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Classical Media 종류별 성분 비교
Classical Media 성분
Classical Media 성분
• 비타민(vitamins)
- vitamin B-group (folic acid, biotin,
pantothenate 등)이 가장 많이 이용
- 일부배지에는 ascorbic acid (vitamin C)와
a-tocopherol (vitamin E)이 포함
- 배지에 첨가되는 혈청은 주요한 비타민 원
으로 작용
- 비타민은 대사과정의 보조 인자로 작용하기
때문에 저농도의 비타민은 대사과정을 제한
하여 세포 생존과 증식 속도에 영향을 미침
• 이온(ions)
- 이온은 배지의 삼투압을 결정
- Na+, K+, Mg2+, Ca2+, Cl-, SO42-, PO43-,
HCO3- 등이 배지에 이용
- Ca2+와 Mg2+는 부착과 cell aggregation의
보조 인자로 작용하기 때문에 부유 세포 배양에
서는 감량
- 부유 세포를 위해서 개발된 RPMI 1640
media에는 Ca2+, Mg2+ 성분이 다른 배지들에
비해 감량되어 있음.
• 탄수화물(carbohydrate)
- 대부분의 배지에서는 D-glucose가 L-glutamine과 함
께 에너지원으로 작용
- D-glucose : glycolysis를 통해서 pyruvate로 전환되
고 pyruvate는 Krebs 회로를 통해서 에너지를 생산
- 일부 세포주에서는 Krebs 회로가 불완전하여 다른
대체 에너지원을 요구하는데, 이때 제일 많이 사용되
는 것이 L-glutamine
- D-glucose는 D-galactose, D-fructose, D-mannose와
같은 다른 탄수화물로 대체될 수 있는데, 대체된 탄수
화물의 사용은 배지 내 젖산(lactic acid)의 축적을 방지
하여 배지의 산성화를 막을 수 있음.
• Phenol Red
- pH 지시제로 사용
- 산성 pH에서는 황색, 중성 pH에서는 적색,
염기성 pH에서는 자색을 나타냄
- phenol red는 스테로이드 호르몬(steroid
hormone)과 유사하여 스테로이드 호르몬과
유사한 반응(steroid-like response)을 유발할
수 있음|
- mammary tissue 배양시 이러한 스테로이
드 호르몬 유사 반응(steroid-like response)를
방지하기 위해서 phenol red가 제거된 배지
를 사용
• 기타
- nucleoside, pyruvate, lipid와 같은 성분
들이 첨가될 수 있음
- 이 성분들은 혈청 농도가 낮아질 때 특히
필요한 성분들이며, 동물 세포의 클로닝을
도와줌
혈청
• 혈청(serum)은 여러 물질이 혼합된 아주 복잡한 복합
산물
• 세포 배양 실험에서 혈청은 기본 배양 배지에 주요한
첨가제로 사용
• 혈청은 매우 광범위한 고분자 단백질, 저분자 영양분,
그리고 불용성 물질들에 대한 운반체 등을 함유하고
있으며 호르몬과 부착 인자와 같은 세포의 in vitro
성장에 필요한 기타 성분들을 함유
• 배양 배지에 완충력을 MCDB media 등의 배지를 사
용하여 혈청의 첨가 없이 세포의 성장을 유지할 수 있
으며 대부분 이들 배지에 insulin, EGF제공하기도 하며
증식 환경에 있는 독성 성분에 부착 및 중화시키는 역
할을 하기도 함.
혈청의 종류
• 우태혈청(Fetal Bovine Serum, FBS)과 우아혈
청(Bovine Calf Serum, BCS)
• 투석우태혈청(dialyzed fetal bovine serum)
• 신생우아혈청(newborn calf serum, NCS)
• Iron supplemented bovine calf serum
• Charcoal stripped serum
• De-lipidated serum
• 사람 혈청(human serum)과 말혈청(horse ser
um, HS)
혈청의 구성
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단백질(protein)
호르몬
각종 대사물질
억제인자
각종 무기물질