Transcript Nucleid Acids isolation products

In questa sezione esamineremo quei prodotti
"biotechrabbit" volti a fornire al cliente
le migliori soluzioni atte a consentirgli di
estrarre, purificare e concentrare
gli acidi nucleici di interesse
da qualsiasi matrice di partenza.
Prerogativa "biotechrabbit" comune a tutti questi
prodotti è la semplicità d’uso a fronte della
massima resa possibile nel rispetto dei più restrittivi
criteri di elevata purezza del prodotto finale.
Che cosa offre biotechrabbit
?
Prodotti per l’isolamento degli Adici Nucleici (DNA – RNA)
DNA Clean-Up
• Prodotti le la pulizia degli amplificati PCR o per l’estrazione delle bande di DNA
da gel di agarosio sia in TAE che TBE
RNA Isolation
• Prodotti per l’isolamento di RNA da differenti matrici/sorgenti
DNA Isolation
• Prodotti per l’isolamento di DNA da differenti matrici/sorgenti
Virus DNA/RNA Isolation
• Prodotti per l’isolamento di DNA & RNA virale
DNA elettroforesi
• DNA Ladders stabili a temperatura ambiente
Nucleic Acid Isolation – DNA Clean-Up
 GenUP™ PCR Cleanup Kit
 GenUP™ Gel Extraction Kit
 GenUP™ PCR/Gel Cleanup Kit
Kit estrazione e/o pulitura GenUP™ PCR/GEL sono appositamente sviluppati
per una pulizia rapida e semplice o per la concentrazione dei frammenti di
PCR da miscele di reazione e l’isolamento del DNA sia gel di agarosio in TAE
che in TBE.
Dopo alcune semplici procedure iniziali il DNA è caricato
su una colonnina la cui matrice in essa contenuta ne
permette lavato e la successiva eluizione in un tubo
separato.
Il DNA così purificato è idoneo per tutte le esigenti
applicazioni di biologia molecolare, quali reazioni
enzimatiche come
•
•
•
•
•
•
digestione per restrizione
"ligation" o altro processo biochimico
può essere sequenziato
transfettato in cellule procariote ed eucariote
utilizzato per la trascrizione in vitro
ecc…
Nucleic Acid Isolation – RNA Isolation
 GenUP™ Total RNA Mini Kit
Kit appositamente sviluppato per una purificazione rapida e
semplice in colonna su matrice solida per RNA totale da cellule
eucariote, procarioti gram-positivi o gram-negativi, tessuti freschi
come biopsie o da altre svariate fonti.
L'RNA purificato è pronto per essere utilizzato in tutte le esigenti
applicazioni di biologia molecolare come sintesi di cDNA , Northern
blotting e altri usi.
 UPzol™ RNA Isolation Solution
Efficace e veloce (~1ora) metodo di estrazione di RNA totale su singolo step di
separazione in fase liquida da campioni di tessuto, cellule eucariote, batteriche,
piante e altro materiale in quantità variabili.
RNA UPzol™ è una soluzione mono-fase a base di fenolo e guanidina tiocianato.
Dopo l'aggiunta di cloroformio e successiva centrifugazione, l'omogenato è
suddiviso in tre fasi : ◾ Colored inferiore fase organica sul fondo ◾ Whitely la fase
centrale ◾ incolore la fase acquosa superiore contenente RNA.
Dalla fase acquosa superiore, l'RNA viene precipitato per aggiunta di alcool. L'RNA così ottenuto può
essere utilizzato per varie applicazioni ed analisi quali:
Northern, sintesi di cDNA, RT-PCR, RT-qPCR, ibridazione Dot-Blot,
selezione poli (A)+, traduzione in vitro, clonazione e saggi di RNasi, ecc.
Nucleic Acid Isolation - DNA Isolation
 GenUP™ gDNA Mini Kit
Il Kit è progettato per un facile, veloce ed efficiente
isolamento del DNA genomico eucariotico da varie
matrici e differenti quantità di materiale di partenza
• tessuti di mammiferi (compresi quelli inclusi in paraffina).
• colture cellulari eucariotiche.
• tamponi buccali.
La separazione avviene su colonnina, ed una volta lavato
viene eluito in un buffer basso contenuto salino.
Ciò si traduce in elevate quantità di DNA genomico (>100pg/colonna), puro e pronto per essere utilizzato in
tutte le esigenti applicazioni di biologia molecolare come il sequenziamento , l’amplificazione ecc…
 GenUP™ Plasmid Mini Kit
Il Kit è progettato per una facile ed efficiente la purificazione di DNA
plasmidico da 0,4 a 10 ml di coltura batterica.
La purificazione avviene in colonna tramite una resina ad alta capacità legante,
con rese di 10-40 mg di DNA plasmidico da ml 5-10 di coltura batterica*.
*(in funzione di un numero di copie di plasmide)
Il DNA plasmidico purificato è pronto per essere utilizzato in tutte le esigenti
applicazioni di biologia molecolare, quali reazioni enzimatiche, sequenziamento,
ecc..
 GenUP™ Plasmid PLUS Kit
Come per il precedente kit GenUP™ Plasmid Mini Kit, anch’esso è progettato per
una facile ed efficiente la purificazione di DNA plasmidico, ma da 15 a 25ml di
coltura batterica.
Nucleic Acid Isolation - DNA Isolation
 GenUP™ Plant DNA Kit
Il Kit è stato sviluppato appositamente per la purificazione facile e veloce del DNA pianta da un'ampia
varietà di materiale vegetale come foglie, radici, fusti, fiori, siano essi freschi, congelati o essiccati.
La separazione del DNA avviene su resina in colonnina.
Il kit include un prefiltraggio per eliminare la biomassa
vegetale eventualmente non lisata.
Il DNA purificato è pronto per essere utilizzato in tutte le
esigenti applicazioni di biologia molecolare, comprese la
PCR, digestioni enzimatiche, clonazione ecc…
 GenUP™ Bacteria gDNA Kit
Il Kit è stato sviluppato appositamente per la purificazione rapida e facile del DNA genomico batterico
sia da cellule di Gram negativi che dai più difficili Gram positivi.
La combinazione del lisozima e step proteolitici permettono
una efficiente distruzione della matrice cellulare.
L'RNA liberato viene associato a una colonna ad alta
capacità e può essere lavato e poi eluito in un tubo a parte.
Il DNA purificato ed eluito a parte è pronto adatto per essere
utilizzato in tutte le applicazioni di biologia
molecolare, compresa la PCR, digestioni
enzimatiche, clonazione ecc...
Nucleic Acid Isolation – Virus DNA/RNA Isolation
 GenUP™ Virus DNA/RNA Kit
Il Kit è stato specificamente sviluppato per l’isolamento simultaneo di RNA e DNA virale in modo
semplice e veloce da campioni eucarioti siano essi tessuti freschi, plasma, siero o altri fluidi, tessuti inclusi
in paraffina, colture cellulari e tamponi buccali.
Il kit è molto utile quando non si conosce la natura del virus.
L’esclusiva membrane di legame contenuta nelle spin columns
garantisce elevate capacità di legame e quindi elevate rese.
Gli acidi nucleidi virali legati alla colonnina una volta lavati
sono eluiti in “collection tubes” differenti.
Essi sono pronti per essere utilizzati in tutte le applicazioni di
biologia molecolare quali cDNA synthesis, northern blotting,
qPCR ed RT-PCR.
 GenUP™ Virus RNA Kit
Il Kit è stato specificamente sviluppato per l’isolamento semplice e veloce
di ssRNA da campioni eucarioti siano essi tessuti freschi, plasma, siero o
altri fluidi, tessuti inclusi in paraffina, colture cellulari e tamponi buccali.
L’esclusiva membrane di legame contenuta nelle spin columns garantisce
elevate capacità di legame e quindi elevate rese.
L’alta resa permette di gestire in modo personale il volume di eluizione a
seconda delle necessità sperimentali.
L’RNA così ottenuto è pronto per essere utilizzato in tutte le applicazioni di
biologia molecolare quali cDNA synthesis, northern blotting, qPCR ed RT-PCR.
Nucleic Acid Isolation - DNA Isolation
 NOVITÀ AUTUNNO 2014
Biotechrabbit, sempre attenta a migliorare i propri prodotti ed a far fronte alle più svariate
esigenze dei propri clienti, è lieta di annunciare il lancio di nuovi “tools” a completamento del
proprio portafoglio prodotti, introducendo i seguenti nuovi kit:
 GenUP™ Blood DNA Kit
 GenUP™ Blood RNA Kit
... per poter estrarre in pochi passaggi e con la massima efficienza sia il DNA che l’RNA da
sangue intero.
 GenUP™ Plant RNA Kit
... come per il GenUP™ Plant DNA Kit sarà possibile purificare in modo semplice e veloce
l’RNA da piante a partire da un'ampia varietà di materiale vegetale come foglie, radici,
fusti, fiori, siano essi freschi, congelati o essiccati
... ed inoltre saranno disponibili:
 GenUP™ FFPE Paraffin Removal Solution
... come indica il nome serve per rimuovere la paraffina dai tessuti in essa inclusi .
 GenUP™ Bisulfite Kit
... è un kit per il quale è possibile misurare l’entità delle metilazione del DNA, tramite la
conversione del nucleotide citosina non metilato nel nucleotide uracile.
... questo crea una mutazione nella sequenza amplificata
che genera un sito di restrizione enzimatica che nella
sequenza originaria non c’era.
... il confronto fra i campioni (trattato e non)
permette di valutare l’entità della metilazione
del DNA.
... questo tipo di analisi prende il nome di COBRA ed è l’acronimo di:
Combined Bisulfite Restriction Analysis (CO.B.R.A.)
 GenUP™ Exo ’n SAP PCR Cleanup Kit
Quest’ultimo kit è composto da una miscela di enzimi, Exonuclease I e SAP (Shrimp Alkaline
Phosphatase), la cui attività enzimatica permette di poter digerire l’eccesso dei i primers ed
inattivare i nucleotidi residui di un campione di pcr e renderlo così pronto il per un eventuale
sequenziamento.
... saranno disponibili,inoltre, nuovi enzimi e soluzioni "accessorie" alla PCR:
 Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP), 1U/µL
 Heat Labile Uracil-DNA Glycosylase, 1U/µL
 Heat Labile dsDNase, 2U/µL
 Streptavidin
 Proteinase K
(non prima di un paio di mesi)
 50mM MgCl2 (molecular biology grade)
 5x PCR Enhancer
DNA Electrophoresis
50bp DNA Ladder,
ready to use
100bp DNA Ladder,
ready to use
50-1500bp range
17 DNA bands
200 & 500bp reference bands
100-3000bp range
12 DNA bands
500 & 1500bp reference bands
Incluso nel package
DNA Loading Dye, 6x
per campioni di DNA
Incluso nel package
DNA Loading Dye, 6x
per campioni di DNA
1 kb DNA Ladder,
ready to use
250-10000 bp range
13 DNA bands
1000 & 3000bp reference bands
DNA Loading Dye, 6x
Nuclease free - ready to use
6x Loading Dye for sample DNA
Incluso nel package
DNA Loading Dye, 6x
per campioni di DNA
Nitidezza delle bande garantita per 12 mesi se conservati a 4°C