Transcript media pembelajaran

KCKT
(Kromatografi Cair Kinerja Tinggi)
–
–
Disusun oleh:
Aqnes Budiarti, M.Sc., Apt
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS WAHID HASYIM
SEMARANG
2013
Pekerti
1
Sub Pokok bahasan
1. Prinsip kerja alat
3. Komponen
2. Manfaat
4. Kromatogram
5. Keunggulan KCKT
Pekerti
2
Prinsip kerja alat
 KCKT adalah alat untuk
memisahkan campuran zat
sekaligus untuk
menetapkan kadarnya
 Prinsip pemisahan
berdasarkan perbedaan
polaritas
 Alat pemisahan tercanggih
dan terpopuler pada 20
tahun terakhir
Pekerti
3
Manfaat
Pekerti
4
Komponen
Pekerti
5
Tempat injeksi (Injection valve)
 Load system
Pekerti
6
Fase diam
(stationary phase / column)
Guard
column
Pekerti
Macam:
 Fase normal
contoh: porous silica
 Fase terbalik (RP)
contoh: C18 Lichrospher
7
Penggantian kolom
 Kinerja sudah jelek,
menghasilkan data
yang tidak valid
 Nilai pemisahan
(resolusi) < 2
Pekerti
8
Ukuran partikel fase diam
KCKT 2010
9
Fase gerak (mobile phase)
Solvent
Index
Polarity
Eluotropic Values
Alumina
C18
Silica
UV Cut
off (nm)
Hexane
0,1
0,01
-
0,00
195
Cyclohexane
0,2
0,04
-
-
200
Toluene
2,4
0,29
-
0,22
284
Tetrahydrofuram
4,0
0,45
3,7
0,53
212
Chloroform
4,1
0,40
-
0,26
245
Ethyl acetate
4,4
0,58
-
0,48
256
Acetone
5,1
0,56
8,8
0,53
330
Methanol
5,1
0,95
1,0
0,7
205
Acetonitrile
5,8
0,65
3,1
0,52
190
Dimetilformamide
6,4
-
7,6
-
268
Dimethylsulfoxide
7,2
0,62
-
-
268
Water
10,2
-
-
190
Snyder dkk., 1997
10
Kecepatan alir (flow rate)
It is important
to use the
correct flow
rate for your
KCKT column
Pekerti
11
Tehnik elusi
1. Isokratik
komposisi dan kecepatan alir fase gerak tetap selama
proses analisis
2. Gradien
komposisi dan kecepatan alir fase gerak dapat dirubah
selama proses analisis
Pekerti
12
kromatogram
Sampel
Pekerti
KCKT
kromatogram
13
Tipe kromatogram
√
X
Pekerti
14
Optimasi
Pekerti
15
Keunggulan KCKT
5.
Simultan
1. Cepat
2.
Sampel
sedikit
4. Tepat
3. Teliti
16
Pekerti
Literatur
 Ahuja,S.and
Dong,M.W.,2005,
Handbook
of
Pharmaceutical Analysis by HPLC, volume 6,
Separation Science and
Technology, Elsevier
Academic Press, Amsterdam.
 Snyder, L.R., Kirkland, J.J., and Glajch, 1997, Practical
HPLC Method Development, Second Edition, John
Wiley & Sons Inc., New York.
DEMIKIAN,
TERIMA KASIH
Pekerti
18