Transcript 6 - UPCH
AF-6
RGL
PI3K
Raf
Rin1
Mekk
Nore-1
Uniones
hendidura
PLD
Akt
MAPK
BCR
JNK
??
EFECTOS BIOLOGICOS
Estímulo Externo:
•Hormonas
•Factores de crecimiento
•Citoquinas
Ras GTP
Encendido
Apagado
Ras GDP
Miembros: H-Ras, N-Ras y K-Ras (4A + 4B)
Bajo peso molecular: ~21kDa (188-189 aa)
GEF: Guanine nucleotide
Exchange Factor
GAP: GTPase Activating
Protein
Receptor EGF
PTK
PTK
Sos
GDP
Ras
inactivo
homología
CDC25
SH3
SH3
Grb2
PPPVPPRR
SH2
Receptor EGF
activo
GTP
PTK PTK
Ras
activo
SH3
P
P
EYINQ
SH3
Cascada de
kinasas
ESTRUCTURA DE RAS
Unión de Pi a y b
Unión de Pi g y Mg+ Unión de anillo de Guanina
G10AAGGVGKSA18
D57TAGQEL63
N116KCD119
E143TSA146
Región hipervariable
Y32DPTIEDSY40
Caja
CAAX
H-Ras
QHKLRK LNPPDES GPG CMS
N-Ras
Q Y R M K K L NS S D D G T Q G C M G
K-Ras 4A Q Y R L K K I S K E E K T P G C V K I
K-Ras 4B R K H K E K M S K D G K K K K K K S K
Unión a GTP
Switch I (interacción con GAP)
CKCVLS
LPCVVM
KKCIIM
TKCVEM
Unión a efector
Switch II (interacción con GEF)
Inhibidores de Farnesil Transferasa
Posibles modos de atacar trasformación por Ras
Cascada activada por Ras
Factor crec.
Stress, diferenciación, factor cr.
Raf-1, A-Raf
B-Raf, Mos
MEKK 1-3
Tpl-2
MEK1
MEK2
?
ERK1
ERK2
ERK3
ERK4
P90rskS6 kinasa, Sos
PL A2, EgFR, Elk-1
Ets1, Sap1a, c-Myc,
Tal, STATs
Crecimiento,
diferenciación
MKK5
ERK5
MEF2C
c-Jun
MEKK4
DLK
TAK1, ASK1,
MLK3
MKK4, MKK7
JNK1,JNK2
JNK3
c-Jun, ATF2, Elk1,
DC4, NFAT4
Crecimiento, dif.,
sobreviv, apoptosis
Stress
PAK
MKK3, MKK6
p38a, p38b
p38g, p38d
MAPKAP kinasa, ATF2
Elk1, Cop, Mx,
MEF2C
Produx citoquinas
apoptosis
Señal
p.ej. EGF
Tirosin kinasa
p.ej. Receptor de EGF
Proteína adaptadora
p.ej. Grb/Sos
GTPasa pequeña
p.ej. Ras
MAPKKK
p.ej. Raf
MAPKK
p.ej. MEK-1
MAPK
p.ej. ERK
P
Sustrato
P.ej. PDE4D3
MAPK
MAPK
P
Sustrato
P.ej. Elk-1
Módulos de reconocimiento para MAPK presentes
en diversas proteínas
MEF2A: myocyte-specific-enhancer-binding factor 2A
Rsk1: ribosomal S6 kinase
Estructura de Dominios de Activación Transcripcional
(TAD) regulados por MAPK
DBD: DNA binding domain
D/d: kinase docking domain
MEF2A myocyte specific enhancer-binding factor 2A
Fenotipos de ratones K.O. para MAPKK y MAPK
MAPKK/MAPK
MEK1
MKK4
MKK7
MKK3
ERK1
JNK1
JNK2
JNK1 ó JNK2
JNK1 ó JNK2
JNK1 & JNK2
JNK1 & JNK2
JNK3
p38a
p38a
Fenotipo
Semejante a
Vascularización de placenta
ERK2?
defectuosa
Desarrollo de hígado defectuoso
K.O. de c-Jun
Letalidad embrionaria causa ?
Producción defectuosa de IL-12
Desarrollo de células T defectuoso
MEK1 dn
(selección positiva)
Diferenciación a Th2 defectuosa
Diferenciación a Th1 defectuosa
Proliferación de células T y
JNK1 dn transgénicos
producción de IL-2 defectuosa
Muerte inducida por activación
JNK1 dn transgénicos
defectuosa
Sobreproducción de IL-2
K.O. MKK7
Cierre de tubo neural
Resistencia a muerte celular de
K.I. c-JunA63/73
neuronal excitotóxicas
Defecto de placenta (células trofoblásticas)
Producción insuficiente de eritropoyetina
Regiones para la localización nuclear de MAPKs
Secuencias de Dominios de Docking de MAPK en
Factores de Transcripción
*c-Jun 33I L K Q S MT - L N L A D P V G S L
*JunB 34L L K P S L A - V N L A D P Y R S L
*NFAT4 141L E R P S R D H L Y L P L E P S Y R
ATFa 26 V H K H K H E - MT L K F G P A R T
*Elk-1
312K
GRKPRD -L E L PLSPSL L
*LIN-1 281G M K P N P - - L N L T A TS N F S
*TFII-I279S K R P K A - - N E L P Q P P V P E
SAP-1
SAP-2
318R
ERK/JNK
ERK
S K K P K G - L G LA P T - - L V I
290K A K K P K G - L E I S A P P L L V L
*MEF2C 250N - R K P D - - - - L R - - - - V L I
*MEF2A 267N S R K P D - - - - L R - - - - V V I
ATF-2
Característica:
JNK
44VH
ERK/p38
p38
KHKHE-M T LKFGPARN
p38/JNK
Básico
(L x L)
(j j j)
RAS - GAP