Transcript A la recherche de la DNase

Composition
 Hydrolysat trypsique de caséine………………………………………………………………….20,0g
source de carbone, d’azote, d’énergie,
de facteurs de croissance
 Acide désoxyribonucléique (ADN)…………………………………………………………………...2,0g
Substrat de la DNase
 Chlorure de sodium……………………………………………………………………………………………...5,0g
Assure l’équilibre osmotique
 Agar……………………………………………………………………………………………………………………….12,0g
 pH= 7,3
Gélifiant
DNase
Technique
Ensemencer les colonies suspectes en strie unique à la
surface du milieu.
Incuber 24 heures à 37°C.
Pendant l’incubation si la bactérie étudiée possède une DNase alors
grâce à celle-ci il y aura hydrolyse:
ADN + H2O
Nucléotides ou Polynucléotides
Verser à la surface de la gélose une solution d'acide
chlorhydrique (HCl) soit du bleu de toluidine pour avoir la
lecture de la gélose.
Avec HCl
Formation d’un
halo transparent
autour de la
strie:
DNase +
Pas de formation
d’un halo
transparent
autour de la strie:
DNase -
Avec le Bleu de Toluidine
Formation d’un
précipité bleu:
absence de
DNase:
DNase -
Formation d’une
coloration rose ou
transparente:
présence d’une
DNase
DNase +