Transcript 5-FU

HDRA （組織培養法抗癌剤感受性検
査）
ーHistoculture Drug Response Assayー
株式会社 エスアールエル
2005.5.1
HDRA 検査方法
ｺﾗｰｹﾞﾝｹﾞﾙ
腫瘍組織(約10mg)
重量測定
HBSS
20％ FCS RPMI 1640
+ 抗癌剤
2mm 角に細切
MMC
CDDP
腫瘍組織
7日間培養
MTT 試薬
培養状態
確認用
癌細胞の確認
（薬剤なし）
薬剤未添加
5-FU
ｺﾗｹﾞﾅｰ
ｾﾞ
ADM
培地を除去
16時間反応
DMSO 添加
吸光度測定
540nm (対照 630nm)
抽出
検査結果：
Inhibition Index (%) = (1 – 薬剤添加群の吸光度/薬剤非添加群の吸光度）× 100
MTT-ﾎﾙﾏｻﾞﾝが産生した組織
胃癌，大腸癌，乳癌の判定可能率
胃 癌
判定可能数（率）
判 定 不 能 数
71（89.9％）
8
大腸癌
87（92.6％）
7
乳 癌
166
（98.8％）
2
細菌等の感染
8
6
0
吸光度の低下
0
1
2
79
94
168
合
計
尚，この中には癌細胞の含有量が少なかった検体，採取および保存状態が
悪かった検体は含まれていない．
胃・大腸癌における薬剤濃度の設定(MMC, 5-FU)
5-FU
100
100
80
80
感受性有効率(%)
感受性有効率(%)
MMC
60
40
20
0
胃癌
大腸癌
60
40
20
0
1
2
薬剤濃度（μg/ml)
100
300
薬剤濃度（μg/ml)
感受性有効率：Inhibition Index(%)が50%以上を有効とした場合の有効率
1000
胃・大腸癌における薬剤濃度の設定(ADM,
CDDP)
ADM
CDDP
80
80
感受性有効率(%)
100
感受性有効率(%)
100
60
40
20
0
胃癌
大腸癌
60
40
20
0
10 15
薬剤濃度（μg/ml)
20
10
薬剤濃度（μg/ml)
感受性有効率：Inhibition Index(%)が50%以上を有効とした場合の有効率
100
胃・大腸癌の感受性有効率
薬
剤
測定濃度
胃 癌
大腸癌
MMC
2 μg/ml
32.7 %
15.9%
5-FU
300μg/ml
20.0 %
19.7 %
ADM
15 μg/ml
11.9 %
9.6 %
CDDP
20 μg/ml
8.8 %
6.6 %
高度進行胃癌を対象とした術後化学療法と抗癌剤感受性試験 (prospective study)
高感受性群
高度進行・再発胃癌
高感受性薬剤投与
生存比較
HDRA
抗癌剤無投与
低感受性薬剤投与
低感受性群
高感受性群(=13, MST=10.6ヶ月）
低感受性群(n=11, MST=5.5ヶ月）
1.0
高感受性群(n=12, MST=5.7ヶ月）
低感受性群(n=11, MST=1.9ヶ月）
1.0
p=0.09(LR)
p=0.02(GW)
生存率
生存率
p＝0.02（LR)
p＝0.01（GW)
0.5
0.5
0
0
0
6
12
経過（月）
術後生存期間
18
24
0
6
12
18
24
経過（月）
術後在宅生存期間
LR: loglank test
GW: general Wilcoxon test
国立病院東京医療センター外科
乳癌における判定基準の設定 (MMC, 5-FU)
5-FU (300μg/ml)
100
100
80
80
60
40
20
感受性有効率(%)
感受性有効率(%)
MMC (2μg/ml)
原発
再発
原発
47.6%
再発
15.0%
60
40
原発 33.9%
20
再発
14.3%
0
0
20
40
60
Inhibition Index（％）
80
100
20
40
60
Inhibition Index（％）
感受性有効率：Inhibition Index(%)が50%以上を有効とした場合の有効率
80
100
乳癌における判定基準の設定 (ADM, CDDP)
原発
再発
CDDP (20μg/ml)
ADM (15μg/ml)
100
100
80
感受性有効率(%)
感受性有効率(%)
80
原発 60.2%
60
40
再発 31.8%
20
60
40
20
原発
24.6%
再発
8.7%
0
0
20
40
60
Inhibition Index（％）
80
100
20
40
60
Inhibition Index（％）
感受性有効率：Inhibition Index(%)が50%以上を有効とした場合の有効率
80
100
乳癌の感受性有効率
薬 剤
濃 度
判定基準
HDRA 有効率
原発腫瘍
再発腫瘍
2 μg/ml
70% 47.7%(51/107)
15.0%(3/20)
5-FU 300 μg/ml
60% 33.9%(40/118)
14.3%(3/21)
ADM
15 μg/ml
31.8%(7/22)
DDP
20 μg/ml
60% 60.2%(74/123
50% )24.6%(29/118)
MMC
8.7%(2/23)
乳癌症例におけるHDRA検査の臨床効果予測性
（retrospective)
HDRA検査結果(I.I.%)
症例
治療薬剤
臨床効果 相関
MMC
5-FU
ADM
CDDP
3
4
5
67.8
72.1
81.3
76.1
65.6
56.9
35.0
70.5
63.4
35.4
73.4
64.1
40.1
78.2
70.1
21.5
31.9
67.0
34.8
9.0
CEF，CTF
MMC+CPA+EPI
CAF
CAF
CAF
CR
PR
PR
PR
PR
TP
TP
TP
TP
TP
6
7
61.9
75.6
64.8
46.3
63.1
66.6
ＮＤ
25.4
5-FU+CDDP
MMC, CTF
NC
PD
FP
FP
8
9
10
11
57.8
50.1
61.9
57.9
54.5
26.1
64.8
ND
27.3
35.5
63.0
25.3
21.4
15.3
ND
42.6
CMF
5-FU+CDDP
MMC
CAF
PD
PD
PD
PD
TN
TN
TN
TN
1
2
ピンク字はHDRAにて「有効」と判定された薬剤，下線は治療に使用した薬剤，
NDはno dataを示す．また，EPIはADMと同等として評価した．
予測率：
81.8％
真陽性率：
71.4％
(化学療法有効
率：
45.5%)
真陰性率：
100％
HDRAの特徴
１．In vivo に近い三次元組織培養法を採用
２．高い判定可能率（90%以上）
３．臨床との相関が良好
４．時間依存性薬剤も評価可能
５．非増殖期の腫瘍細胞の評価も可能
６．従来と比較して少量の検体で検査可能
HDRA検査検体提出方法
検体の予約
資材のお届け
検体の採取
検体の保存
検体の集荷
検査結果報告
貴院検査室または弊社営業所までご連絡下さい．
専用輸送容器，検査依頼書をお届けします．
輸送容器は冷蔵庫で保存ください．
・検体は滅菌生理食塩水
で洗浄後, 輸送容器に入
れて下さい．
・検体はできるだけ早く輸送容器 に入れて下さい．
・切り出し時のレーザーメスの使用はお避け下さい．
冷蔵庫（4℃）にて保存して下さい．
・ご連絡いただければ，集荷に伺います．
・採取後，48時間以内に検査に入らなければ，
viabilityが下がってしまいますのでできるだけ
早くご連絡ください．
9～15日以内にご報告いたします．
HDRA検査要項
材料
固形腫瘍（胃癌，大腸癌の原発巣，転移リンパ節，乳癌．他
癌種は要相談）．
＊ホルマリン固定および凍結検体は不可．
検体量
検査薬剤
4薬剤で1～1.5cm大（1薬剤の場合はこの半分）
正規項目：マイトマイシンC，5-フルオロウラシル，アドリアマイシン，
シスプラチン
参考値報告：イリノテカン，タキソール，エピルビシン，ピラルビシン，
シクロフォスファミド，イフォスファミド，エトポシド，カル
ボプラチン
保存方法
冷蔵（専用の輸送容器使用）．凍結は不可．
検体採取～検査開始まで48時間以内厳守．
所要日数
検体受付日から15日以内
受託可能日
月～金（土日および祝日は不可）
本検査は予約検査とさせていただきます．