Transcript Mara Seguso (Padova)

THE NEW HELIOS PLATFORM: EVALUATION OF
ANTINUCLEAR ANTIBODIES (ANA) AND ANTI
NEUTROPHIL
CYTOPLASMIC ANTIBODIES (ANCA)
M. Seguso
U.O.C. Medicina di Laboratorio,
Az. Osp. -Università degli Studi, Padova
ANA E ANCA
La determinazione degli anticorpi anti nucleo (ANA) e degli
anticorpi anti citoplasma dei neutrofili (ANCA) è un marker per
la diagnosi di malattie autoimmuni sistemiche o organo
specifiche e per le vasculiti rispettivamente.
Gli ANA si riscontrano anche in soggetti con infezioni o in
soggetti sani.
Gli ANCA si riscontrano anche in alcune malattie autoimmuni e
nella discriminazione tra Morbo di Crohn e Colite Ulcerosa.
ANA E ANCA
Il metodo gold standard per la determinazione di questi
anticorpi è l’Immunofluorescenza Indiretta (IIF)
ANA
ANCA
IMMUNOFLUORESCENZA
INDIRETTA
Però:
 Soggettività dei risultati
 Effetto di Photobleaching
 Necessità di un operatore esperto
Mancata standardizzazione dei risultati e alta variabilità intered intra-laboratorio
STANDARDIZZAZIONE: COME?
AUTOMAZIONE PROCEDURE
Lettura al
microscopio
Preparazione dei
substrati e dei vetrini
Acquisizione digitale
delle immagini
SCOPO
CONFRONTARE LA NUOVA PIATTAFORMA HELIOS
(AESKU DIAGNOSTIC, WENDELSHEIM,
GERMANIA) CON IL METODO DI IIF NELLO
SCREENING (POSITIVI/NEGATIVI) DI ANTICORPI
ANTI NUCLEO (ANA) E DI ANTICORPI ANTI
CITOPLASMA DEI NEUTROFILI (ANCA)
HELIOS

SISTEMA
COMPATTO
(processatore IIF e
microscopio a
fluorescenza)

LETTORE DI
BARCODE (sia per i
campioni che per i
vetrini)
ANA
724
CAMPIONI
ANA
IIF
Manuale
Helios
Negativi
Positivi
Mancata
identificazione
Negativi
382
372
8
2
Basso
titolo
168
58
105
5
Positivi
174
27
143
4
Tot.
724
724
SENSIBILITA’ 86%
SPECIFICITA’ 96%
ANA
I RISULTATI DISCREPANTI SI VERIFICANO
SOPRATTUTTO PER I CAMPIONI A BASSO TITOLO
POSSONO ESSERE DOVUTI A:



DIVERSO SUBSTRATO
DIVERSO CONIUGATO
SCELTA DEL CUT-OFF
ANCA
141
CAMPIONI
MPO
PR3
ANCA
IIF
Manuale
Helios
Negativi
Positivi
Negativi
48
38
10
Positivi
93
9
84
Tot.
141
SENSIBILITA’ 90%
SPECIFICITA’ 81%
141
ANCA
FEIA
(MPO,
PR3)
Helios
Negativi
Positivi
Negativi
67
38
29
Positivi
74
8
66
Tot.
141
SENSIBILITA’ 70%
SPECIFICITA’ 83%
141
CONCLUSIONI

IL SISTEMA HELIOS MOSTRA UN’ALTA CAPACITA’
DI DISCRIMINARE POSITIVO/NEGATIVO

PUO’ RIDURRE LA VARIABILITA’ INTRA- ED
INTERLABORATORIO.

PU0’ ESSERE UN VALIDO AIUTO NELLO SNELLIRE
IL LAVORO IN LABORATORI CON UN ALTO
FLUSSO DI CAMPIONI