Transcript Presentación de PowerPoint

cDNAs de isoformas de PKC
a
bI
bII
g
d
e
z
h
q
bovino
humano
rata, conejo
ratón
rata, conejo
humano
bovino
humano
rata, ratón,
conejo
bovino
humano
rata, conejo
rata
ratón
conejo, rata
ratón
rata
humano
ratón
humano
rata
ratón
cerebro
cerebro, células T
cerebro
cerebro, fibroblastos
cerebro
bazo
Convencionales
cerebro
cerebro, bazo
cerebro
cerebro
cerebro
cerebro
cerebro
cerebro
cerebro, células mieloides
Novel
cerebro
cerebro
cerebro
Atípica
células mieloides
piel
queratinocitos
Novel
pulmón
piel
PKC CONVENCIONALES:
•Activadas por PS en forma dependiente de Ca2+
•Unen DAG
•Blanco de PMA
PKC NUEVAS:
•Insensibles a Ca2+
•Activadas x DAG y PMA en presencia de PS
PKC ATIPICAS
•Insensibles a Ca2+
•No responden a PMA/DAG
PRKs (PKC related kinases)
•Insensibles a Ca2+, DAG o PMA
•Se unen a Rho activo
Dendograma basado en comparación de secuencia de
familia de PKCs
ESTRUCTURA DE LOS DOMINIOS DE LAS SUBFAMILIAS DE PKC
DOMINIO C1
Presente en cPKCs y nPKC
Dos dedos de Zn: C1a y C1b
Motivo:
H – X12 – C – X2- C – X13/14 – C – X2 – H – X2 – C – X7 – C
Sitio de unión para DAG y PMA
PROTEINAS QUE CONTIENEN DOMINIOS C1
Proteína
Dedo Zn Unión a PMA
Comentario
DAG kinasa
2
No
C1 no necesario para
unión de DAG o catálisis
Quimerina
1
Sí
PMA estimula actividad tipo
GAP contra Rac
PKD
2
Sí
Activada x PMA y DAG
Munc-13
1
n.h.
Homólogo mamífero de
Unc-13; sinaptosomal
Raf
Ksr
Vav
Stac
1
1
1
1
No
n.h.
Sí
n.h.
C1 se une a prenilo de Ras
Kinasa relacionada a Raf
GEF para Ras
proteína de cerebro con SH3
DOMINIO C2
Presente en otras proteínas: sinaptotagmina, rabfilina, PLs, GAPs
Confiere unión a PS/Ca2+
Estructura :
Sandwich b compacto: 2 x 4 hojas antiparalelas
5 Asp para unión de Ca2+
Ausente en nPKCs y aPKC, pero ~ a Vo (faltan algunos Ds)
Función : interacción con otras proteínas
C2A y C2B de syn.: sintaxina y clatrina AP2
RACKs (Receptor for Activated PKCs): no sustrato, sí unión lleva a membrana
DOMINIO HR1
3 repeticiones de 55 aa
Une Rho?
Conservado básico
Conservado acídico
Conservado hidrofóbico
PMA
Unión de nucleótido
Dominios C3+C4
catalítico
Dominio C1
Zn
Zn
Unión de S
Aspx5

Dominio C2
(sinaptotagmina)
conservados
ESTRUCTURA PRIMARIA DE LAS FAMILIAS DE PKC
MODELO DE REGULACION DE cPKC
pseudoS
1
2
transPi
4
autoPi
3
autoPi
Regulación mediada por PKC
Papeles propuestos para PKC en respuestas
celulares
Tejidos y Células
Sistemas Endocrinos
Respuestas celulares
Médula adrenal
Secreción catecolamina
Corteza adrenal
Secreción aldosterona
Islotes de páncreas
Liberación insulina
Hipotálamo
Libereración de TSH
Células de pituitaria
Liberación de GH, prolactina
luteinizante, tirotropina
Células paratiroides
Liberación de PTH
Células C tiroides
Liberación de calcitonina
Células de Leydig
Esteroidogenesis
Sistema exocrino
Células acinares páncreas
Glándula paratiroidea
Secreción de amilasa
Glándula submaxilar
Glándula gástrica
Células alveolares
Secreción de mucina
Sec.pepsinógeno, ác. gástrico
Secreción de surfactante
Secreción amilasa y mucina
Papeles para PKC en respuestas celulares (Cont.)
Tejidos y Células
Sistema Nervioso
Respuestas celulares
Sinapsis neuronal
Liberación de transmisores
Unión neuromuscular
Células PC12
Neuronas
Liberación de transmisores
Liberación de dopamina
Conductancia de membrana
Sistema muscular
Músculo cardíaco
Inflamación+ S.inmune
Plaquetas
Neutrófilos
Basófilos
Linfocitos
Metabolismo/otros
Contracción muscular
Liberación de serotonina, enzimas
lisosomales, araquidonato, síntesis
de tromboxano
Generación superóxido, enzimas
lisosomales, transporte hexosas
Liberación de histamina
Activación de linfocitos B y T
Adipocitos
Lipogénesis, transporte de glucosa
Hepatocitos
Gluconeogénesis, trans. glucosa
LIGANDO
(hormonas, etc)
LIGANDO
(hormona, factores
de crec. citokinas)
RECEPTOR
TRANSMISOR
(e.g.Proteinas G)
EFECTOR
SEGUNDO MENSAJERO
RECEPTOR
BLANCO 1
BLANCO 2
BLANCO 3
EXPRESION DE GENES
(Ad.ciclasa, PLs,
PI3Ks, otros)
cAMP, DAG,Ca
PIP3, otros
PKA, PKB, PKC
Raf,MAPK, S6K
CREB, myc, fos,
jun, NF-kB