TEKNIK DASAR BIOLOGI MOLEKULER

Download Report

Transcript TEKNIK DASAR BIOLOGI MOLEKULER

TEKNIK DASAR
BIOLOGI MOLEKULER
Teknik yang sering digunakan a.l :
Faga, Bakteri, Yeast / Fungi, VIRUS ?
Higher eukaryotes
KIT DNA /RNA : Sesuaikan petunjuk penggunaan dari Manufakturing
PROTOKOL
ISOLASI DNA/
RNA
Denaturasi 94oC
Anealing primer 55oC
Sintesis 72oC
72oC
Produk
dominan
Efek Hepatoprotektor, Nefroprotektor, dan Imunomodulator
Ubi jalar (Ipomoea batatas) pada Tikus Putih Jantan
(Rattus novergicus) Galur Sprague Dawley
Sarmalina et al., 2012, Laporan Hasil Penelitian
28 ekor hewan coba; dibagi 7 kelompok; satu kontrol (K).
Hari ke 7 diberi parasetamol dosis tinggi (P1), Diberi
bakteri salmonella p.o 107 cfu (P2), Ekstrak Ipomea (P3),
Ekstrak Ipomea + Salmonella (P4), Ipomea + Parasetamol
(P5-6). Hari ke 21-28. Narkose, darah intrakardiak,
Sentrifugasi serum-darah.
(Persetujuan Etikal Klirins: FK Unsri Oktober 2012)
Pengukuran serum (IL-4) Elisa, SGPT,
SGOT, Kreatinin dan Ureum dengan Kolori
meter. Analisis data anova test dengan
signifikansi p<0,05
Pengukuran:
Kadar
SGPT,
SGOT,
kreatinin dan ureum. sekresi interleukin
4 (IL-4).
Laboratorium Kes Daerah Palembang (Akreditasi Lab Pengujian)
Refference; Roller, M., Rechkemmer, G., and Watzl, G. 2004.
Bakteri, tanaman
mamalia
Gel Agarosa
Gel Poliakrilamid :
Dengan / tanpa SDS
Hubungan antara Laju migrasi
dan konformasi DNA plasmid
Sirkuler, linier, superkoil
DNA
Kromosom
Gel Poliakrilamid SDS ( vertical )
Pembentukan duplek antara dua untai
asam nukleat yang komplemen
ss DNA – ss DNA ( Southern )
ss DNA – RNA
RNA – RNA ( Northern )
Pembentukan duplek antara
PROTEIN - ANTIBODI ( Western )
UNTAI 2
UNTAI 1
DOUBLE HELIX DNA
1
2
TCCGA
CCTGA
CCCGAAT
GGACT CCCTG GGGCTTA
CCTGACCCGAATGGC
GGCTTACCGTTAAGTTCC
CCTGACCCGAATGGC
GGACTGGGCTTACCG
3
Denaturasi 94oC
Anealing primer 55oC
Sintesis 72oC