Transcript 检测肿瘤抗原(甲胎蛋白)及方法的优劣比较T

检测肿瘤抗原 (甲胎蛋白)及方法的优劣
比较
PPT制作：宓猛冬
组长：孙小宝
组员：方腾腾、朱晨阳、
钟志豪
甲胎蛋白

甲胎蛋白是一种糖蛋白，英
文缩写AFP。正常情况下，
这种蛋白主要来自胚胎的肝
细胞，胎儿出生约两周后甲
胎蛋白从血液中消失，因此
正常人血清中甲胎蛋白的含
量尚不到20微克/升。甲胎蛋
白是肝癌的特异性标志，但
血清甲胎蛋白阳性未必都是
肝癌。
• 甲胎蛋白是诊断原发性肝癌的特异性肿瘤
标志物，具有确立诊断、早期诊断、鉴别
诊断的作用。目前常用化学发光法、酶标
法、酶标电泳法、放射免疫法检测。一般
认为：定性法阳性或定量>400毫微克/毫升、
>200毫微克/毫升，持续8周，而谷丙转氨
酶（SGPT）正常，并排除妊娠和生殖腺胚
胎瘤，原发性肝癌的诊断确立。特别应用
在早期亚临床肝癌的诊断并及时手术可大
大提高患者的存活率。对肝癌手术、化疗、
中西医结合治疗、放疗等疗效及预后判断、
动态测定血清甲胎蛋白有其重要的临床价
值。
AFP检测结果
检测甲胎蛋白的方法



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酶免法
电化学发光技术
化学发光法
放射免疫法
酶免法

甲胎蛋白酶免法应用双抗
体夹心法原理（ELISA）
检测人血清或血浆中的
AFP，即采用抗人单克隆
抗体包被反应板，而后加
入待检标本孵育，待检标
本中含有AFP时，就能与
包被物结合，再加入酶标
记的抗人AFP多抗，形成
抗体-AFP-抗体（HRP）
的复合物，最后通过加入
的TBM底物产生显色反
应。
电化学发光技术

使用非同位素金属三联吡啶钌作为标记物，由
电极激发，在三丙胺参与下循环反应，迅速稳
定发光，使得检测结果稳定可靠，精密度、准
确度均很好。电化学发光技术用三联吡啶钌标
记的试剂很稳定，而且有效期长。此法检测范
围更宽，温育时间9~17 min，20 min 内出结
果。
酶免法与电化学法的比较

电化学法较酶联免疫法大大缩短了时间，能充
分满足临床要求，电化学发光技术以其敏感、
快速、稳定的特点。在进行初筛或检测低浓度
标本时，用酶免法比较合理，也能保证灵敏度
和准确度；当检测高浓度标本时
（AFP>400ng/ml），电化学发光法能确保其
定量的准确性。
化学发光法原理

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL
IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析
方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合
物——(A E) ,是有效的发光标记物, 其通过起动发光
试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光, 强烈的直接发光在
一秒钟内完成,为快速的闪烁发光。吖啶酯作为标记物
用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂;
检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心
法 , 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减
小所产生的光量, 从而增加灵敏度。
放射免疫法

采用了第二抗体+聚乙二醇沉淀法放射免疫分
析试验原则，含甲胎蛋白的样品和155I标记的
甲胎蛋白与相应的抗体反应形成抗原抗体复合
物。反应后加入二抗及PEG，使免疫复合物沉
淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线
得到样本中AFP的浓度。
化学发光法与放射免疫法的优劣

化学发光免疫技术既具有发光检测的高度敏感性，又
具有免疫分析的高度特异性。放射免疫法和化学发光
免疫法之间无显著差异，相关性好。显示化学发光免
疫法在敏感性、特异性方面不仅可与放射免疫法相媲
美，而且化学发光免疫法的准确性、精密度和试剂盒
的有效期等方面均优于放射免疫法。由于化学发光免
疫法是以化学发光剂作为标记物进行定量检测，所以
其试剂具有稳定和无毒性的优点。使用的全自动化学
发光仪可以直接对血清标本进行采样，处理和检测，
标本可以随到随测，短时间内出结果，较放免法大大
缩短了时间，能充分满足临床的需要。化学发光免疫
法可广泛应用于临床项目的检测。