Transcript Luminol-Mn 2+ -KIO 4 系統

魯米諾－錳（Ⅱ）離子－過碘酸鉀
化學發光系統探討及在類黃酮偵測上
之應用
指導老師：林萬寅 教授
馬艾傑 博士生
林宏儒 老師
演講者：鄭偉浩、廉強
化學發光的簡介-過去與現在
‧過去的人們很早就發現自然界的一些生物的發光
現象（bioluminsecse）-螢火蟲、某些種類的水
母
化學發光的簡介-近代的發展
商業化的化學發光(chemiluminsense)
ex 市售 螢光棒
化學發光的簡介-魯米諾(Luminol)
‧與氧化劑在強鹼中反應可產生425 nm的藍光，
在本發光系統中扮演主要角色
‧發光強度與pH值、催化劑、氧化劑
的濃度有相關的影響
‧應用方面-利用血液中鐵離子作為
催化劑，在犯罪現場可檢測有無血跡存在。
化學發光的簡介-魯米諾(Luminol)
利用化學發光偵測物-類黃酮的介紹
‧被發現於植物和花
-賦予蔬菜、水果顏色
‧體內的抗氧化劑
-對抗病毒、致癌物、毒素與過敏物質
‧黃烷酮(flavanone)是類黃酮中子類中的一類
-存在於花冠、樹皮、果皮
‧黃烷酮能抑制導致細胞老化的元凶
-活性含氧物質(‧O2－、‧OH、1O2)
化學發光偵測簡介-停止流技術介紹
實驗儀器：Hi-Tech KinetAsyst StoppedFlow System SF-61DX2(TgK Scientific)
Stopped-Flow System
研究架構
1. 設計實驗藉由改變pH值、Luminol濃度、
KIO4濃度、 Mn2+ 濃度，討論對化學發
光強度的影響，並找到最佳化學發光條
件。
2. 在找到最佳化學發光條件下，對一系列
的類黃酮素，偵測化學發光系統在類黃
酮素存在下，兩個訊號的消長現象，找
出其關連性。
Luminol-Mn2+-KIO4系統
-探討 pH值對發光強度的影響
pH
雙重發光系統將訊號1單獨分離觀察
pH
雙重發光系統將訊號2單獨分離觀察
pH
Luminol-Mn2+-KIO4系統
-探討 pH值對發光強度的影響
pH
pH
Luminol-Mn2+-KIO4系統
-探討 KIO4濃度對發光強度的影響
Luminol-Mn2+-KIO4系統
-探討 Luminol濃度對發光強度的影響
Luminol-Mn2+-KIO4系統
-探討 Mn2+濃度對發光強度的影響
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮-增強peak1的訊號
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮-抑制peak1的訊號
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮-先抑制-後增強peak1的訊號
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮-抑制peak2的訊號
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮-先抑制-後增強peak2的訊號
利用Luminol-Mn2+-KIO4 發光系統
偵測類黃酮-先增強-後抑制peak2的訊號
實驗結果總結
1. 魯米諾的發光系統必須在強鹼的環境下
(pH>12)，發光強度與氧化劑KIO4、催化錳（
Ⅱ）離子、發光試劑的濃度呈現正相關
2. 找到化學發光最佳化條件為：pH=13.25、
500μM KIO4、50μM Luminol、100μM
Mn(Ⅱ)、0.1M 磷酸鉀緩衝溶液
3. 魯米諾的雙重化學發光系統對不同的類黃酮
檢測，訊號1及訊號2會隨著偵測物的種類出
現不同的增強及抑制；這將可以作為分子篩
檢用途之用
學習心得
1. 對自己負責以及時間的安排掌控。
2. 與伙伴的互相體諒以及溝通協調。
3. 蒐集資訊的能力培養，以及統整資訊的能力。
4. 瞭解論文的寫法，以及如何報告。
5. 更珍惜身邊的人事物，這次的專題感謝許多的老
師協助、幕後人員的奔走規劃、場地的布置。
感謝大家的聆聽！