Transcript Protocole de prélèvement pour dosage du pyruvate

PROTOCOLE DE PRELEVEMENT
POUR LES DEMANDES DE
PYRUVATE PLASMATIQUE OU DE
RATIO LACTATE/PYRUVATE
PLASMATIQUE
BGM PREA 0042 A
Date application
Page 1/4
Mode opératoire
I.
OBJECTIF
Ce protocole concerne l'ensemble des services cliniques, à l'exception des services de pédiatrie ("points
redox", protocole particulier déjà mis en place) et du service d'exploration fonctionnelle ("test à l'effort",
protocole actuel toujours en vigueur)
Ce type d'analyse nécessite un délai de déprotéinisation < 5 min.
Avant prélèvement, il convient de contacter le service de Biochimie et Génétique Moléculaire (cf VI.) pour
obtenir les tubes particuliers nécessaires à la déprotéinisation.
II.
DESCRIPTION
Mettre des gants nitrile (gants violets) pour réaliser les manipulations suivantes.
Prélever du sang capillaire ou veineux (sans garrot) dans un tube d’héparinate de lithium (bouchon
vert clair) : volume optimal 4.5 – 5 mL. Coller une étiquette patient sur le tube hépariné prélevé.
1- Déprotéinisation :
• Sortir du réfrigérateur un tube servant à la déprotéinisation, contenant 3.5 mL d’acide perchlorique 1 M
(tube falcon de 15 mL fourni par le laboratoire et conserver à +4°C dans le service),
• Vérifier le volume d'acide perchlorique du tube utilisé qui doit être de 3.5 mL (tube gradué)
• Retirer le bouchon de ce tube falcon
• Ouvrir le bouchon du tube de sang
• Prélever du sang avec une seringue (volume conseillé ≈ 4mL)
• Placer la seringue sur le bord du tube servant à la déprotéinisation puis ajouter le sang lentement
dans le tube. Il est impératif de rajouter le sang jusqu'à la graduation 7 mL du tube (soit un
volume de sang nécessaire de 3.5 mL).
• S'il reste du sang dans la seringue, le remettre dans le tube de sang initial
• Remettre le bouchon du tube falcon et s'assurer que ce tube est bien hermétiquement fermé
• Agiter violemment ce tube falcon de déprotéinisation, puis le mettre dans la glace
• Etiqueter impérativement le tube de déprotéinisation avec les étiquettes du patient
Tube de 15 mL
fourni par le
laboratoire et
devant être
conservé à +4°C
dans le service
Sang à rajouter à l’aide d’une seringue
jusqu'à la graduation 7mL (soit 3.5 mL de sang)
Acide perchlorique 1 M (3.5 mL)
2- Gestion du restant de sang du tube hépariné
Il peut être soit éliminé si seules ces analyses sont nécessaires, soit il peut être utilisé pour tout autre
analyse s'effectuant sur un tube d'héparinate de lithium.
Le tube falcon (± le restant de sang du tube hépariné en fonction des besoins) doit ensuite être acheminés
rapidement au laboratoire dans la glace ; Délai d'acheminement recommandé : <1 heure
PROTOCOLE DE PRELEVEMENT
POUR LES DEMANDES DE
PYRUVATE PLASMATIQUE OU DE
RATIO LACTATE/PYRUVATE
PLASMATIQUE
BGM PREA 0042 A
Date application
Page 2/4
Mode opératoire
I.
Représentation schématique de l'ensemble du protocole
Ouvrir le
bouchon
Prendre 3.5 mL de sang à
l’aide d’une seringue
Boucher le tube
Fermer le bouchon
Agiter violemment
Acheminer au laboratoire
en cas de besoin en
respectant les conditions
spécifiques des analyses
demandées
Mettre le tube dans la
glace et l'acheminer
rapidement au
laboratoire
NB : Vérifier que les tubes soient bien étiquetés.
II.
Conduite à tenir dans certains cas particuliers
•
Volume d'acide perchlorique > 3.5 mL ou < 3.5 mL (perte d'acide lors de l'ouverture du tube ou erreur
du laboratoire) : Ne pas utiliser le tube, le jeter et en prendre un autre.
•
En cas de patient difficile à prélever : téléphoner au laboratoire qui pourra alors fournir des tubes
contenant un volume inférieur d'acide perchlorique. Il faudra alors remplir ce tube spécifique avec un
volume de sang équivalent à celui de l'acide perchlorique utilisé.
PROTOCOLE DE PRELEVEMENT
POUR LES DEMANDES DE
PYRUVATE PLASMATIQUE OU DE
RATIO LACTATE/PYRUVATE
PLASMATIQUE
BGM PREA 0042 A
Date application
Page 3/4
Mode opératoire
III.
Photos des tubes servant à la déprotéinisation, fournis par le laboratoire
IV.
Mode de conservation des tubes servant à la déprotéinisation
Ces tubes doivent impérativement être stockés au réfrigérateur entre 2 et 8°C. Ils doivent être sortis
juste avant utilisation.
Conservé dans ces conditions, l'acide perchlorique est stable pendant 6 mois. La date de péremption de
chaque tube est indiqué sur l'étiquette de ce tube.
V.
Contact
En cas de besoin de tubes, de renseignements, contacter le secteur Maladies Métaboliques du laboratoire
de Biochimie et Génétique Moléculaire aux numéros suivants :
N° du secteur Maladies Métaboliques : 51182
N° du biologiste responsable du secteur (Yannick Tholance) : 52154
PROTOCOLE DE PRELEVEMENT
POUR LES DEMANDES DE
PYRUVATE PLASMATIQUE OU DE
RATIO LACTATE/PYRUVATE
PLASMATIQUE
BGM PREA 0042 A
Date application
Page 4/4
Mode opératoire
REDACTEUR
Nom
YANNICK THOLANCE
Fonction
AHU
VERIFICATEURS
FLORENCE HUBLET
TECHNICIENNE DE
LABORATOIRE
APPROBATEUR
MARIE AGNES COSTA
YANNICK THOLANCE
PH
AHU
Date
Signature
Le présent document a été signé par l’intermédiaire du logiciel QUALIMS DOC (la date de signature en
témoigne). Toute impression papier est considérée comme un document de travail et la personne à
l’origine de cette impression est tenue comme seule responsable de l’utilisation qui en est faite.
III.
DIFFUSION
Interne : Renseignée dans le logiciel QUALIMS DOC.
Externe : Cf. l’enregistrement PBH QUA 0010 « Attestation de diffusion externe de documents »