables de la
grande majorité des maladies auto
immunes, car ils sont nécessaires à la
production d’auto-anticorps par les
lymphocytes-B
 Les lymphocytes-B sont responsables de la
grande majorité des lymphomes et
leucémies, car présentant un taux de
mutation 1.000 fois supérieur à celui des
autres cellules de l’organisme

CAUSES DES MALADIES AUTO IMMUNES
Facteurs de prédisposition génétique
→ système HLA,
→ anomalies du système du complément,
→ anomalies du thymus, etc….
• Facteurs environnementaux
→ Infections,
→ hormones (oestrogenes, corticostéroïdes)
→ radiations, toxines
→ médicaments, etc…..

EXEMPLES DE RELATION ENTRE
PHÉNOTYPE HLA ET AUTO IMMUNITÉ
HLA DR3 → Maladie d’Addison
 HLA DR4 → Arthrite rhumatoïde
 HLA B27 → Spondylarthrite ankylosante
• HLA DQ2 → Hypersensibilité au gluten
 HLA DQ8 → Diabète type I
 Etc…

CLASSIFICATION GÉNÉRALE DES MALADIES
AUTO IMMUNES
1.
→
→
→
→
→
→
Maladies auto immunes systémiques
dirigées contre antigènes ubiquitaires
(ADN, nucléosome, histone, ANCA, etc.)
lupus érythémateux disséminé,
polyarthrite rhumatoïde,
syndrome de Goujerot Sjögren,
sclérodermie,
polymysosite,
vascularites
CLASSIFICATION GÉNÉRALE DES MALADIES
AUTO IMMUNES
2. Maladies auto immunes spécifiques
d’organes ou de systèmes (quelques
exemples)
→
thyroïdites auto immunes,
→
diabète insulino dépendant (type I),
→
maladie de Crohn, rectocolite hémorragique,
→
myasthénie grave,
→
syndrome de Guillain Barré,
→
sclérose en plaques,
→
etc., etc., etc,…..
ET EN PRATIQUE ???
TECHNIQUES UTILISEES
Immunofluorescence
 Elisa
 RIA
 Immunodot

IMMUNOFLUORESCENCE

SUR CELLULES HEP-2

Sur polynucléaires neutrophiles

SUR COUPES DE TISSUS
CELLULES HEP-2
Cellules de carcinome laryngé humain
 Lames avec puits
 Mise en évidence d’anticorps dirigés contre le
noyau, les nucléoles, les organites
(mitochondries, lysosomes), les filaments (actine)
 Fluorescence au niveau du noyau : homogène,
mouchetée, centromérique, granulaire,
nucléolaire, dots...
 Fluorescence cytoplasmique : granulaire, fibres,
dense


FLUORESCENCE AU NIVEAU DU NOYAU
FLUORESCENCE
HOMOGÈNE
ANTI-CENTROMERE
NUCLEOLAIRE HOMOGENE

FLUORESCENCE AU NIVEAU DU
CYTOPLASME
ANTI-MITOCHONDRIES
ANTI-ACTINE
POLYNUCLEAIRES NEUTROPHILES (ANCA)
P-Anca
 C-Anca
 MPO et PR3

ANTICORPS ANTI-CYTOPLASME ANCA
Dépistage par IF sur polynucléaires neutrophiles
 C-ANCA et P-ANCA
 Anti-PR3 (souvent c-Anca) évocateur de la
granulomatose de Wegener
 Anti-MPO (souvent p-Anca) sont retrouvés dans
la maladie de Churg et Strauss, la polyangéite
microscopique et les glomérulonéphrites
nécrosantes pauci-immunes.
 Ces vascularites auto-immunes sont rares
(prévalence < 5/100.000 personnes

COUPES DE TISSUS
ESTOMAC / REIN
 ESTOMAC / REIN / FOIE
 ŒSOPHAGE
 ……

ANTI-ACTINE
ANTI-CELLULES GASTRIQUES
ANTI-MITOCHONDRIES
estomac
Muscle lisse
rein
ELISA - EIA
DOSAGE IMMUNO-ENZYMATIQUE SUR MILIEU SOLIDE
Utilisation de microplaques ou de « crayons »
 Automatisation possible
 Dosage de dsDNA, nucléosomes… MPO, PR3

DOT
Le dot est un monotest constitué d’une
membrane sur laquelle sont « coatés » en fines
lignes parallèles différents antigènes purifiés et
caractérisés biochimiquement.
 Une tigette synthétique sert de support à la
membrane « coatée ».
 Cette technique permet en une seule incubation
du sérum, de tester plusieurs paramètres en
fonction du type de dot choisi (panel d’antigènes).
 La lecture du test se fait simplement à l’oeil nu
ou via un scanner.

FEUILLE LECTURE SCANNER DOT HEPATIQUE
UTILITÉ DES AUTOANTICORPS EN
MEDECINE GENERALE
Un cassetête pour
le
médecin
? ???
AUTO-ANTICORPS NON SPECIFIQUES
D’ORGANE - ANA
Prévalence des ANA
LED induit
100 %
Sclérodermie systémique
85-98 %
Polymyosite
40-78 %
S. De Gougerot Sjögren
50-95 %
Arthrite rhumatoïde
20-40 %
Arthrite psoriasique
15 %
Myasthénie grave
40-60 %
Sujet sain > 60 ans
5-30 %
Hiemanta M. et al. Am Med 1996;
23:283-91
ANTICORPS ANTI-MITOCHONDRIES
Retrouvés dans 95 % des Cirrhoses biliaires
primitives
 CBP : femmes de 30 à 70 ans, prurit, asthénie et
ictère.
 Lésions histologiques (nécrose des canalicules
biliaires avec réaction inflammatoire)
 AMA pour le DD des pathologies hépatiques
cholostatiques.

LA CIRRHOSE BILIAIRE PRIMITIVE CBP
Prurit (peut apparaître pour la première fois au
cours d’une grossesse). Un prurit isolé est
fréquemment l’unique symptôme inaugural !!!
 Fatigue
 Signes de cholestase (ictère , hyperbilirubinémie,
élévation des PAL…)
 Incidence CBP 10 cas/100.00 personnes
 Prédominance féminine nette
 90 à 95 % des malades sont des femmes entre 30
et 60 ans

CPB ET SEROLOGIE
Anticorps anti-mitochondries (anti-M2) :
retrouvés pratiquement dans tous les cas
 D’autres anticorps peuvent aussi être retrouvés
(mais toujours en association avec les antimitochondries type M2)

- anti-centromères (association avec S. de Crest dans
10 à 20%)
 - anti-SSA/SSB (association avec S. de Gougerot
Sjögren)

ANTICORPS ANTI-MUSCLES LISSES ET LKM
Unique moyen pour le diagnostic d’une hépatite
chronique auto-immune de type I (anti-actine) ou
de
type II (anti-LKM)
 Traitement de choix HCA : corticothérapie
 Interferon α contre-indiquéavant de traiter par
IFNα pour une suspicion d’hépatite C, il faut
rechercher la présence des Ac-muscles lisses
(spécificité actine !) et Ac-LKM pour écarter le
diagnostic d’HCA

CHOLANGITE SCLEROSANTE PRIMITIVE


ANCA dans 60 à 70% des cas mais PR3 et MPO
négatifs
Diagnostic différentiel des hépatites chroniques
avec cholostase:
→ anti-actine: hépatite auto immune type I
→ anti-LKM: hépatite auto immune type II
→ anti-mitochondrie: cirrhose biliaire
primitive
→ ANCA: cholangite sclérosante primitive
QUELLE STRATEGIE ???
MALADIES AUTO-IMMUNES

Indications recherche auto-anticorps

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



Arthrite
Raynaud
Rash cutané
Vasculite
Fièvre d’origine indéterminée
Sécheresse buccale ou oculaire
Faiblesse musculaire proximale
Hématurie, protéinurie
Cytopénies
Thromboses à répétition
IMPORTANCE DES DONNEES CLINIQUES
La recherche des auto-anticorps ne doit pas
figurer dans un bilan de base
 Signes cliniques suspects demande autoanticorps ciblée (restriction INAMI)
 Le protocole du laboratoire doit être explicite
 Le titrage d’un anticorps anti-nucléaires, la
description de la fluorescence observée, la
caractérisation éventuelle des antigènes reconnus
sont incontournables, les performances du test
doivent être documentés
 Tout anticorps détecté ≠ MAI

LES LIMITES
La quantification des anticorps peut être
imprécise
 Variabilité importante selon les techniques
 Ne pas confondre spécificité et valeur prédictive
positive
 Toujours intégrer les résultats de laboratoire au
dossier clinique

EN RESUME….
MALADIES SYSTEMIQUES
AUTO-ANTICORPS SPECIFIQUES
CONNECTIVITES
Lupus érythémateux disséminé
Nucléosomes, dsDNA, Sm, PCNA
Lupus cutané subaigu
SSA
Maladie de Sjögren
SSA/SSB
Sclérodermies
Calibri
(Corps)
Centromère, nucléolaire, Scl70
Syndrome de Sharp
RNP
Dermatomyosite
Mi-2
Polymyosite
Jo1, PL12, PL7, SRP
Polymyosite/sclérodermie
PM-Scl, Ku
VASCULARITES
Maladie de Wegener
c-Anca, PR3
Microangiopathie
Glomérulonéphrite
microangiopathique
p-Anca, MPO
Syndrome de ChurgStrauss
c-Anca, MPO
MALADIES DU FOIE
Hépatite auto-immune Actine, SLA
type I
Hépatite auto-immune LKM1
type II
Cirrhose biliaire
primitive
Mitochondries M2
MERCI POUR VOTRE ATTENTION