Transcript - ePrints Sriwijaya University

Curriculum Vitae KMA
•
Education :
1.
2.
3.
FoM Unsri 1977
FoM Unair 1982
FoM Monash Univ. 1983
•
Post :
1.
2.
3.
4.
Professor Andrology & MB
Former Dean FoM Unsri
WHO Temporary Advisor
Members Executive council
PANDI
President PANDI
President PERSANDI
Member of Indonesian
Andrology Collegium
Dean FoM Muhammadiyah
University Palembang
5.
6.
7.
8.
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI IN-VIVO DAN IN-VITRO
CAIRAN SERVIKS DAN KAITAN DENGAN
RESPON IMUN DAN KAPASITASI SPERMA
Kiagus Muhammad Arsyad
Fakultas Kedokteran
Universitas Sriwijaya
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
Pokok bahasan
1.
2.
3.
4.
5.
Pendahuluan
Faktor Imunologik Infertilitas
Fertilisasi dan implantasi
Kapasitasi Sperma
Uji In-vivo dan Invitro
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. PENDAHULUAN
•
Faktor Etiologi PIA :
1. Suami, 23 %
2. Istri, 49 %
3. Unexplained,
•
28 %
Dari 28 % unexplained , 10 – 15 %
disebabkan oleh faktor immunologik,
dengan banyak komponen sistem imun
sebagai penyebab.
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
Faktor Immunologik Infertilitas
In infertile women
In infertile men
autoimmune oophoritis
― antibodies to zona
pellucida
・ Isoimmunity to sperm
― antibodies to sperm
・ autoimmune diseases
― autoimmune thyroiditis
― antiphospholipid
antibody syndrome
・ Endometriosis
― inflammatory cytokines
and chemokines
・ Autoimmunity to testis
・ Autoimmunity to ovaries
―
―
―
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
autoimmune orchitis
antibodies to sperm
KATEGORI RESPON IMUN PADA WANITA
•
Di dalam tubuh wanita ada 5 kategori
Respon imune :
1.
2.
3.
4.
5.
HLA (Human Leukocyte Antigen)
APA (Antiphospholipid Antibodies)
ANA (Antinuclear Antibodies)
ASA (Antisperm Antibodies)
N K cell (Natural Killer Cell)
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
FERTILISASI DAN IMPLANTASI
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
FERTILISASI DAN IMPLANTASI
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
3 FASE PENETRASI Oocyte OLEH SPERMA
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
REAKSI ACROSOME
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
REAKSI ACROSOME
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
PEMERIKSAAN INTERAKSI
SPERMA DAN LENDIR SERVIKS
•
Pemeriksaan interaksi spermatozoa
dengan lendir serviks ada 2 :
IN VIVO
Uji pasca senggama
IN VITRO
Simplified slide test
Sperm Penetration test
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
•
TUJUAN :
1. Menentukan jumlah spermatozoa aktif dan
menilai sperm survival di dalam lendir serviks
(Sobrero & Mc Leod, 1962),
2. Meevaluasi perilaku sperma beberapa jam
setelah coitus (peran resevoir lendir servisk
(Moghissi, 1976).
3. Penilaian adanya antibodi sperma pada pria
atau wanita.
4. Menilai lendir seriks
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
• WAKTU :
• Waktu pemeriksaan Uji Pasca Senggama
dilakukan sedekat mungkin dengan waktu
Ovulasi tetapi tetap sebelum ovulasi.
• Penentuan didasarkan pada :
• Siklus haid , BBT, Perubahanan cairan serviks,
• Sitologi vaginal, Pemeriksaan Hormon LH dan
Estrogen .
• Cairan serviks diperiksa di lab antara 9 – 14 jam
setelah senggama
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
•
INSTRUKSI UNTUK PIA :
1. Abstinensia seksualis 2 hari,
2. Senggama dilakukan pada malam sebelum
tanggal pemeriksaan,
3. Tidak boleh memakai pelicin
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
• PROSEDUR PEMERIKSAAN :
• Masukkan speculum tanpa pelicin ke dalam
vagina,
• Ambil sebanyak mungkin cairan semen di fornix
posterior vagina dengan : spuit tuberclin tanpa
jarum, ataupipet pasteur
• Dengan pipet atau spit lain diisap secukupnya
cairan seviks dari canalis endocervicalis,
• Teteskan cairan serviks ke atas objek glass dan
tutup dengan gelas penutup
• Periksa di bawah mikroskop dengan pembesran
400 x.
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
• YANG DIPERIKSA ;
1. Vaginal pool semen sample
2. Lendir seviks
3. Hasil uji pasca senggama
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
• YANG DIPERIKSA ;
1. Vaginal pool semen sample
- spermatozoa mati dalam waktu 2 jam di
dalam vagina
- periksa preparat basah dari vaginal pool
untuk memeriksa adanya spermatozoa
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
•
YANG DIPERIKSA ;
2. Lendir seviks
- jumlah spermatozoa dibagian bawah
canalis cervicalis yang dinyatakan per ul
- jumlah spermatozoa per x 400 HPF =
10 spermatozoa /20 nl lendir serviks
atau = 500 spermatozoa /ul
- Motilitas spermaatozoa di dalam lendir
serviks di rangking sbb:
PR = progressive motility
NP = non progressive motility
IM = Immotile Spermaozoa
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
UJI PASCA SENGGAMA
Hasil uji pasca senggama
•
•
•
•
Interpretasi :
Uji negatif jika tidak dijumpai spermatozoa,
Jika dijumpai PR spermatozoa di endocervik AB
(-) (Oei et al, 1995)
Jika dijumpai NP spermatozoa dengan shaking
phenomenon > AB (+) di cairan serviks atau di
spermatozoa
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
FORM UJI PASCA SENGGMA
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
PEMERIKSAAN IN - VITRO
•
•
•
•
Uji In vitro dilakukan jika
Uji Psaca Senggama Negatif,
Menjadi lebih informatif jika di lakukan
dengan uji silang memakai sperma donor
dan lendir serviks donor,
Memakai lendir serviks tengah siklus
Dikerjakan 1 jam setelah pengambilan
sampel sperma
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
PEMERIKSAAN IN - VITRO
•
Tujuan pemeriksaan in-vitro :
1.
Untuk membandingkan berbagai
kualitas berbagai macam lendir serviks,
2. Untuk menilai berbagai kualitas sample
sperma
•
Ada 2 :
1. In-vitro simplified slide test
2. Capillay tube test
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST
• Prosedur :
• Teteskan lendir servikke atas objek glas kemudian t
berutup dengan gelas penutup agar lendir merata di bawah
glas ppenutup,
• Teteskan semen di tiap sisi gelas penutup sehingga semen
bis berkontak dengan lendir servik
• Masukkan ke dalam inkubator selama 3 ment pada
temperatur 37 C ( gelas objek di taruh pada
• Petri dish di alaskertas basah dan di tutup
• Periksa interface dengan mikroskop phase kontras 400 x
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST
• Pengamatan :
• Penetrasi semen ke lendir servik
• Penetrasi semen ke lendir serviks tetap
terjadi meskipun Azoospermia,
• Spermatozoa masuk ke dalam lendir serviks
melalaui penetrasi ini yang berbentuk
phalanges
• Diamati adanya sperma di dalamlendir
serviks, jarak tempuh dan motilitasnya
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST
• Interpretasi :
• Normal jika spermatozoa yang menembus
lendir serviks 90% motil,
• Buruk : jika spermatozoa tidak mampu
menembus lendir serviksepanjang 500u, ini
menujukkan adanya masala pada interaksi
semen dan lendir serviks,
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
1. SIMPLIFIED SLIDE TEST
• Interpretasi :
• Abnormal :
• 1. spermatozoa berhasil menembus lendir
servikstetapi segera menjadi immotile atau
shaking phenomenon, atau
• 2. spermatozoa tidak menembus semen- lendir
servisk interfase dan phalanges tidak terbentuk.
Ini menunjukka adanya Anti bodi antisperm I
lendir servis atau di membrane spermatozoa.
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
CAPILLARY TUBE TEST
•
•
Capilary tube test aslinya didesain oleh Kremer
(1965), dan saat ini ada banya modifikasinya
Tes ini mengukur kemampuan spermatozoa
untuk menembus colum lendir serviks yang ada
dalam tabung kapiler.
Prosedur terdiri dari :
1.
2.
3.
4.
Peralatan
Teknis pemeriksaan
Observasi
Interpretasi
•
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST
• Peralatan
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST
2. Prosedur :
1. Masukkan 100ul semen yang telah likuefaksi 1 jam setelah
ejakulasi ke dalam reservoar ,
2. Isap lendir serviks ke dalam kapiler, dan tutup salah satu
ujungnya dengan dempul
3. Masukkan ujung kapiler yang terbuka ke tabung reservoar
dengan jarak 0,5 cm
4. letakkan dalam posisi horizontal dalam inkubator dengan
suhu 37o C selama 2 jam,
5. Amati pipa kapiler dengan mikroskop pembesaran 100 x
6 . Masukkan kembali keinkubator dan amati kembal setelah
24 jam
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST
3. Pengamatan :
Setelah 2 jam periksa jarak migrasi kepadatan
penetrasi, pengurangan migrasi dan spermatozoa
dengan forward motility,
a. Jarak migrasi : catat jarak dari ujung kapiler
yang ada dalam reservoar sampai jarak terjauh
spermatozoa di dalam kapiler,
b. Kepadatan penetrasi : ukur di 1 dan 4,5 cm dari
ujung kapiler dalam reservoar. Pada tiap jarak
tersebut catat jumlah spermatozoa/lpb x 100
c. Baca hasl ditiap jarak sesusai tabel 3.3.
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST
3. Pengamatan :
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
2. CAPILLARY TUBE TEST
4. Interpretasi :
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KESIMPULAN
• Adanya respon imun dari wanita pada lendir
servik dapat mencegah penetrasi spermatozoa
melalaui lendir serviks untuk proses fertilisasi di
tuba,
• Adanya antibodi pada sperma menyebabkan
sperma tidak dapat menembus lendir serviks
• Kegagalan dalam proses penetrasi sperma
karena tidak baiknya proses reaksi acrosome
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KESIMPULAN
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KESIMPULAN
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
SARAN
•
•
UJI REAKSI SPERMA LENDIR
SERVIKS PADA PIA HARUS
DILAKUKAN UNTUK MENCARI
FAKTOR IMUN SEBAGAI PENYEBAB,
UJI YANG DIANJURKAN :
1. UJI PASCA SENGGAMA DAN
2. SIMPLIFIED SLIDE TEST
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KMA, HIGERI SURABAYA,2011
KMA, HIGERI SURABAYA,2011