Transcript 6 - UPCH
AF-6 RGL PI3K Raf Rin1 Mekk Nore-1 Uniones hendidura PLD Akt MAPK BCR JNK ?? EFECTOS BIOLOGICOS Estímulo Externo: •Hormonas •Factores de crecimiento •Citoquinas Ras GTP Encendido Apagado Ras GDP Miembros: H-Ras, N-Ras y K-Ras (4A + 4B) Bajo peso molecular: ~21kDa (188-189 aa) GEF: Guanine nucleotide Exchange Factor GAP: GTPase Activating Protein Receptor EGF PTK PTK Sos GDP Ras inactivo homología CDC25 SH3 SH3 Grb2 PPPVPPRR SH2 Receptor EGF activo GTP PTK PTK Ras activo SH3 P P EYINQ SH3 Cascada de kinasas ESTRUCTURA DE RAS Unión de Pi a y b Unión de Pi g y Mg+ Unión de anillo de Guanina G10AAGGVGKSA18 D57TAGQEL63 N116KCD119 E143TSA146 Región hipervariable Y32DPTIEDSY40 Caja CAAX H-Ras QHKLRK LNPPDES GPG CMS N-Ras Q Y R M K K L NS S D D G T Q G C M G K-Ras 4A Q Y R L K K I S K E E K T P G C V K I K-Ras 4B R K H K E K M S K D G K K K K K K S K Unión a GTP Switch I (interacción con GAP) CKCVLS LPCVVM KKCIIM TKCVEM Unión a efector Switch II (interacción con GEF) Inhibidores de Farnesil Transferasa Posibles modos de atacar trasformación por Ras Cascada activada por Ras Factor crec. Stress, diferenciación, factor cr. Raf-1, A-Raf B-Raf, Mos MEKK 1-3 Tpl-2 MEK1 MEK2 ? ERK1 ERK2 ERK3 ERK4 P90rskS6 kinasa, Sos PL A2, EgFR, Elk-1 Ets1, Sap1a, c-Myc, Tal, STATs Crecimiento, diferenciación MKK5 ERK5 MEF2C c-Jun MEKK4 DLK TAK1, ASK1, MLK3 MKK4, MKK7 JNK1,JNK2 JNK3 c-Jun, ATF2, Elk1, DC4, NFAT4 Crecimiento, dif., sobreviv, apoptosis Stress PAK MKK3, MKK6 p38a, p38b p38g, p38d MAPKAP kinasa, ATF2 Elk1, Cop, Mx, MEF2C Produx citoquinas apoptosis Señal p.ej. EGF Tirosin kinasa p.ej. Receptor de EGF Proteína adaptadora p.ej. Grb/Sos GTPasa pequeña p.ej. Ras MAPKKK p.ej. Raf MAPKK p.ej. MEK-1 MAPK p.ej. ERK P Sustrato P.ej. PDE4D3 MAPK MAPK P Sustrato P.ej. Elk-1 Módulos de reconocimiento para MAPK presentes en diversas proteínas MEF2A: myocyte-specific-enhancer-binding factor 2A Rsk1: ribosomal S6 kinase Estructura de Dominios de Activación Transcripcional (TAD) regulados por MAPK DBD: DNA binding domain D/d: kinase docking domain MEF2A myocyte specific enhancer-binding factor 2A Fenotipos de ratones K.O. para MAPKK y MAPK MAPKK/MAPK MEK1 MKK4 MKK7 MKK3 ERK1 JNK1 JNK2 JNK1 ó JNK2 JNK1 ó JNK2 JNK1 & JNK2 JNK1 & JNK2 JNK3 p38a p38a Fenotipo Semejante a Vascularización de placenta ERK2? defectuosa Desarrollo de hígado defectuoso K.O. de c-Jun Letalidad embrionaria causa ? Producción defectuosa de IL-12 Desarrollo de células T defectuoso MEK1 dn (selección positiva) Diferenciación a Th2 defectuosa Diferenciación a Th1 defectuosa Proliferación de células T y JNK1 dn transgénicos producción de IL-2 defectuosa Muerte inducida por activación JNK1 dn transgénicos defectuosa Sobreproducción de IL-2 K.O. MKK7 Cierre de tubo neural Resistencia a muerte celular de K.I. c-JunA63/73 neuronal excitotóxicas Defecto de placenta (células trofoblásticas) Producción insuficiente de eritropoyetina Regiones para la localización nuclear de MAPKs Secuencias de Dominios de Docking de MAPK en Factores de Transcripción *c-Jun 33I L K Q S MT - L N L A D P V G S L *JunB 34L L K P S L A - V N L A D P Y R S L *NFAT4 141L E R P S R D H L Y L P L E P S Y R ATFa 26 V H K H K H E - MT L K F G P A R T *Elk-1 312K GRKPRD -L E L PLSPSL L *LIN-1 281G M K P N P - - L N L T A TS N F S *TFII-I279S K R P K A - - N E L P Q P P V P E SAP-1 SAP-2 318R ERK/JNK ERK S K K P K G - L G LA P T - - L V I 290K A K K P K G - L E I S A P P L L V L *MEF2C 250N - R K P D - - - - L R - - - - V L I *MEF2A 267N S R K P D - - - - L R - - - - V V I ATF-2 Característica: JNK 44VH ERK/p38 p38 KHKHE-M T LKFGPARN p38/JNK Básico (L x L) (j j j) RAS - GAP