Transcript lkhws_ltbyy_llfyrws_fy_lsyr_lmsb.ppt

‫الخواص الطبيعية للفيروس في العصير المصاب‬
‫الحساسية للعوامل الطبيعية‬
‫أظهرت الدراسات ان الفيروسات في العصير النباتي تختلف في درجة‬
‫مقاومتها للعوامل الطبيعة والكيمائية ولهذا استغلت هذه االختالفات فى تميز‬
‫الفيروسات عن بعضها البعض‪.‬‬
‫أهم االختبارات الحساسية هي ‪:‬‬
‫‪ -1‬تقدير أعلى نقطة تخفيف للعصير المحتوي على جزيئات الفيروس‬
‫والذي يستمر في إعطاء اإلصابة والتخفيف الذي يليه ال يعطي اصابة‬
‫‪ -2‬تقدير درجة الحرارة التي توثر على الفيروس في العصير والتي عندها‬
‫تفقده القدرة على العدوى اذا ما عرض لها لمدة عشر دقائق‬
‫‪ -3‬تقدير أطول فترة زمنية الذي يظل عندها العصير المصاب معديا عند‬
‫حفظه في درجة حرارة المعمل العادية‪.‬‬
‫‪ -1‬تقدير نقطة تخفيف النهائية للعصير الفيروسي‪:‬‬
‫وهى درجة التخفيف النهائية للعصير الفيروسي( بالماء او المحلول‬
‫المنظم) الذي بعده ال يعطي الفيروس أي اصابة ‪.‬‬
‫* فعند درجة معينة من التخفيف بالماء او المحلول المنظم تصبح االصابة‬
‫متعذرة وذلك نتيجة لقلة عدد جزيئات الفيروس التى تدخل الخلية‬
‫وتحدث العدوى‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫‪ -1‬استخالص العصير الفيروسي‪.‬‬
‫‪ -2‬عمل سلسلة من التخفيفات للعصير باستخدام المحلول المنظم حيث‬
‫ينقل ‪1‬مل من العصير باستخدام الماصة الى انبوبة تحتوي على ‪9‬مل‬
‫من المحلول المنظم وتخلط جيدا وبذلك يكون التخفيف (‪)10:1‬‬
‫‪ -3‬بواسطة ماصة ثانية ننقل ‪1‬مل من االنبوبة السابقة المخففة الى انبوبة‬
‫تحتوى على ‪9‬مل من المحلول المنظم وتخلط جيدا وبذلك يكون‬
‫التخفيف (‪ )100:1‬وهكذا نستمر في عملية التخفيف حتى نصل الى‬
‫التخفيف (‪.)1000:1‬‬
‫‪ -4‬نحقن النبات ميكانيكا حيث كل تخفيف يحقن عى ورقة من ورقات‬
‫النبات العائل (داتورة)‪.‬‬
‫‪ -5‬يوضع العائل النباتي المحقون في الصوبة‪.‬‬
‫‪ -6‬تسجل النتائج في جدول مع الرسم البياني‪.‬‬
‫‪ -2‬تقدير درجة الحرارة الفاقدة لتأثير الفيروس ‪:‬‬
‫وهي عبارة عن درجة الحرارة التي اذا ما تعرض لها الفيروس لمدة‬
‫عشر دقائق فقد تأثيره على احداث االصابة‪.‬‬
‫* لوحظ ان درجة الحرارة المثبطة لكثير من الفيروسات النبات التي‬
‫تنتقل بالحقن الميكانيكي تقع عند درجة الحرارة بين (‪)75-55‬‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫‪ -1‬يتم تحضير عصير الفيروس كما سبق‪.‬‬
‫‪ -2‬بواسطة الماصة ينقل‪2‬مل من العصير في‪3‬مل انابيب اختبار‪.‬‬
‫‪ -3‬تسخن الحمامات المائية وتضبط درجة الحرارة (‪.)90-70-30‬‬
‫‪ -4‬توضع كل انبوبة في حمام مائي ويالحظ ان يكون سطح العصير في‬
‫االنبوبة منخفض عن سطح الماء في الحمام المائي في الحمام المائي‪.‬‬
‫‪ -5‬تترك االنابيب لمدة عشر دقائق وبعد هذا الزمن ترفع االنابيب‬
‫مباشرة وتبرد‪.‬‬
‫‪ -6‬تحقن اوراق النبات العائل (داتورة)‪.‬‬
‫‪ -7‬يوضع العائل النباتي المحقون في الصوبة‪.‬‬
‫‪ -8‬تسجل النتائج في جدول مع الرسم البياني‪.‬‬
‫‪ -3‬تقدير مدة بقاء الفيروس نشطا‪-:‬‬
‫وهي اطول فترة زمنية الذى يظل عندها العصير المصاب معديا عند‬
‫حفظه في درجة حرارة المعمل العادية‪.‬‬
‫* فبعض الفيروسات تحتفظ بنشاطها في العصير اذا ما حفظ في المعمل‬
‫لمدة عام او اكثر‪ ,‬بينما يفقد البعض القدرة على العدوى اذا ما حفظ‬
‫لقليل من الساعات او الدقائق‪ ,‬وترجع هذه الخالفات الى حساسية‬
‫الفيروس لعوامل االكسدة‪.‬‬
‫طريقة العمل‪-:‬‬
‫‪ -1‬يتم تحضير عصير الفيروس كما سبق‪- .‬‬
‫‪ -2‬يوضع العصير في انبوبة ثم يضاف له بضع نقط من الكلورفورم‪.‬‬
‫‪ -3‬بعد تحضير العصير مباشرة يحقن العائل من العصير المصاب ‪ ,‬ثم‬
‫بعد ‪ 24‬ساعة‪ ,‬ثم ‪ 72‬ساعة ‪,‬ثم بعد ‪ 120‬ساعة‪.‬‬
‫‪ -4‬يوضع العائل في الصوبة ثم تدون النتيجة‪.‬‬