Transcript presentasi_pyruvate_carboxylase_siti_nurfajriah_20510018

 PENDAHULUAN
 MEKANISME REAKSI
 ISOLASI DAN PEMURNIAN
 DEFESIENSI PC


Pyruvate carboxylase (PC) memiliki nomor
enzim 6.4.1.1
Piruvat karboksilase adalah enzim dari kelas
ligase yang mengkatalisis karboksilasi piruvat
membentuk oksaloasetat (OAA).



PC merupakan enzim allosterik yang
diaktifkan oleh efektornya yakni Asetil-CoA
PC mengandung ion Mn2+ yang terikat kuat
dan gugus prostetik yang terikat secara
kovalen yakni biotin
PC berbentuk tetramer yang terdiri atas 4
subunit yaitu BC (biotin carboxylase), CT
(carboxytransferase), BCCP (biotin-carboxy
carrier protein), dan PT (PC tetramerization)
Pyruvate + M gA T P
2-
+ HCO3
-
M g 2+
O xaloacetate + M gA D P - + P i
Mekanisme reaksi di atas terjadi dua tahap reaksi parsial

Mekanisme Ping Pong Bi Bi Uni Uni

Mekanisme Ping Pong Bi Bi Uni Uni



PC disubklon dari Staphylococcus aureus dalam
vektor pET28a kemudian diekpresikan pada E. coli.
Sel yang mengekspresikan PC kemudian dimurnikan
dengan :
1. Pestle & Mortar (dengan N2 cair)
2. Centrifuge
3. Dialisis / Kromatografi Penukar Ion
Aktivitas PC dianalisis dengan SDS-PAGE dan
spektrofotometer Massa


Kekurangan karboksilase piruvat merupakan
gangguan bawaan yang menyebabkan asam
laktat dan senyawa beracun lainnya yang
berpotensi untuk terakumulasi dalam darah
Ada dua jenis kekurangan PC berdasarkan
tingkat keparahannya:
1. tipe 1: terjadi penumpukan asam laktat
dalam darah (asidosis laktit)
2. tipe 2 : terjadi penumpukan amonia dalam
darah (hiperamonemia)
Terima Kasih