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Unidad 2
. Virus, Viroides
y Priones
. Microscopía
EL PRESENTE MATERIAL ES UNA SÍNTESIS QUE NO REEMPLAZA, SINO QUE
COMPLEMENTA, AL RESTO DE LOS MATERIALES
1
Diversidad de Virus
Los virus son complejos de macromoléculas. Están formados por una cápsula proteica, una
molécula de ADN ó ARN y, en ocasiones, una cubierta membranosa
HIV entre glóbulos rojos
Bacteriófago
Virus del Ebola
Virus de la Hepatitis B
Adenovirus aviar
2
REPLICACIÓN VIRAL
Ciclo Lítico
3
Ciclo Lisogénico
El ADN del virus queda integrado en el ADN
de la bacteria. El virus queda en forma de
profago. Los genes del profago no se
expresan, replicándose junto al ADN de la
bacteria. Luego, estos profagos pueden,
desencadenar un ciclo lítico, ante
determinados estímulos, produciendo la lisis
de la célula hospedadora.
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VIROIDES y PRIONES
Los viroides son moléculas de
ARN circular desnudo que se
encuentran en las plantas. El PSTV,
que causa la enfermedad tubérculo
fusiforme en la papa provoca que
la papa infectada forme tubérculos
alargados y retorcidos. Este viroide
también puede afectar a las
plantas de tomate, produciendo
atrofia en su crecimiento y hojas
retorcidas.
La proteína normal posee una estructura muy
rica en hélices alfa, en cambio, la proteína
patógena posee mayor cantidad de láminas
beta. La proteína alterada interacciona con otra
proteína normal cambiando su conformación a
un estado alterado o prión, manifestando de
esta forma su poder infectivo
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MICROSCOPÍA
6
El Estudio de las Células
Microscopía Óptica
• M. O.
Requiere Técnica
Histológica
Microscopía
Electrónica
• M.E.T.
• M.E.B.
7
MICROSCOPIA: Generalidades
Resolución: capacidad de un microscopio para distinguir
objetos separados por pequeñas distancias.
Limite de resolución: mínima distancia entre dos puntos
para que se vean separados. Los microscopios difieren
en sus limites de resolución.
-Limite de Resolución del M.O.= 0.25 mm
-Limite de Resolución del M.E.= 0.20 nm (óptimo) y
1 a 2 nm (en la práctica)
-Ojo Humano = 100 mm = 0,1 mm
1 mm = 0.001mm = 1 x 10-6 m
1 nm = 1 x 10-9 m
8
MICROSCOPIO ÓPTICO
Microscopio
óptico clásico
9
Observación al M.O.
Microorganismos presentes en una
gota de agua de charco. El M.O.
permite observarlos vivos.
10
Técnica Histológica
La observación al M.O. requiere del empleo de una técnica específica, la
técnica histológica, que consta de los siguientes pasos:
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
Obtención de la muestra
Fijación con formol
Deshidratación con alcoholes
Aclaración con solventes no acuosos
Inclusión en parafina
Corte con micrótomo
Rehidratación
Coloración
Montaje: colocación del corte en un portaobjetos
11
Observación de Preparado
núcleo de
célula epitelial
glandular
acino (cavidad
glandular)
Biopsia de glándula salival humana 40X
Los núcleos se observan en color azulado y
los citoplasmas en pardo.
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MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
DE TRANSMISION (MET)
Imágenes planas de
estructuras celulares
-
DE BARRIDO (MEB)
-
Imágenes tridimensionales
Células completas
únicamente (limite de
resolución 10 nm)
-
Permite observar hasta
macromoleculas
-
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MICROSCOPIOS
M.O.
M.E.
MECANISMO
Dispersión luz
Dispersión de e-
UTILIZA
Lentes
Bobinas
electromagnéticas
AUMENTOS
Hasta 1000 veces
Un millón de veces
COLORACIÓN
Sí
No
FIJACIÓN
Formol
Glutaraldehído
INCLUSIÓN
Parafina
Resinas
CORTE
Micrótomo
Ultramicrótomo
COLORANTES
Diversos
Contrastantes
MONTAJE
Porta y cubre de
vidrio
Grillas de metal o
plástico
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Escherichia coli al microscopio
óptico
E. coli
Células intestinales
Células de Escherichia
coli, bacteria habitante
del tracto intestinal.
15
Escherichia coli al microscopio
electrónico de transmisión
16
Escherichia coli al microscopio
electrónico de barrido (scanner)
17
Cultivo Celular
El cultivo celular es el proceso
mediante el que células procariontes o
eucariontes,
pueden
cultivarse
en
condiciones controladas.
El término "cultivo celular" se usa,
normalmente, en referencia al cultivo de
células
aisladas
de
eucariontes
pluricelulares.
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Fraccionamiento Celular
Mediante el fraccionamiento
celular se consigue separar
estructuras celulares a partir
de un conjunto de células.
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Células
Procariontes
20
Bacterias
Echerichia coli
Lactobacillus sp.
Leptospira sp.
Vibrion cholerae
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Células Procariontes
22
Células Eucariontes
Compartimientos
Celulares
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Compartimientos
Las células eucariontes poseen, además del núcleo, diversos compartimientos delimitados
por membrana. En cada uno de ellos, se realizan funciones metabólicas diferentes.
Peroxisomas
Amiloplastos
Núcleo y R. E.
Golgi
Cloroplasto
Mitocondria
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Célula Animal y Vegetal
25
C
A
R
A
C
T
E
R
I
S
T
I
C
A
S
TIPO
CELULAR
Procariontes
CARACTERISTICAS
ADN desnudo y ubicado en el
citoplasma.
REINO
EJEMPLO
Moneras
Ausencia de núcleo, de sistema de
endomembranas y de
compartimientos.
Aeróbicos o anaeróbicos.
Autótrofos o heterótrofos.
ADN asociado a proteínas llamadas
histonas y ubicado en el núcleo
celular.
Eucariontes
Con endomembranas que producen
compartimentalización celular y
división de funciones.
Protistas
Hongos
Plantas
Aeróbicos
Autótrofos o heterótrofos.
Animales
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