Transcript 小鼠戊巴比妥纳LD50和ED50的测定

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小鼠戊巴比妥纳LD50和ED50的测定
安徽医科大学机能学实验中心
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实验目的
了解LD50、ED50的概念，测定方法和意义
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实验原理
1
半数致死量（median lethal dose , LD50）
2 半数有效量（median effective dose , ED50 ）
3
治疗指数（therapeutic index，TI）
：
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死亡
100
效应
80
60
40
LD50
ED50
反
应
率
（
％
）
20
0
50
100
200
400
800
剂量(mg)
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药品和器材：
戊巴比妥纳、生理盐水、电子秤、
1ml注射器，计算器
动物：
昆明种小鼠，18－22g， 雌雄兼用
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说 明




学生分组
整体安排
试剂
诚实记录
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方 法
① 取鼠（10只），随机分组（2组），
称重，标记
② 腹腔注射（10ｇ小鼠注射0.1ｍｌ药）
③ 观察记录
LD50实验：2小时内死亡鼠数
ED50实验：0.5小时内翻正反射消失鼠数
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第一步
①取鼠，随机分组，标记，称重
小鼠捉拿
随机分组
标记
称重
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随机分组
随机数字表
抽签法
本次试验由于小鼠数量较
少仅把体重和性别在两个
组达到相对均衡即可
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动物分组
标记方法
苦味酸染
色法
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第一步： 小鼠称重
第二步
② 腹腔注射（10ｇ小鼠注射0.1ｍｌ药）
进针部位
进针角度
进针深度
回抽
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第三步
③ 观察记录
LD50实验：2小时内死亡鼠数
ED50实验：半小时内翻正反射消失鼠数
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说明
死亡的观察：心跳呼吸停止与麻醉鼠区分
翻正反射：小鼠本能反应，自动翻回
翻正反射消失：不能翻回，持续1分钟
（勤翻动小鼠，避免漏记,保持安静，否则
影响小鼠入睡）
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结果 LD50
组别
剂量D
(mg/kg)
1
2
3
4
5
6
220
198
178
160
144
0
lgD
2.343
2.297
2.251
2.205
2.159
—
实验
鼠数
死亡
鼠数
10
10
10
10
10
10
9
7
5
3
1
0
死亡百分率
（%）
90
70
50
30
10
0
P
0.9
0.7
0.5
0.3
0.1
0
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公式
LD50=Lg －1〔Xm－i（∑P－0.5）〕
Xm=最大剂量对数值
P=死亡率的小数表示
∑P=各组死亡率总和
i=大剂量与相邻小剂量之比对数值结果
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ED50
组别 剂量D
(mg/kg)
1
2
3
4
5
6
90
81
73
66
59
0
lgD
1.954
1.908
1.863
1.818
1.774
-
实验
鼠数
翻正反射
消失鼠数
翻正反射消失
百分率（%）
P
10
10
10
10
10
10
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实验步骤
⑴ 每组取10只小鼠，随机分为2组放在两个小鼠筐里，一组
做LD50（先做），一组做ED50（后做）
⑵ 用电子称称重后，用苦味酸或者记号笔标记
⑶ 按照0.1ml/10g的剂量换算成ml数后（例如20g小鼠需给
0.2ml药物），进行腹腔注射（两组药物不能混淆）
⑷ 药物注射后，观察
LD50：观察并记录给药后2小时内死亡的鼠数
ED50：观察并记录给药后0.5小时的翻正反射消失的鼠数
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LD50与 ED50实验的区别
药物剂量
观察时间
LD50
2小时
ED50
0.5小时
观察指标
死亡(先做)
翻正反射
消失
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流程及注意事项
给药
观察
结论
药物剂量算正确
死亡指标需明确
准确记录是关键
腹腔注射要回抽
翻正反射勤翻动
代入公式出结果
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思考题
1．药物剂量与药物作用有何关系？为什么？
2．药物LD50 、 ED50及治疗指数TI有何意义？
3．设置生理盐水对照组的意义？
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实验报告
书写格式
题目、目的、药品及器材、实
验动物、实验原理（概括）、试验方
法、试验结果（详细）、讨论、结论。
提交日期
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