血红蛋白含量测定

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Transcript 血红蛋白含量测定

主讲 陈小琼 实验师
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血红蛋白(Hb)是高等生
物体内负责运载氧的一种蛋
白质。是使血液呈红色的蛋
白,是红细胞的主要成份。
血红蛋白由血红素和珠蛋白
组成。
血红蛋白与运动
 由于Hb指标相对稳定,能敏感的反映身体
机能状态。在运动训练中经常利用Hb评定
运动员机能状态、训练水平、预测运动能
力。
 经过运动训练以后,血液的有形成分会发
生一些变化。正常的情况下Hb的变化与红
细胞的变化是一致的,运动中凡是能影响
红细胞的因素都能影响Hb。
实验目的和要求
学习和掌握沙利氏比色法测定
血红蛋白含量
学习采集末梢血
了解血红蛋白仪的使用
实验原理
 沙利氏比色法
血液加入盐酸后,血红蛋白(Hb)
转化成不易变色的棕色的高铁血红蛋白,
可与标准比色板进行比色,从而测得每
百毫升血液中血红蛋白的克数或百分数。
所需仪器、试剂
 沙利氏比色计
 酒精、棉球
 采血针、20μl微量采血管
 0.1mol/L盐酸、蒸馏水
实验步骤
 1、将0.1mol/L盐酸加入比
色计中,至刻度“2”或
“10%”处。
 2、用酒精棉球消毒手指采
血部位,以采血针采血,
用采血管插入流出的血滴
深处,吸血至20μl,拭净
采血管外壁。
20μl
实验步骤
 3、将血液立即吹入测定管的盐酸中,反
复吹吸,使采血管中的血液全部进入盐酸
中(避免产生气泡)。
 4、混匀,静置10min后,逐滴加入蒸馏水,
使液体的颜色变浅,边加边混匀并与标准
比色板比较,至二者颜色相同为止。
实验步骤
 5、读出测定管内液体凹面最低处的刻度,
即为每100ml血液中血红蛋白的克数。比色
计另一面刻度表示百分率(每100ml血液含
14.5g血红蛋白作为100%设制)。
实验注意事项
 吸血量要准确,采血管中的血不应混有气泡,
管外壁沾附的血液要拭净。
 血液加盐酸以后,要求放置时间不应少于
10min,否则会使测定结果偏低。
结果分析
 增多:主要是见于脱水,血容量减少,血
红蛋白相对增加。也见于真性红细胞增多
症。高原训练,红细胞代偿性增高,Hb增
高。操作误差,采血管外沾附的血液没有
擦掉。
 减少:主要见于各种贫血。操作误差,采
血管中的血混有气泡或者加盐酸后放置时
间少于10min。
5020血红蛋白仪使用
 原理:光谱吸收分析法
 操作顺序:蒸馏水调零,
标准液定标,上样。
 优点:快速、准确、方
便。
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