07 2016 2017 fecondazione biotecnol

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fecondazione
ØÈilprocessobiologicomedianteil
qualelospermatozooel’oocito
interagisconoperdareluogoalla
riproduzionesessuale
ØIniziaquandoglispermatozoi
vengonodepostinelleviegenitali
femminilieterminaquandol’oocito
avviaiprocessidiattivazione
fasicheprecedonolafecondazione:
nelleviegenitalimaschili
• glispermatozoi,dopolaspermatogenesi,non
sonoancoraingradodideterminarela
fecondazione
• duranteilpassaggionelleviegenitalimaschili
(epididimo)acquisisconolamotilità
• lamotilitàdeglispermatozoivienefavoritadalle
sostanze(zuccheri,lipidi,proteine,ioni,ormoni)
contenutenelliquidoseminale eprodottedalle
ghiandoleannessealleviegenitalimaschili
• glispermatozoieilliquidoseminalecostituiscono
losperma(20milionidispermatozoiperml)
fasicheprecedonolafecondazione:
nelleviegenitalifemminili
• unavoltadepostinellavaginaglispermatozoi
percorrono(canalevaginale,utero,tuba)circa20
cmperraggiungerel’oocitonellazonaampollare
• sonoattrattiversolacellulauovodasostanze
chimiche(chemotassi)edaungradientetermico
(termotassi)
• nelleviegenitalifemminiliglispermatozoi
acquisisconolacapacitàdifecondarelacellula
uovo:capacitazione
=aumentodeirecettoridimembranaper
membranapellucidaepermembrana
dell’oocita
=aumentodell’attivitàdimovimento
interazionispermatozoo-oocito
• inprossimitàdellacellulauovo
giungonoalcunecentinaiadi
spermatozoi,masolouno
entrerànellacellulauovo
• lospermatozoodeve
attraversarelecelluledel
cumuloooforo(alcunemigliaia)
elamatricedoveabbonda
acidoialuronico
• l’attraversamentoavviene
mediantelaspintadovutaal
movimentodellacodaegrazie
allaialorunidasi chedigerisce
l’acidoialuronico
interazionispermatozoo-oocito
• lospermatozoosilegaallamembranapellucidaehaluogola
reazioneacrosomiale :
– Fusionemembranaacrosomiale esternaconmembranacellulare
– Rilasciodeglienzimieaperturadiunvarconellamembranapellucida
•glienzimidigeriscono
localmenteleglicoproteine
dellamembranapellucida
•siapreunpassaggionellam.p.
elospermatozooaderisce
tangenzialmenteaimicrovilli
dell’oocito
•lemembranesifondonoelo
spermatozoocessadimuoversi
l’interazionetramembranadellospermatozooe:
– membranapellucida- avvienegraziealegamitramolecoledi
adesioneespressedallospermatozoo(ZonaAdesine)e
oligosaccaridi (glicoproteine ZP1,ZP2eZP3)
– membranadell’oocita-avvienegraziealegamitramolecoledello
spermatozoo(fertilina o PH-30,izumo)e molecolediadesione
dellamembranadell’oocito(integrina a6b1,CD9=tetraspanine)
meccanismodiattivazionedell’oocito
• lareazionedellamembranapellucidasi
estende
• l’attivazione èlegataall’aumentodelCa++
nelcitoplasmadell’oocito
• ilrilasciodelCa++sarebbedovutoauna
fosfolipasi chegeneraIP3(inositide tri
fosfato)fattorechecausaaperturadei
canalidelCA++
modificazionidell’oocitoedellospermatozoo
lamembranadell’oocitasisollevaeinglobalospermatozoo
nucleoeuncentriolo sonoaccoltinellacellulauovo
imitocondridellospermatozoosonoeliminati
siverificaattivazionedell’oocitaeconseguentereazione
corticale(esocitosigranulicorticali)
• lamembranapellucidasimodifica:
– igranulicorticalicontengonoenzimicheromponole
connessionitral'uovoelazonapellucida
– irecettoriperglispermatozoivengonorimossidalla
superficiedell'uovo
– sostanzecontenuteneigranulicorticalifannoentrareacqua
perosmosialdisottodellazonapellucida
– lamembranapellucidasistaccadallamembranaplasmatica
esiindurisce,impedendol'ingressodialtrispermatozoi
(polispermia)
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altreconseguenzedell’attivazionedell’oocito
•attivazionediMPF dovutaadaumentodi
Ca++
•completamentodellameiosiII
•emissionedelsecondoglobulopolare(edel
terzo)
• decondensazione dellacromatina
• formazionedeiduepronuclei,maschileefemminile
• DuplicazionedelDNAemessainposizionedei
cromosomipaterniematerni,dissoluzionemembrane
deipronucleieiniziodellaprimadivisionemitotica
tecnichedifecondazioneassistita
tecnichedifecondazioneassistita