LUCY TORRES PEDRO LLANOS EDNA SANDOVAL Reino: plantae División: magnoliophyta (plantas con flor) Clase: liliopsida (monocotiledóneas) Orden: cyperales Familia: poaceae (gramínea) Género: zea Especie: mays Subespecie: mays. (Conabio, 2009; Fenalce, 2009; Infoagro,
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LUCY TORRES PEDRO LLANOS EDNA SANDOVAL Reino: plantae División: magnoliophyta (plantas con flor) Clase: liliopsida (monocotiledóneas) Orden: cyperales Familia: poaceae (gramínea) Género: zea Especie: mays Subespecie: mays. (Conabio, 2009; Fenalce, 2009; Infoagro, 2009) Fuente: http://www.inforpressca.comconcepcionchiquirichapaimagenmaiz1.jpg Pueden medir de 1 a 3 m de altura según su especie. Hojas alternas, largas, planas y puntiagudas. Tallos alargado, rectos, cilíndrico y huecos. Cada hoja parte de un nudo, entre los nudos el tallo es blanco o verde claro. Condiciones de Crecimiento del Maíz Temperatura óptima: 25 a 30ºC pH del suelo: 6 a 7 Humedad relativa 50-60% Fuente: http://www.ucba.udg.mx/sitiosinteres/coaxican/categorias/vero_c olor_archivos/image017.jpg Fuente: http://www.idbdocs.iadb.org/wsdocs/getdocument.aspx?docnum=542159 Rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal. Bacilos gruesos, ligeramente curvos o rectos Gram negativos en cultivos jóvenes, y Gram variables en cultivos con más tiempo de crecimiento. Microaerofílicas, Temperatura óptima entre 34 y 37 °C. Favorecen el engrosamiento y elongación de las raíces. Aislamiento en Agar Rojo Congo Ácido Málico. Fuente: Autor Bacteria fijadora de nitrógeno de forma libre, predomina en la rizosfera. Bacterias aerobias Gram negativas, pleomórficas, variando su morfología desde Bacilos hasta células en forma de cocos. Productor de fitohormonas, sideróforos y sustancias antifúngicas Aislamiento en Agar Ashby Fuente: Autor OBJETIVO GENERAL Evaluar In vivo y Determinar In vitro el efecto de asociados a FERTIBOM- NITRO en plantas de maíz. Azotobacter sp y Azospirillum sp OBJETIVOS ESPECÍFICOS Determinar la variabilidad de factores fenotípicos en las plantas de maíz a diferentes concentraciones de fertilizante e inoculo. Determinar el comportamiento poblacional de Azotobacter sp y Azospirillum sp en “Fertibom nitro” y “Fertibom” al final del cultivo. Evaluar el efecto de los microorganismos fijadores de nitrógeno sobre el porcentaje de nitrógeno total en las hojas al cabo de 87 días. Evaluar el efecto de los productos comerciales “Fertibom y Fertibom nitro” sobre el porcentaje de nitrógeno total en las hojas al cabo de 87 días. Determinar el efecto de diferentes tratamientos sobre la cantidad de nitrógeno foliar obtenido en el cultivo de maíz. EVALUACION IN VIVO GERMINACIÓN DE SEMILLA PREPARACIÓN DE LOS TRATAMIENTOS Fuente: Autor •Largo de Raíz •Altura de tallo •Numero de hojas A •Ancho de hojas •Diámetro de tallo B Fuente: Autor A B C Fuente: Autor El porcentaje de nitrógeno total foliar es tomado del material seco de las hojas las cuales se llevaron al área de análisis químico del Laboratorio Doctor Calderón. El método utilizado para este análisis es el de Micro-Kjeldhal mediante una digestión del tejido vegetal con H2SO4 concentrado, utilizando como catalizador una mezcla de Sulfato de Cobre, Sulfato de Sodio anhidro, Yeso y Caolín para controlar la espuma y la temperatura de ebullición. Se mezcló 10 g de suelo en 90 ml de agua Peptonada 0.1% de cada tratamiento. se realizo diluciones en una proporción 1:10 hasta 10-6 , a partir de la dilución 10-3 se tomo 0.1 ml sobre Agar Rojo Congo Acido Málico Se incubo a 35 ±2°C, durante 48 horas. Recuento entre formadoras 30-300 unidades se incubo a 28 ±2°C, durante 48 horas. Se realiza recuento entre 30-300 unidades formadoras de colonias visualizando colonias brillantes, mucosas, opacas, Luego se realizó tinción de Gram para ratificar la presencia de Azotobacter sp. RECUENTO INICIAL PRODUCTOS ANALISIS Recuento de FERTIBOM FERTIBOM-NITRO 13x106 Ufc/ g 2x105 Ufc/ g 16x106 Ufc/ g <10 Ufc/ g Azotobacter sp Recuento de Azospirillum sp PORCENTAJE DE GERMINACIÓN Superior al 70% Cuadros rojos son las mayores alturas. Cuadros amarillos son las bajas alturas. Formación de la espícula (inflorescencia masculina ) Grafica: comparación de crecimiento. Entre mayor FERTIBOM NITRO mayor altura. Fotografía 6. Tratamiento 3 planta más alta frente a testigo 3. Se hace una comparación entre TS3 (3gr FN) y TS7 (3grF) Varación no solo en la altura Pigmentación de hojas. Clorosis las Fotografía 8: Clorosis Presente en FERTIBOM La relación que se obtiene entre el ancho de hoja y el numero de ellas es importante, pues puede existir la posibilidad que haya poco numero de hojas, pero estas sean anchas lo suficiente para llevar a cabo la fotosíntesis TRATAMIENTO ALTURA (cms) DIAMETRO (cms) T2 (2gr FN-1ml inoculo) 158.5 1,1 T11 (2gr F-1ml inoculo) 106 1,3 T7 (1gr FN-3ml inoculo) 125,5 1,2 T16 (1gr F-3ml inoculo) 151 1 T2 aumento en altura y disminuyo diámetro mientras T11 disminuyo altura y aumento diámetro, T7 disminuyo altura aumento diámetro y T16 aumento altura disminuyo en diámetro TRATAMIENTO PESO SECO PESO FRESCO % HUMEDAD % S TOTAL (gr) TOTAL (gr) T3 (3gr FN-1ml 31,4 297,35 68,6 10,56 17,7 178 82,3 9,94 6,4 145 93,6 4,41 RENDIMIENTO Inoculo) T13 (1grF-2ml inoculo) TS4 (SIN fertilizante, ni inoculo) Factores que alteran el rendimiento: condiciones ambientales, el pH del suelo, la disponibilidad de agua, y la intensidad lumínica entre otros. El trabajo experimental fue llevado a cabo en una temporada donde la luminosidad tenia cambios muy drásticos desde días muy calurosos hasta días totalmente nublados. Los niveles de nitrógeno son deficientes, encontrándose en un rango de 0.82-1.39 %, esto pudo deberse a que el análisis se realizó a los 87 días de crecimiento en donde las plantas empezaban su etapa de floración y los mayores contenidos de nitrógeno en las plantas se encuentran en los tejidos jóvenes además que se mezclaron todas las hojas. A= Cantidad de N foliar en Peso seco de cada tratamiento (gr)= (Peso Seco Hojas X % Nitrógeno Total Foliar)/100 B= Aporte de Nitrógeno mediante fertilizante= (FN ó F aportado 1,2 y 3 gr (varía según tratamiento) X 0.05gr N en FN (varía según tratamiento)) Los tratamientos con FERTIBOM, se ven beneficiados a nivel de crecimiento microbiano comparado con los tratamientos con FERTIBOMNITRO. Aunque el recuento sea menor, la actividad microbiana se mantiene y en una proporción que no es del todo desfavorable. Se evaluó el efecto que tienen las diferentes dosis de inoculo asociado a fertilizantes, sobre variables fenotípicas, rendimiento, porcentaje de nitrógeno total foliar hallado, y cantidad de nitrógeno obtenido en plantas de maíz en condiciones de invernadero. Las plantas con mayor altura se presentaron con 3 gr FN y con 1 ml de inoculo. Para el caso de Fertibom, requieren más inoculo 3ml y menor valor de FERTIBOM 1 gr. En el caso del número de hojas, diámetro de tallo, ancho de hojas y abundancia radicular, El tratamiento T3 de FERTIBOM NITRO obtuvo mejores resultados en estos parámetros fenotípicos, comprobando su acción al compararlo con los testigos. Es decir para estos parámetros funciono el conjunto de fertilizante nitrogenado + inoculo. Los rendimientos obtenidos en tratamientos con FERTIBOM NITRO, son superiores en la medida que se mantenga 1 ml de inoculo; por otro lado, los tratamientos con FERTIBOM requieren de 2ml de inoculo para obtener los mejores rendimientos. Respecto a los testigos tanto de FERTIBOM como FERTIBOM NITRO él % rendimiento aumenta en la medida que aumenta la cantidad de fertilizante añadido. El testigo absoluto presento un bajo rendimiento, confirmando que tanto los fertilizantes como la adición de microorganismos influyen en gran proporción en el aumento en el rendimiento de maíz. La dosis ideal de Fertibom nitro para el desarrollo general de la planta en aproximadamente 87dias bajo condiciones de invernadero es de 3 gr de FERTIBOM-NITRO y 1 ml de inoculo correspondiente al tratamiento T3. Se llego a la conclusión de nitrógeno total obtenido, mas no se logro obtener un dato preciso de fijación biológica de nitrógeno, debido al requerimiento de análisis más específicos para lograrlo (técnica de isotopos) Se llego a la conclusión que los microorganismos trabajados en este ensayo no solo presentaron actividad para obtener nitrógeno, sino también se evidenciaron sus otras funciones en la planta como fue la promoción de crecimiento. Se encontró en el caso de FERTIBOM un mejor comportamiento en cuanto al nitrógeno obtenido, a diferencia de FERTIBOM NITRO, el cual presento menores valores, SIN EMBARGO se obtuvo nitrógeno adicional al aportado por el fertilizante. En el caso de FERTIBOM NITRO, se observó a parte de incremento en el nitrógeno foliar, otros factores de gran importancia como crecimiento general de la planta, mayor diámetro de hojas, área radical más gruesa, lo cual se le atribuye a la acción diversa de los microorganismo trabajados en este ensayo. Antes de la aplicación de los microorganismos se puede incorporar a la metodología el método de reducción de acetileno para determinar la capacidad de fijación del microorganismo antes de su inoculación. Las dosis recomendada para aumentar las variables fenotípicas con FERTIBOM –NITRO para este ensayo es de 3gr FN + 1 ml Inoculo por kilo de suelo. Cuando se realice un cultivo en este caso de maíz, se deben mantener las condiciones de humedad y luz de manera homogénea ya que en este proyecto se puede observar, que esto afectó un poco en las replicas. A pesar de que en experimento se cambiaron de lugar. Dependiendo del tiempo que se tenga presupuestado para el crecimiento de las plantas, es necesario evaluar el tamaño de las materas, pues el crecimiento exuberante de las raíces a los 87 días de crecimiento no permitió la lectura debido a la compactación del suelo. Realizar análisis de nitrógeno al cultivo por lo menos dos veces durante su crecimiento, pues esto ayuda a determinar si realmente la planta está absorbiendo el nitrógeno suministrado o se pierde gran cantidad. Considerar la posibilidad de adicionar al Fertibom inoculo de microorganismos fijadores de nitrógeno. Atlas R, Bartha R. Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental pg 411-424.2005 Bolletta A, Venanzi S, Krüger H. Respuestas Del Cultivo De Trigo A La Inoculación Con Biofertilizantes Buenos Aires. 2002 pp 1 Borda, D. Producción de un biofertilizante a partir de un aislamiento de Azotobacter nigricans obtenido en un cultivo 2009; 14: 2p Carcaño MC, Ferrera R; Pérez J, Molina J.; Bashan Y. Actividad nitrogenasa, producción de fitohormonas, sideróforos y antibiosis en cepas de Azospirillum México., 2006 (24):4 pp. 493-502