Transcript UniCAP

알레르기 진단을 위한 UniCAP 검사 소개
이원의료재단 학술부
OH-1
- Uppsala, Sweden
1972:
Phadebas® IgE Test
세계 최초 알레르기 in vitro test
1974:
Phadebas RAST®
세계 최초 specific IgE test
1995:
UniCAP® 100
완전 자동화된 specific IgE test 소개
 전세계 50개국 4000개 이상의 검사실에서 사용. 10개 중
7개의
알레르기 검사는 UniCAP으로 검사가 이루어 짐.
 FDA 규정에 부합한 ISO 9001 인증 획득, GMP 기준 적합
인증
 WHO가 인정한 유일한 specific IgE 정량 검사법
OH-2
UniCAP®100 / Pharmacia CAP System™ FEIA
 시약 분주에서 정보처리까지 전과정 자
동화
 3시간 이내 결과 자동 프린트
•
처리시간: 2시간 45분 / run
•
처리속도: 48 tests / run
•
Sample volume: 40 µl/test
•
Method: 4가지 서로 다른 test를 동시
가능
- Quantitative IgE blood test
OH-3
검사 항목
<Immunoglobulin E>
1. UniCAP Specific IgE
Specific IgE는 특정 항원에 대한 알레르기 감작 반응의 결과로 혈액에 생성되며 항원에
노출될수록 증가.
사람의 혈청에 존재하는 특이 항원에 관한 IgE 항체 profile을 조사함으로써 환자의 알레
르기를 일으키는
원인물질 규명
- 진단 : 최선의 치료를 위해 환자의 알레르기를 유발하는 항원 수치 측정
- 예측 : 증상의 유무와 관계없이 IgE 수치로 알레르기 발병 예측 가능
- 모니터링 : 현재 적절한 치료를 받고 있는지 환자 상태 모니터링
2. UniCAP Total IgE
: 사람의 혈청 내에 존재하는 총 IgE 농도 측정
- 인체에 순환하는 총 IgE 농도는 대개 알레르기와 연관되어 있음
OH-4
- 환자의 아토피 상태에 대한 개요 제공
Solid phase: ImmunoCAP™
ImmunoCAP
Solid phase
OH-5
1
50
150
Tube
passive coating
Paper disc
activated
Cellulose foam
activated
•3-dimensional cellulose polymer
•Covalent coupling through
CNBr-activation
L. Sevéus & A. Sandell, 1992
Calibration
17000
15300
WHO Reference
UniCAP®

Response (RU)
13600
WHO Standard
CAP은 Human serum IgE의 75/502
11900
WHO Standard에 대하여 보정된 표준화
10200
된
8500
정량적 결과 제공
6800

5100
IgE 측정 단위
1U = 2.42ng
3400
1700
0
0.35 0.7
3.5
17.5 50 100
IgE (kU/L)
OH-6
U. Bohman, 1998
Quantitation gives additional information
Increased concentration of IgE antibodies
= Increased probability of clinical symptoms
kUA/L
0.35
0.7
3.5
17.5
50.0
100
>100
Increasing concentration of specific IgE antibodies
OH-7
ImmunoCAP의 측정 원리
- 환자의 혈액 내 IgE와 ImmunoCAP의 allergen이 반응
ImmunoCAP의 cellulose foam에 Allergen 성분이 코팅
혈청중의 IgE가 Allergen과 결합, Conjugate 첨가 시
Enzyme Anti-IgE가 IgE와 결합
Fluorogenic Substrate와 Enzyme이 반응하여 형광물질 형성,
형광 Response값 측정 후 Standard curve로 농도를 계산
U. Bohman, 1998
OH-8
Reproducibility of UniCAP® results during one year
Evaluation of UniCAP 100 for in vitro Allergy Diagnosis
12
10
kUA/L
8
6
4
2
d1
0
1
5
9
13
17
21
25
29
33
37
41
d2
45
e1
49
53
e5
57
Assay run number
Result plots of IgE antibodies to d1, d2, e1 and e5 obtained during one
year comprising 60 UniCAP 100 assay runs.
OH-9
Reference: Liappis N et al., Clin Lab 1999; 45: 229-235
Retesting sera from 1987 with UniCAP100 in 1995
R =0.96 PW Ewan
UniCAPkUA /L
1995
y = 0.32 + 1.12x
100
10
1
.1
.1
1
10
Pharmacia CAP System
kUA/L
100
1987
Correlation of concentrations of allergen-specific IgE measured in Pharmacia CAP System in
1987 and in UniCAP in 1995 by retesting of the same serum samples after storage at -20 °C
OH-10
Paganelli R et al. Specific IgE antibodies in the diagnosis of atopic disease. Clinical evaluation
of a new in vitro test system, UniCAP®, in six European clinics. Allergy 1998; 53: 763-768
The conventional way to present
clinical validity
Sensitivity
Specificity
Dr’s conclusion
Positive
Negative
Total
89%
91%
UniCAP® Specific IgE
Positive Negative
Total
1121
144
1265
360
3545
3905
1481
3689
5170
The clinical performance of UniCAP Specific IgE was documented in clinical trials in six
countries, Italy, Spain, Germany, The Netherlands, Sweden and Great Britain, on 894
patients with unspected allergy.
Clinical sensitivity and sensitivity were calculated as agreement between the test result
and a specialist diagnosis based on the established diagnostic routines of the clinic.
OH-11
Paganelli R et al., Allergy 1998; 53: 763-8
Probability for clinical symptoms
Doctor’s conclusion of allergy vs. IgE antibody value
100
90
80
Probability
70
60
50
Mite
Cat
Dog
40
30
20
10
0
0.35
0.7
3.5
17.5
IgE antibody concentration (kUA/L)
OH-12
Adapted from Paganelli R et al., Allergy 1998;53:763-8
by Ahlstedt S, Clin Exp Allergy 2002;32:11-16
50
100
Levels of IgE antibodies
- as suggested decision levels for challenge
95% Probability of positive reaction
50.0
Egg
40.0
Milk
Peanut
Fish
32.0
30.0
20.0
kUA/L
20.0
15.0
15.0
10.0
6.0
5.0
5.0
1.0
0.6
0.35
Neg
1.0
0.6
Egg
Milk
Fish
90% Probability of negative reaction
Children with severe atopic dermatitis, mean age 5.2 years,
median tot IgE 3000 kU/L
OH-13
Reference: Calculated from Sampson and Ho, J Allergy Clin Immunol 1997; 100: 444-51
User List
OH-14
1.
삼성서울병원
17.
마산삼성병원
33.
김해연합소아과
2.
서울대학병원
18.
훈과윤소아과
34.
영남대병원
3.
신촌세브란스병원
19.
부천성가병원
35.
분당서울대병원
4.
중대용산병원
20.
동아대병원
36.
대전을지병원
5.
인천길병원
21.
광주보훈병원
37.
단국대천안병원
6.
경북대병원
22.
메리놀병원
38.
일신기독병원
7.
성분도병원
23.
소화아동병원
39.
우리들내과
8.
서울아산병원
24.
전북대병원
40.
노원을지병원
9.
강남성심병원
25.
전남대병원
41.
경희의료원
10.
인하대병원
26.
일산백병원
42.
상계백병원
11.
강남성모병원
27.
강릉동인병원
43.
엠디그린소아과
12.
강남차병원
28.
고대안암병원
44.
고대안산병원
13.
충북대병원
29.
대구파티마병원
45.
일산의료보험공단
14.
충남대병원
30.
서울순천향대병원
46.
구미순천향병원
15.
이대목동병원
31.
부천순천향대병원
47.
광주기독병원
16.
아주대병원
32.
원주기독병원
48.
삼성제일병원…