Cocos Gram Negativo Neisseria spp & Moraxella sp
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Transcript Cocos Gram Negativo Neisseria spp & Moraxella sp
Cocos Gram Negativo
Neisseria spp & Moraxella sp
M. Paz
Microbiología UMG-2011
Género Neisseria
Único
reservorio: ser humano
Dos especies patógenas
N. gonorrhoeae
• Gonorrea
N. meningitidis
• Meningitis epidémica/meningitis meningocóccica
Muchas
especies no patógenas habitantes
del tracto respiratorio.
Género Neisseria
Neisser
(1879)
Describió al agente causal de la gonorrea
Leistikow
& Loeffler (1882)
Cultivo por primera vez
Weichselbaum
(1887)
aisló a N. meningitidis de LCR de un paciente
con meningitis purulenta
endémica, epidémica y meningococcemia
estado de portador
Género Neisseria: Morfología
Aerobios
Cocos Gram Negativo
No móviles
Crecen en parejas
No formadores de esporas
Los cocos individuales son pequeños (0.8 x 0.6
µm)
Ocasionalmente en tétradas o racimos
Algunas veces: formas bizarras (autólisis)
Citoplasma y pared celular son similares entre
las dos especies.
Género Neisseria: Morfología
Pared celular: tiene una capa densa y una
membrana externa
Meningococos: tienen cápsula de polisacáridos
Gonococos: no cápsula
Formas coloniales: (gonococos)
T1 y T2: colonias pequeñas y virulentas
• pili
T3 y T4: colonias más grandes: avirulentas
• No pili
Género Neisseria: Metabolismo
Organismo
Crece en agar
sin sangre
Crece a
22°C
Oxida
Glucosa
Oxida
Maltosa
Oxida
Sacarosa
N.
meningitidis
-
-
+
+
-
N.
gonorrhoeae
-
-
+
-
-
Características de cultivo
Difíciles de cultivar
Son susceptibles a ácidos grasos tóxicos y a
metales traza que están contenidos en la
peptona y en el agar (se contrarresta con
sangre, suero, almidón o carbón)
El agar “chocolate” es más adecuado
Ambas especies patógenas sufren rápida
autólisis.
Enzimas autolíticas se inactivan a 65°C por 30 min o
agregando cianuro de potasio o formalina.
Características de cultivo
Resistencia a condiciones físicas y químicas es
extremadamente baja
Atmósfera de crecimiento
Susceptibles a desecación
Mueren a 55°C por 30 min
5-10% de CO2 (jarra con candela)
Oxidasa (+)
Oxidan rápidamente DPD o TPD (dimetil o tetrametil
para fenilendiamina)
• Produce un color de rosado a negro en las colonias
Neisseria meningitidis
Neisseria meningitidis
Usualmente
habita en la nasofaringe sin
causar síntomas
Segunda causa de meningitis epidémica
(adquirida en la comunidad) en adultos
previamente sanos.
Cambio muy rápido de estado de sano a
enfermo de gravedad
Causa también meningococcemia
Características generales de N. meningitidis
Patogenicidad y virulencia
• Mediada por los pili
• Colonización específica de receptor de las células
no ciliadas de la nasofaringe
• Cápsula antifagocítica de polisacárido que le
permite diseminarse en ausencia de inmunidad
específica.
• Efectos tóxicos mediados por hiperproducción
de lipooligosacárido
Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de
todas las infecciones
Epidemiología:
• Hospedero natural: humano
• Diseminación persona-persona vía aerosolización de
secreciones respiratorias
• Más alta incidencia en niños menores de 5 años, personas
institucionalizadas y pacientes inmunodeficientes
• Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C
• Neumonía: serogrupos Y y W135
• Infecciones en países subdesarrollados: serogrupo A
• Mayor incidencia en las épocas frías y secas del año en
todo el mundo
Diagnóstico y Tratamiento
• Tinción de gram de LCR (difícil cuando hay pocos organismos)
• Dx definitivo: cultivo
• m.o. fastidioso y muere rápidamente en condiciones de frío y
sequedad.
• Tx, prevención y Control:
• Inmunidad pasiva por lactancia
• Droga de elección: penicilina y alternativamente:
cloranfenicol, ceftriaxona y cefotaxima.
• Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o sulfadiazina
• Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el serogrupo B)
• Vacunas de polisacárido conjugado con proteínas
transportadoras para niños menores de 2 años.
Cultivo
Se usa un medio selectivo para recuperar al
meningococo y al gonococo. Cuando está en un
ambiente contaminado con otras bacterias de la
microbiota normal.
Medio selectivo de Thayer Martin
• Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +), Colistina
(inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos) y Trimetoprim
(inhibe a Proteus spp que ocasiona swarming)
• Ocasionalmente hay cepas de GC sensibles a la
vancomicina, por lo que siempre debe usarse el agar
chocolate también.
Las colonias requieren 48-72 horas para crecer.
Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar (similar al
TM, pero usa anisomicina en lugar de nistatina, para
inhibir mejor a Candida albicans).
Cultivo en jarra con candela
Cultivo de N. meningitidis
Enfermedades asociadas con
Neisseria meningitidis
Después de la diseminación de
organismos virulentos de la nasofaringe:
Meningitis
Septicemia (meningococcemia) con o sin
meningitis
Meningoencefalitis
Neumonia
Artritis
Uretritis
Infecciones por MGC
• Meningococcemia:
Síntomas: fiebre alta, escalofríos, dolor
muscular y rash petequial (típico de infecciones
por MGC)
Enfermedad puede ser crónica, moderada o
fulminante.
Tipo fulminante: Síndrome de WaterhouseFriderichsen caracterizado por CID, hemorragia
dentro de la piel, glándulas adrenales y otros
órganos.
Muerte rápida por la toxemia generalizada y el
shock.
• La mayoría de los síntomas son debidos a
la actividad de endotoxina.
Rash Petequial
Síndrome de WaterhouseFriderichsen
Curso de la enfermedad
meningocóccica
Receptores para las fimbrias bacterianas (gangliósido GD1)
sobre las células columnares epiteliales no-ciliadas en la
nasofaringe del hospedero.
Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocíticas,
evitando la muerte intracelular.
Replicación intracelular y migración al espacio subepitelial
donde libera fragmentos de membrana.
Hiperproducción de endotoxina (lípido A ) y se disemina
al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente
sanguíneo): causa la mayoría de manifestaciones clínicas
de daño vascular: daño endotelial, vasculitis, trombosis,
CID.
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria gonorrhoeae
Único
hospedero natural: humano
Portador asintomático es el mayor
reservorio.
Edad más afectada: 15-24 años
Patogenia: gonorrea
Uretritis
Cervicitis
Generalidades de Neisseria
gonorrhoeae
Fácilmente transmitido por contacto sexual
Diplococos Gram-negativo achatados por el lado de
unión.
Fastidiosos, capnofílicos y susceptibles a temperaturas
frías, a la desecación y a ácidos grasos.
• Requiere medios pre-calentados complejos
• El medio debe llevar almidón soluble para neutralizar la
toxicidad de los ácidos grasos
• Crece mejor en atmósfera húmeda suplementada con CO2
Produce ácido de la oxicación de glucosa, pero no de
otros azúcares.
Diagnóstico, tratamiento y
prevención
Tinción de Gram es precisa en muestras masculinas.
Cultivo: diagnóstico definitivo
Biología molecular
Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y
ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe
evitarse porque ya se presenta mucha resistencia.
Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con
Chlamydia sp.
Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1%
Prevención: educación (ETS)
NO HAY VACUNA
Crecimiento de GC enMTM
Oxidasa positivo
Prueba de Oxidasa en placa
Prueba de Oxidasa en papel
Identificación Bioquímica
Para diferenciar entre las especies de
Neisseria y B. catarrhalis.
• Pruebas de utilización de carbohidratos.
• Oxidación de Carbohidratos
Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con
azúcares. Requiere una inoculación grande e
incubación sin CO2 y observación por 24-72
horas.
• Resultados: GC: + para glucosa solamente
Azúcares en CTA
Epidemiología de la Gonorrea
Serio subregistro
Diferencia epidemiológica entre hombres y
mujeres
Mayor reservorio: portador sintomático
Transmisión sexual
No hay inmunidad protectora para la reinfección
(en parte por la diversidad antigénica de las
cepas)
Mayor riesgo de enfermedad diseminada en
pacientes inmunocomprometidos.
Mujeres
Hombres
Riesgo post-exposición (1 contacto) es
de 50%
Riesgo post-exposición (1 contacto) es
de 20%
Frecuentemente asintomática y sin dx
Mayoría: sintomático (95%)
Principal reservorio es la portadora
asintomática
Principal reservorio es la portadora
asintomática
Infección genital primariamente en el
cervix, pero también son colonizados la
vagina, la uretra y el recto.
Infección genital restringida a la uretra
con descarga purulenta y disuria
Infecciones ascendentes en 10-20%:
salpingitis, abscesos tubo-ováricos,
enfermedad inflamatoria pélvica,
infertilidad por infección crónica.
Complicaciones raras: epididimitis,
prostatitis y abscesos periuretrales.
Infecciones diseminadas más comunes:
septicemia, infección de la piel y
articulaciones (1-3%)
Infecciones diseminadas muy raras
Puede infectar al infante durante el
parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum
Más común en hombres
homosexuales/bisexuales que en la
población heterosexual
Patogenia de Neisseria gonorrhoeae
Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la
membrana mucosa intacta
N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir
membranas intactas o piel con abrasiones.
Adherencia al epitelio mucoso
Penetración y multiplicación antes de pasar a través de
las células epiteliales de la mucosa
Establecimiento de la infección en la capa subepitelial
Sitios más comunes de inoculación:
• Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer
• Uretra (uretritis) o pene en el hombre
Factores de virulencia asociados a
Neisseria gonorrhoeae
Gonorrea
Ophthalmia neonatorum
Significancia clínica del GC
• Infecciones complicadas
Ocurren más frecuentemente en mujeres
Diseminación del cérvix a las trompas de
falopio
• Endometritis
• Salpingitis
• Peritonitis (EIP)
• Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas
• Síntomas: dolor abdominal bajo, flujo
cervical y vaginal anormal, útero blando.
• Puede resultar en infertilidad o en
embarazo ectópico.
Salpingitis
Moraxella catarrhalis
Moraxella catarrhalis
Diplococo gram-negativo
Aerobio y oxidasa positivo
Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y
clasificación taxonómica como de su consideración de
comensal o patógeno.
Actualmente, es aceptado como el tercer patógeno más
importante en el tracto respiratorio humano después de
Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae.
En los últimos 20 años, esta bacteria ha emergido como
un importante patógeno causante de infecciones en el
tracto respiratorio superior de niños y ancianos, e
infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con
enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC).
Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras
de ß-lactamasas.
Moraxella catarrhalis
Micrococcus catarrhalis
Neisseria catarrhalis
En 1970, basándose en la diferencia en el
contenido de ácidos grasos y mediante estudios
de hibridación de ADN se demostró la escasa
homología que existía entre N. catarrhalis y las
llamadas "verdaderas" especies de Neisseria,
estando, más cercana al género Acinetobacter.
Así pues, fue reclasificada y transferida al
género Moraxella
Moraxella catarrhalis
Actualmente, el género Moraxella engloba cocos
y bacilos cortos relacionados genéticamente
Bovre propone su división en dos subgéneros:
Branhamella, que englobaría los cocos y
Moraxella para los bacilos cortos.
Algunos autores prefieren el nombre de
Branhamella catarrhalis
Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos,
mientras que M. catarrhalis son diplococos
M. catarrhalis es un importante patógeno del tracto
respiratorio humano, mientras que las especies de
Moraxella rara vez causan infección en humanos.
Patogenia de Moraxella catarrhalis
En
Otitis media
Sinusitis
Bacteremia
Meningitis
En
niños:
adultos:
exacerbaciones en pacientes con EPOC
neumonía en ancianos
infecciones nosocomiales.
Factores de virulencia de Moraxella
catarrhalis
LOS
(Lípido A)
Peptidoglucano
Proteínas de la membrana externa
Fimbrias
Cápsula
Proteínas reguladores del hierro
Resistencia al complemento
Diagnóstico de Moraxella
catarrhalis
Muestras clínicas: Gram, Cultivo y pruebas bioquímicas
Crece en medios comunes, como agar sangre y agar
chocolate,
Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris.
Los criterios más usados para su identificación son los
siguientes:
Ausencia de pigmentación en agar sangre (no hemolítica).
Producción de oxidasa y catalasa.
Producción de DNAasa.
Hidrólisis de la tributirina.
Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa, maltosa,
sacarosa y fructosa.
Reducción de nitratos y nitritos.
Tratamiento de Moraxella
catarrhalis
Las
cepas de M. catarrhalis son
uniformemente sensibles a las quinolonas,
amoxicilina-clavulánico, cefalosporinas,
ticarcilina, piperacilina, macrólidos,
cloranfenicol y aminoglucósidos.
Se han comunicado casos aislados de
cepas resistentes a las tetraciclinas,
eritromicina, fluoroquinolonas, macrólidos,
piperacilina y a algunas cefalosporinas