Transcript ce-ivd spec template

Monoclonal Mouse
Anti-Human
CD44, Phagocytic Glycoprotein-1
Clone DF1485
Codenr. M 7082
Beoogd gebruik
Voor diagnostisch gebruik in vitro.
Monoclonal Mouse Anti-Human CD44, Phagocytic Glycoprotein-1, Clone DF1485, is bestemd voor gebruik bij
immunocytochemie. De antistof labelt de lymfocyten, zowel T- als B-cellen, monocyten, granulocyten,
erytrocyten, epitheelcellen (1) en mestcellen (2) en is nuttig voor de identificatie van CD44 in deze cellen en
hun neoplastische tegenhangers. De differentiële identificatie wordt ondersteund door een panel antistoffen. De
resultaten moeten door een bevoegd deskundige worden geïnterpreteerd, rekening houdend met de anamnese
van de patiënt en andere diagnostische tests.
Synoniemen voor het
antigeen
CD44s, ECMRIII, Hermes-antigeen, 'homing-associated cell adhesion molecule' (H-CAM), Pgp-1 (2-4).
Inleiding
CD44 is een type I transmembraamadhesiemolecule met een molecuulgewicht van 85-90 kDa. Het is een
glycoproteïne met uitgebreide O-glycosylering en 6 potentiële N-glycosileringsplaatsen. Een deel van het
N-terminale domein van CD44 vertoont homologie met een deel van kern- en bindingseiwitten van
proteoglycaan in kraakbeen (5). CD44 is een celoppervlakreceptor voor hyaluronaat, wat wijst op een rol bij de
regulatie van interacties tussen cel en celsubstraat, evenals bij celmigratie (3).
CD44 wordt tot expressie gebracht op uiteenlopende cellen. In het hematopoëtische systeem is het aanwezig
op monocyten, granulocyten, erytrocyten, B-cellen en rijpe T-cellen (1, 2). Buiten het hematopoëtische systeem
wordt het tot expressie gebracht op epitheelcellen, fibroblasten, skeletspier, witte stof van het centrale
zenuwstelsel en uiteenlopende tumoren (5, 6).
Geleverd reagens
Monoklonale muizenantistof geleverd in vloeibare vorm als celcultuursupernatans gedialyseerd tegen
0,05 mol/L Tris/HCl, pH 7,2 met 15 mmol/L NaN3.
Kloon: DF1485. Isotype: IgG1, kappa.
Muizen-IgG-concentratie mg/L: zie etiket op flacon.
Specificiteit
Anti-CD44, DF1485, werd opgenomen in de Fourth International Workshop and Conference on Human
Leucocyte Differentiation Antigens (1), en een aantal laboratoria heeft de reactiviteit tegen CD44 bevestigd.
Voorzorgsmaatregelen
1. Voor deskundige gebruikers.
2. Dit product bevat natriumazide (NaN3), in zuivere vorm een zeer giftige chemische stof. In
productconcentraties wordt natriumazide niet geclassificeerd als gevaarlijk, maar kan het reageren met loden
en koperen leidingen, waarbij uiterst explosieve metaalaziden worden gevormd. Bij het afvoeren spoelen met
ruime hoeveelheden water om stapeling van metaalaziden in de leidingen te voorkomen.
3. Zoals bij alle producten verkregen uit biologische grondstoffen dienen de juiste behandelingsprocedures te
worden gebruikt.
Opslag
Bewarentussen 2 en 8 °C. Niet gebruiken na de op de flacon vermelde houdbaarheidsdatum. Als reagentia
bewaard worden onder andere omstandigheden dan hier vermeld, moeten de omstandigheden door de
gebruiker worden gecontroleerd. Er zijn geen duidelijke aanwijzingen voor instabiliteit van dit product. U dient
daarom tegelijk met de patiëntspecimens positieve en negatieve controles te laten lopen. Als er onverwachte
kleuring wordt vastgesteld die niet verklaard kan worden door variaties in de laboratoriumprocedures en er een
probleem met de antistof wordt vermoed, neemt u contact op met onze technische dienst.
Specimenbereiding
Paraffinecoupes: De antistof kan worden gebruikt voor het labelen van in paraffine ingebedde en in formaline
gefixeerde weefselcoupes. Voorbehandeling van de weefsels met heat-induced epitope retrieval is vereist.
Optimale resultaten worden verkregen met Dako Target Retrieval Solution, codenr. S 1700. Minder optimale
resultaten worden verkregen met Dako Target Retrieval Solution, citraat pH 6, codenr. S 2369 of Dako Target
Retrieval Solution, pH 9, codenr. S 2368, terwijl Dako Target Retrieval Solution, High pH, codenr. S 3308 of
voorbehandeling van weefsels met Dako Proteinase K, codenr. S 3020 inefficiënt bleek te zijn. De
weefselcoupes mogen tijdens de behandeling of de daaropvolgende immunocytochemische
kleuringsprocedure niet uitdrogen.
Vriescoupes en celpreparaten: De antistof kan worden gebruikt voor het labelen van in aceton gefixeerde
vriescoupes.
Kleuringsprocedure
(108760-002)
Verdunning: Monoclonal Mouse Anti-Human CD44, Phagocytic Glycoprotein-1, codenr. M 7082, kan worden
gebruikt in een verdunning van 1:25-1:50 bij gebruik op in formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde coupes
van humane amandelen en met 20 minuten heat-induced epitope retrieval in Dako Target Retrieval Solution,
codenr. S 1700 en 30 minuten incubatie bij kamertemperatuur met de primaire antistof. De optimale
omstandigheden kunnen variëren afhankelijk van het specimen en de bereidingsmethode en dienen door het
betreffende laboratorium te worden bepaald. De aanbevolen negatieve controle is Dako Mouse IgG1, codenr. X
0931, verdund tot dezelfde muizen-IgG1-concentratie als de primaire antistof. Tenzij de stabiliteit van de
M 7082/NL/MTH/22.03.04 p. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
verdunde antistof en negatieve controle zijn vastgesteld in de eigenlijke kleuringsprocedure, adviseren wij om
deze reagentia onmiddellijk voor gebruik te verdunnen of om ze te verdunnen in Dako Antibody Diluent, codenr.
S 0809. Positieve en negatieve controles dienen gelijktijdig met patiëntenspecimens te worden getest.
Visualisatie: DAKO LSAB™+/HRP-kit, codenr. K 0679 en DAKO EnVision™+/HRP-kits, codenr. K 4004 en
K 4006 worden aanbevolen. Voor vriescoupes en celpreparaten vormt de Dako APAAP-kit, codenr. K 0670,
een goed alternatief wanneer de endogene peroxidasekleuring problemen oplevert. Volg de bij de gekozen
visualisatiekit bijgesloten procedure.
Werkingskarakteristieken
Cellen die door de antistof zijn gelabeld, vertonen een kleuring die beperkt is tot het celoppervlakmembraan (6).
Er is echter cytoplasmische kleuring gemeld (4, 7).
Normale weefsels: De antistof labelt circa 90% van alle lymfocyten, zowel T-cellen als B-cellen. De antistof
labelt ook monocyten, granulocyten, erytrocyten en epitheelcellen. De epitoop wordt zwak tot expressie
gebracht op bloedplaatjes (1, 6).
Abnormale weefsels: Er is aangetoond dat de antistof mestcellen labelt in zowel normale als neoplastische
weefsels (2). De expressie van CD44 was zwakker in carcinomen dan in adenomen van zowel colon/rectum als
appendix. De antistof labelde 68/71 (97%) van de colorectale adenomen en 34/39 (87%) van de
appendixadenomen, terwijl de antistof 109/137 (80%) van de colorectale carcinomen en 19/34 (56%) van de
appendixcarcinomen labelde (4). In een onderzoek van 49 gevallen van colorectaal carcinoom bleek 41% van
het maligne epitheelweefsel een positieve labeling te vertonen tegenover 10% van het normale weefsel. De
expressie van CD44 in het epitheel was sterker bij rectale kanker (48%) dan bij colonkanker (21%) (7).
Referenties
1.
Stoll M, Dalchau R, Schmidt RE. N6 Cluster report: CD44. In: Knapp W, Dörken B, Gilks WR, Rieber EP,
Schmidt RE, Stein H, et al., editors. Leukocyte typing IV. White cell differentiation antigens. Proceedings
of the 4th International Workshop and Conference; 1989 Feb 21-25; Vienna, Austria. Oxford, New York,
Tokyo: Oxford University Press; 1989. p. 619-22.
2.
Horny H-P, Menke DM, Kaiserling E. Neoplastic human tissue mast cells express the adhesion molecule
CD44/HCAM. Virchows Arch 1996;429:91-4.
3.
Aruffo A, Stamenkovic I, Melnick M, Underhill CB, Seed B. CD44 is the principal cell surface receptor for
hyaluronate. Cell 1990;61:1303-13.
4.
Carr NJ, Emory TS, Sobin LH. Epithelial neoplasms of the appendix and colorectum. An analysis of cell
proliferation, apoptosis, and expression of p53, CD44, and bcl-2. Arch Pathol Lab Med. 2002;126:83741.
5.
Stamenkovic I, Amiot M, Pesando JM, Seed B. A lymphocyte molecule implicated in lymph node homing
is a member of the cartilage link protein family. Cell 1989; 56:1057-62.
6.
Dalchau R, Flanagan BF, Allen AK, Daar AS, Fabre JW. Chemical composition and tissue distribution of
the human CD44 glycoprotein. In: Knapp W, Dörken B, Gilks WR, Rieber EP, Schmidt RE, Stein H, et al.,
editors. Leukocyte typing IV. White cell differentiation antigens. Proceedings of the 4th International
Workshop and Conference; 1989 Feb 21-25; Vienna, Austria. Oxford, New York, Tokyo: Oxford
University Press; 1989. p. 622-5.
7.
Khoursheed M, Mathew TC, Makar RR, Sonia L, Abul H, Asfar S, et al. Expression of CD44s in human
colorectal cancer. Pathol Oncol Res. 2002;8:170-4.
Verklaring van de symbolen
(108760-002)
Catalogusnummer
Temperatuurlimiet
Medisch hulpmiddel voor in
vitro diagnostiek
Lotnummer
Raadpleeg de
gebruiksaanwijzing
Houdbaar tot
Fabrikant
M 7082/NL/MTH/22.03.04 p. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17