Transcript Chromatographie sur couche mince.

Identification des composants de
l’aspartame.
1
 Identifier
les différents composants de
l’aspartame par chromatographie sur couche
mince.
3
 La
chromatographie sur couche mince va
permettre de séparer les constituants de
l’aspartame en fonction de leur affinité pour
deux phases non miscibles ( phase
stationnaire et phase mobile).
Révélation ?
Sur une plaque de gel de silice de 5
x 9 cm, tracer légèrement et sans
appuyer au crayon de papier une
ligne de dépôt à 1,5 cm du bord
inférieur de la plaque
Marquer très légèrement les
emplacements des dépôts (6
dépôts) en laissant 0,7 cm de
chaque côté de la plaque et 0,7 cm
entre les dépôts
 Verser
15 mL d’un mélange de solvants nbutanol (75 Vol.), acide acétique (20 Vol.) et
eau (20 Vol.), soit une hauteur d’environ 1
cm de solvant.
 Attendre
environ 10 minutes que les vapeurs
de solvants saturent la cuve.
Dissoudre deux
comprimés d’aspartame
dans 10mL d’eau
déminéralisée.
A
l’aide de pipettes
Pasteur, déposer les
différentes solutions
comme indiqué cicontre. Les dépôts sont
faits en deux fois et ne
doivent pas trop
s’étaler.
Limiter le texte pour ne retenir
que les idées essentielles

Introduire la plaque dans la cuve
saturée de solvant: la ligne de
dépôt doit se trouver au dessus du
niveau de la ligne de solvant.

Laisser migrer jusqu’à ce que le
front du solvant se trouve à 1 cm
du bord supérieur de la plaque
(1h30 environ).

Sortir le chromatogramme,
marquer légèrement la position du
front de solvant au crayon de
papier (pensez à identifier votre
chromatoplaque).

Porter 10 min à l’étuve à 100°C.
2,5
Le Rf est aussi appelé
le rapport frontal.
 Rf est égal à la
distance de migration
de la substance
d’analyse sur la
distance de migration
du solvant.
 Le rapport frontal est
donc égal à :

1
Solution
Aspartame
Acide
aspartique
Phénylalanine
Lysine
Aspartame
hydrolysé
Proline
Distance de
migration
(cm)
3,7
2
3,7
1
2 et 3,7
1,6
Distance de
migration
du solvant
5, 3
5,3
5,3
5, 3
5,3
5,3
Rf
0,70
0,38
0,70
0,19
0,38 et
0,70
0,30
3
Forme et
couleur des
spots
Les photos auraient pu être complétés par une description ou un croquis



Suite à la révélation nous
observons l’apparition de plusieurs
spots. D’après ceci nous pouvons
déterminer la composition de
l’aspartame.
La migration de l’aspartame non
hydrolysé ne permet pas de
connaitre les différents
composants de l’aspartame.
En regardant la migration des
différents composés et en les
comparant à celle de l’aspartame
hydrolysé nous pouvons en déduire
que l’aspartame est composée de:
- phénylalanine Sur quels critères vous appuyez-vous ?
-acide aspartique
Trop de phrases
Pas assez synthétique
1

Les deux acides aminés sont liés par une liaison peptidiques
unissant des groupements portés par leur carbone
Acide aspartique
Liaison peptidique
Phénylalanine
• Le radical de l’acide aminé N-terminal n’absorbe pas la lumière UV
Donc …
Nt
Ct
• L’acide aminé C-terminal est lié par une liaison ester à du méthanol
Liaison ester
Liaison ester (en vert)
2
0
 L’hydrolyse
de l’aspartame dans l’échantillon
est totale étant donné que nous retrouvons
différents acides aminés et qu’il n’y a pas de
spot inconnu sur la plaque.
Revoir la justification
Vous devez, pour répondre à cette question, analyser le résultat
obtenu pour l’aspartame hydrolysé
Poids net d’un comprimé :
29,25/650 = 0,045g
= 45 mg
 Pourcentage d’aspartame
dans un comprimé :
45x44/100 = 19,8mg
 Pouvoir sucrant :

Sachant qu’un comprimé a le même
pouvoir sucrant que 4g de sucre
4000/19,8 = 202
2
Partie résultats 15,5 / 20
 Bonne qualité du diaporama
 Quelques effets supplémentaires sur le début de
la présentation (principe, mode opératoire)
pourrait rendre un éventuel oral plus dynamique
 A revoir :

Trop de textes sur certaines diapo – Eviter les
phrases pour préférer une synthèse des idées
 Attention aux effets de la diapo 10 où les photos
apparaissent avant le tableau
 Revoir la diapo 14 sur l’hydrolyse de l’aspartame
