Transcript Mintaelokeszites-2012

Műszerezettség és
mintaelőkészítés kapcsolat
Kiegészítések
• 1. Nagy műszerezettség és
mintaelőkészítési szükséglet
• Fogalmak:
• On-line
• Off-line
• At-line
• In-line
• Folyadékkromatográf, mint
mintaelőkészítő egység!
• Kolonna követelmény: rövidebb, mert az
MS, mint elválasztó egység működik.
Feladata a mátrix interferencia elkerülése!
• Ionelyomás vagy érzékenyítés elkerülése!
• Mi különbség az LC-MS és az LCMS-MS
nyújtotta teljesítmény között?
• LC-MS: minőségi információ kevés!
• LC-MS-MS: minőségi információ,
interferencia mentes mennyiségi analitika!
•
•
•
•
•
•
•
Tömeganalizátorok használata 2012!
Q kvadrupol
IT ioncsapda
TOF repülési idő analizátor
IMS ion mobilitási spektométer
ICR ion ciklotron tömegspektrometer
LIT lineáris ioncsapda
LC-MS-MS
• Mátrixot tartalmazó mintáknál és nagyon
eltérő polaritásúaknál, a minta előkészítést
a folyadékkromatográfiában
grádienselucióval végezzük!
• Elsődlegesen oldószergrádienssel!
• Folyadékkromatográfiás módok
hatékonysága és elemzési időszükséglet
• összefüggése a grádienselúcióban!
Mérőszáma:csúcskapacítás(P).
– A csúcsfelbontó kapacitás a vegyületek
molekulatömegétől, a folyadékkromatográfiás
módtól és a töltet morfológiájától függ!
• Az elválasztást
csúcskapacitással(P)jellemezzük.
• Fizikai értelme, hány komponenst tudunk
elhelyezni, szorosan egymás mellett, hogy
a felbontás,Rs=1.
• Feltételezve, hogy csúcsok egyenlő
szélességűek(w)
• P=tg/w, vagy P=1+tg/w
Folyadékkromatográfiásan kis molekulatömegű anyagok
Választási lehetőségek
• HPLC
• UPHLC megvalósítása: az alábbiakkal
• 2 mikrométer alatti töltetek:teljesen porózus
vagy héjszerű
• HTLC:kolonna stabilitás
• Héjszerű töltetek: 3 vagy 2 um alatti töltetek
Nagy molekulatömegű anyagok
• QxQ: mennyiségi analitikára.
• Nincs tökéletes kolonna, amelynél a mátrix
zavarás kiküszöbölhető lenne!
• Kísérő vagy kettős belső standard
alkalmazása szükséges a false pozitív
vagy false negatív hiba kiküszöbölésére!
• Mátrixhatás kiküszöbölése:
• 1.Mátrixra való kalibrálás:szpájk.
• 2.Kisérő standard vagy kettős belső
standard
• 3.Izotóp higításos módszer
• Izotóp hígításos módszernél vagy
deuterizált vagy szén izotóp jelzett.
• Minőségi meghatározásra:
• MADI-TOF
• Nem alkalmas mennyiségire!
• MALDIxQqQ, mind mennyiségi, mind
minőségi analitikára!
Trendek:
Kis felbontású készülékek helyett nagy felbontásúak!
HPLC-MS, helyett UHPLC-MS
2D-LC-MS
!
Orbitrap analizátor bevezetése!
Szoftver segítség az adatfeldolgozáshoz
Ion mobilitási spektrométer elve
• Megjelentek az ion mobilitás spektrométer
(IMS) kombinációk!
Spektrum.
IMS: gyors felvételek
Ma oz off-line technika a döntő
• LC-SPE on line
• Off-line oldószercsere
• SPE-NMR on-line
• Követelmények az SPE-vel szemben:
• Adott mozgófázisnál az oszlop
visszatartása nagy legyen. Ezt segíti a
mozgófázis gyengébbik komponensének
adagolása!
• Össze kell hangolni a
folyadékkromatográfiás módszert, az SPE
kémiájával
• RPLC-víz
• NPLC-n-hexán
• HILIC-AN
• Minden esetben a fókuszáló hatást kell
kihasználni!
• RPLC:
• Ha vegyület logP vagy logD értéke 2 alatt
van, akkor a fókuszáló hatás kevésbé
érvényesül!
• Ha logP vagy logD értéke 2, akkor a víz
hozzáadására a visszatartás jelentősen
nő,érvényesül a fókuszáló hatás!
• SPE mintadúsító és tisztító oszlopok
felületi kémiája nagy átfedést mutat a
folyadékkromatográfiás kolonnákéval!
• Szilikagél alapú alkilmódosítottak!
• Poláris fordított fázisú töltetek!
• C-8 módosítás
• Szerves polimer alapúak
• ioncserélők
• NMR jel függ a kolonna elejének
koncentráló hatásától!
•
•
•
•
LC-FTIR, nincs újabb fejlesztés.
Ok:
érzékenység
megfelelő oldószer kiválasztása a
méréshez az on-line csatolásnál
• Off-line technika nehézkes
• Új trend a GC-MS technikában:
• GC-MS-MS a GC-MS helyett
• Elemanalitikában a speciációs elemzés előtérbe
kerülése,
• Így GC-ICP-LRMS vagy HRGC-HRMS
•
LC-ICP-LRMS vagy UHPLC-HRMS
•
• IC-ICP-MS helyett
• IC=ionkromatográf
• CIC=capillary ion chromatograph
• CIC: kisebb mozgófázis fogyasztás
•
nagyobb érzékenység