組織免疫染色

研究部 黃欣儀 1

組織製備方法

 Paraffin embedded method  Frozen section method  Vibratome section method 2

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Perfusion

Saline PFA

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Paraffin embedded method

 石蠟包埋法是將樣本經由固定、脫水、澄清、浸蠟後 包埋在石蠟中，是製作光學顯微鏡切片的常規方法。 它有許多優點，操作簡易便於掌握，可進行連續切片， 包埋後的組織可以長期保存。  包埋過程中須使用二甲苯，並且石蠟浸潤過程中需加 熱處理。

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Frozen section method

 冷凍切片法是將樣本經由固定、抗凍脫水後包埋於冷 凍切片劑中，是製作免疫切片的常規方法。優點是抗 原保存性較佳，可切薄片，包埋後的組織可以長期保 存。缺點是操作需技術，進行連續切片困難度較石蠟 切片高。

Cryoprotection

 Protect biological tissue from freezing damage (damage due to ice formation).

 Cryoprotectants operate simply increasing the solute concentration in cells by  In order to be biologically viable Cryoprotectant must (1) easily penetrate cells, and (2) not be toxic to the cell  Common cryoprotectants:  Sucrose  DMSO (dimethyl sulfoxide)    Glycerol Ethylene glycol Propylene glycol 6

Vibratome section method

 振動切片法可針對新鮮或經過固定處 理的樣本進行切片，樣本無需冰凍， 是製作免疫切片的方法之一。優點是 無冰晶形成，也可避免脫水、澄清及 包埋對抗原的傷害，因此抗原的保存 性最佳。缺點是樣本無法長期保存， 切片染色需以漂浮法進行，而且無法 進行薄切。 7

切片方法 石蠟切片 樣本製備 繁複 樣本保存 室溫長期 冷凍切片 振動切片 簡單 簡單 冷凍長期 短暫 切片厚度 最小 3 m m 最小 10 m m 最小 20 m m 抗原保存性 最差 佳 最佳 染色難易度 操作簡便，但步驟 多 操作方便 操作需小心，但步 驟同冷凍切片 8