Transcript B - The First Scientific Conference - ENS-2013

ვარდენ ჯიჯიაშვილი
IV კურსი
გამოყენებითი ბიომეცნიერება და ბიოტექნოლოგიები
ხელმძღვანელი - პროფ. თენგიზ ცერცვაძე
ხელმძღვანელი (თსუ-დან) - ასოც. პროფ. ნინო გაჩეჩილაძე
თბილისი, 2013 წ
 B ჰეპატიტის ეპიდემიოლოგია
 დაავადებები ადამიანში
 ვირუსის სტრუქტურა
 ლაბორატორიული დიაგნოსტიკის მეთოდები
 HBsAg-ს ანტისხეულების იმუნოფერმენტული
განსაზღვრა
 პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის მეთოდი
(Real time-PCR)
 მეთოდების შედარება
 დასკვნა
 B ჰეპატიტი აღმოჩენილია მე-19 საუკუნეში
 დღესდღეობით ფართოდაა გავრცელებული
 ხშირად გვხვდება ქრონიკული ხასიათის
 Hepadna – hepa-ღვიძლი; dna-დნმ
ეპიდემიოლოგია
მწვავე და ქრონიკული B ჰეპატიტის გავრცელება
ქრონიკული B ჰეპატიტის ხვედრითი წილი ვირუსული
ჰეპატიტებით ავადობაში 2008-2010 წლებში
ქრ B
A ჰპტ
არადიფ. ჰპტ
მწ. B
მწ. C
ქრ C
21%
50%
15%
7%
3%
4%
ქრონიკული B ჰეპატიტით დაავადებულთა
ასაკობრივი სტრუქტურა საქართველოში 2008-2010
წლების მონაცემებით
350
300
250
200
ავადობის მაჩვენებელი
150
100
50
0
1 წლამდე
1-4 წელი
4-14 წელი
100 000 მოსახლე
15-19 წელი
20-29 წელი
30-59 წელი
60 წ. და მეტი
ქრონიკული B ჰეპატიტით ავადობის დინამიკა
საქართველოში
ავადობის მაჩვენებელი
40
35
30
25
20
ავადობის მაჩვენებელი
15
10
5
0
2001
2002
2003
2004
2005
443 600 მოსახლე
2006
2007
2008
2009
2010
2011
ქრონიკული B ჰეპატიტის ტერიტორიული განაწილება
საქართველოში 2008-2010 წლების მონაცემებით
1800
1542
1600
1400
1200
1080
1000
800
929
788
700
600
407
400
200
178
416
500
466
376
314
165
132
117 143
0
შემთხვევათა რაოდენობა
მოსახლეობა(1000)
208
125
51
12
7
51
პათოლოგიები
 ჰეპატოციტების
ინფიცირება
 იმუნური სისტემის
რეაგირება
 მეორადი ვირუსემია
ვირუსის სტრუქტურა
დაავადება
B ჰეპატიტი
სისტ.
კომპ.
განსაზღვრება
HBV
B ჰეპატიდის
ვირუსი
HBsAg
ზედაპირული
ანტიგენი
HBeAg
კაფსიდის ცილა
HBcAg
გულგულის
ანტიგენი
Anti-HBs
ანტისხეული (s
ანტიგენის
მიმართ)
anti-HBe
ანტისხეული (e)
anti-HBc
ანტისხეული (c)
Anti- IgM
HBc
IgMანტისხეული (c)
 HBs- უზრუნველყოფს
ადსორbციას
 HBe- რეპლიკაციის
მარკერი
 HBc- დეინის
ნაწილაკის
შუაგულშია
დიაგნოსტიკა
 სადიაგნოსტიკო მეთოდები იყოფა სკრინინგულ და
დამადასტურებელ მეთოდებად
 მეთოდები ერთმანეთისაგან განსხვავდებიან სპეციფიურობით
და მგრძნობელობით
იმუნოფერმენტული მეთოდი
 იმუნოფერმენტული
მეთოდი გამოიყენება
საკვლელვ ნიმუშში
კონკრეტული ანტისხეულის
ან ანტიგენის აღმოსაჩენად
 HBV-ს დასადგენად ყველაზე
ხშირად იკვლევენ HBsAg
Mmyarfaziani ifa, imunofluorescencia
Roche Elecsys
 ავტომატიზირებული




სისტემა
დაანგარიშებული შედეგები
მოქნილი ფუნქციები
სპეციფიურობა-98.8%
მგრძნობელობა-98.5%
აქტუალობა
 დიაგნოსტიკაში
ძირითადად
გამოიყენება
იმუნოფერმენტული
მეთოდი
 მკურნალობის
პერიოდში ვირუსის
საკონტროლოდ
მიმართავენ Real-Time
PCR მეთოდს
Real-Time PCR
 უზრუნველყოფს დნმ-ის
სამიზნე ფრაგმენტის
ამპლიფიკაციას
 შესაძლებელია
ინფექციური აგენტის
გამოვლენა
 Real Time PCR მონაცემებს გვაძლევს გრაფიკის სახით
 მისი სპეციფიურობა და მგრძნობელობა 99.9%-ია
Real-Time PCR
 პრინციპი ემყარება ტემპერატურულ რეჟიმებს
 თითოეული ციკლის შემდეგ დნმ-ის ფრაგმენტი
ორმაგდება
 წარმოქმნილი ამპლიკონები წარმოადგენენ მატრიცებს
ტესტების მგრძნობელობა
ტესტის დასახელება
მგრძნობელობა
სპეციფიურობა
იმუნოქრომატოგრაფია
(სწრაფი ტესტები)
85-90%
88-92%
იმუნოფერმენტული
ანალიზი
(თხევადფაზიანი,
მყარფაზიანი)
90-95%
92-97%
იმუნოფლუორესცენცია
95-98%
95-99%
პოლიმერაზული
ჯაჭვური რეაქცია
99, 9999%
99,9999%
კვლკევის მიზანი
ჩვენი კვლევის მიზანი იყო:
 შეგვეფასებინა სხვადასხვა ტესტ სისტემების
ეფექტურობა B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში
 გამოგვევლინა ყველაზე მაღალსპეციფიური და
მაღალმგრძნობიარე მეთოდი B ჰეპატიტის
დიაგნოზირებაში პჯრ-თან მიმართებაში.
გამოყენებული მასალა და
მეთოდები
მასალა
 21 ადამიანის სისხლი
 პჯრ საშუალებით 14-ს
დაუდასტურდა
მიღებული შედეგები
 იმუნოქრომატოგრაფიული მეთოდით (rapid)
დეტექტირებული იქნა 9 პაციენტში, 5-ში ცრუ
უარყოფითი
 თხევადფაზიანი იფა-თი 12 პაციენტში
 მყარფაზიანი იფა-თი და იმუნოფლუორესცენციით
13 პაციენტში
 იმ პაციენტის შემთხვევაში რომელშიც დადებითი
ვერ მივიღეთ, პჭრ-ის შედეგმაც ძალზედ მცირე
ვირუსის რაოდენობა ჩვენა
შედეგები
შედეგები
დასკვნები
 პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია წარმოადგენს ვირუსის
სისხლში არსებობა/არარსებობის და მისი ციკლის
კონტროლირების ყველაზე საიმედო ტესტს,
 პჯრ შემდგომ პირველობა სადიაგნოსტიკო ტესტ სისტემებში
საიმედოობის, მაღალმგრძნობელობის, მაღალსპეციფიურობის
მხრივ ეკუთვნის იმუნოფლუორესცენტულ კვლევას და
მიკრონაწილაკოვან, მყარფაზიან იფა-ს,
 ჩვეულებრივი, თხევადფაზიანი იფა წარმოადგენს, მართალია
ყველაზე პოპულარულ, გამოყენებად და ხელმისაწვდომ მეთოდს
ლაბორატორიულ დიაგნოსტიკურ საშუალებებს შორის, მაგრამ
მისი საიმედოობა მხოლოდ 80-90%,
დასკვნები
 ხოლო სწრაფი მარტივი იმუნოქრომატოგრაფიული ტესტ
სისტემები შეიძლება გამოყენებული იქნან მხოლოდ საველე
პირობებში, სადაც სხვა აპარატურასთან წვდომა არ არის, ვინაიდან
მათი საიმედოობა მხოლოდ 70-80%, რაც არასაკმარისია სწორი
დიაგნოზირებისათვის, მაგრამ ისეთ პირობებში, სადაც
შეუძლებელია ლაბორატორიული აპარატურით სარგებლობა ( მაგ.
დროებით სამხედრო ჰოსპიტალებში საომარი ოპერაციების დროს)
ისინი ქმნიან კარგ ალტერნატივას, ვინაიდან არ საჭიროებენ
არანაირ დამატებით აპარატურას და ხსნარებს.
გმადობთ ყურადთებისათვის!