Transcript Проблемы преаналитического этапа

Научно-практический семинар
«Преаналитический этап клинико-лабораторных исследований. Современные подходы»
29 октября 2014 года
ГБУЗ «Иркутская государственная областная детская клиническая больница»
Проблемы преаналитического этапа
Практика и теория
Иркутский областной
консультативно-диагностический центр
Мирошниченко Иван Андреевич
[email protected]
Подготовка пациента для взятия крови из вены
• Пациент должен быть информирован заранее о планируемом заборе
биоматериала, о правилах подготовки к сдаче биоматериала
• Кровь собирается натощак. Некоторые тесты (напр. Холестерин,
липидограмма) требуют более длительного воздержания от еды перед
исследованием
• Уровень некоторых гормонов связан с суточными (кортизол) и иными
ритмами секреции (половые гормоны), забор крови должен быть
осуществлен с учетом данных ритмов
• На результаты оказывает влияние психоэмоциональная а также
физическая нагрузка непосредственно перед взятием биоматериала
(требуется минимум 30-минутный отдых)
• На результаты оказывает влияние курение в день забора биоматериала и
прием алкоголя, в том числе накануне исследования.
• Забор крови осуществляют в спокойном психофизическом состоянии
пациента
Техника взятия венозной крови
Внимание: пробы на бакпосев берут первыми
Пробирка без добавок
Пробирка для коагулологии*
Пробирка для сыворотки
Пробирка с гепарином
Пробирка с ЭДТА
Пробирка для глюкозы
Все остальные пробирки
Порядок взятия крови
Техника взятия венозной крови
Однократный
переворот:
поверните
наполненную
пробирку крышкой
вниз и верните в
исходное
положение.
Сразу после взятия крови аккуратно
переверните пробирки 8-10 раз для
обеспечения полного перемешивания
реагента и крови.
Техника взятия венозной крови
ВНИМАНИЕ: Не встряхивайте
пробирки. Энергичное перемешивание
может вызвать вспенивание или
гемолиз. Недостаточное или
медленное перемешивание пробирок
для сыворотки может замедлить
образование сгустка. В пробирках с
антикоагулянтами неправильное
перемешивание может привести к
склеиванию тромбоцитов,
образованию сгустка и / или
недостоверным результатам анализа.
• Подготовка образцов для исследования системы гемостаза
требует особого внимания
• Время наложения жгута - не более 1 мин
• После набора крови пробирки аккуратно перемешиваются
путем переворачивания на 180 С не более 4-5 раз. НЕ
ВСТРЯХИВАТЬ ПРОБУ!!!
• Для развернутого коагулологического исследования, как
правило, необходимо взятие крови в несколько пробирок
В отдельные пробирки необходимо брать следующие пробы:
~ чувствительные к внешним условиям;
~ на исследование функциональной активности тромбоцитов;
~ требующие охлаждения;
~ предназначенные для хранения и транспортировки.
• Заполнение вакуумной пробирки точно до метки.
Оптимальным вариантом является закрытая вакуумная
система, позволяющая провести точное дозирование порции
крови.
!Перевернуть 4 раза !
Гемостаз
• Сразу после взятия крови – поместить ее в термоконтейнер
или провести центрифугирование. Нельзя открывать
пробирки до начала аналитической стадии исследования.
• Необходимо соблюдать правильный температурный режим
хранения, транспортировки и обработки проб. Пробы крови
для коагулологических исследований следует доставлять с
использованием термоконтейнеров при постоянной
температуре в пределах 22–24 °C.
• Время доставки пробы для исследования в лабораторию не
должно превышать 45 мин.
!Перевернуть 4 раза !
Обработка проб для исследования системы
гемостаза
Сроки работы с биоматериалом
Каждый тип проб в соответствующих пробирках
имеет свой регламент обработки
Особенности заполнения пробирок
для отправки в ИДЦ
Забор крови осуществляейте в типы пробирок, строго
соответствующие заказанным исследованиям (смотрите
направление!).
Для биохимии, иммунохимии – вакутейнер с красной крышкой.
Внимание! Одного полностью заполненного вакутейнера хватает для
выполнения примерно 20 тестов. Пожалуйста, не набирайте лишних
вакутейнеров!
При одновременном заказе ПЦР и полного гематологического анализа
забор крови производится в отдельные вакутейнеры (с сиреневой
крышкой) – один для ПЦР, второй для полного гематологического
анализа.
Если необходимы дополнительные исследования в пробирке с сиреневой
крышкой – наберите дополнительную пробирку
Техника центрифугирования
ГЕЛЬ
Правила центрифугирования
• Пробирки с антикоагулянтами: центрифугировать и отобрать пробу
настолько быстро, насколько это возможно
• Пробирки с сывороткой центрифугировать не ранее чем через 30 минут и
не позже чем через 2 часа.
• Предпочтительное использование горизонтальных роторов
• При установке пробирок необходимо убедиться, что крышка не опирается
на стенки стакана центрифуги
Угловой ротор
– лучше не
использовать
предпочтительно
использовать
центрифуги с
горизонтальным
ротором
Параметры центрифугирования
ОЦС
Время
Пробирки для коагулологии
Богатая тромбоцитами плазма
150 g
Бедная тромбоцитами плазма
1500 – 2000 g
10 мин.
Свободная от тромбоцитов плазма
2500 – 3000 g
20 мин.
1800 g
1800 g
10 мин.
10 мин.
2200 g
1800 – 2200 g
15 мин.
10 мин.
5 мин.
Пробирки для сыворотки
Пробирки для сыворотки с гелем
Пробирки для сыворотки с гранулами
Пробирки для плазмы
Пробирки с гепарином и гелем
Пробирки с ЭДТА и гелем
ОЦС = 1.118 x радиус* x (об/мин/1000)²
*Радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки
при ее максимально удаленном расположении.
Параметры центрифугирования
• Корректное использование значений g – относительной
центробежной силы (ОЦС). ОЦС (g) ≠ скорость
(об/мин).
• температура не должна опускаться ниже 15С и
подниматься выше 24С (Наиболее полное отделение
сыворотки и плазмы происходит при температуре 2022С).
• из рекомендуемого времени центрифугирования
необходимо вычесть время разгона и торможения.
ОЦС = 1.118 x радиус* x (об/мин/1000)²
*Радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки
при ее максимально удаленном расположении.
Параметры центрифугирования
• Всегда следуйте рекомендациям производителя
центрифуги (руководство должно быть на рабочем
месте)
• В случае возникновения вопросов по работе
центрифуги – всегда связывайтесь с представителями
фирмы производителя.
• Необходимо правильно рассчитанные параметры
центрифугирования напечатать в виде краткой
инструкции и сделать доступным для лаборантов и
врачей
ОЦС = 1.118 x радиус* x (об/мин/1000)²
*Радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки
при ее максимально удаленном расположении.
Техника центрифугирования
Центрифугирование
сыворотки сразу после взятия:
виден сгусток фибрина.
Гемолиз – проблема несоблюдения
Техники забора крови
Интерференция. По Kroll и Elin – «влияние вещества, присутствующего в
образце, которое изменяет истинное значение результата.
Гемолиз – наличие свободного гемоглобина в плазме, сыворотке крови
Причины: эндогенные, технологические.
Видимый на глаз гемолиз >50 мг/дл (от 30 до 50)
Минимальный гемолиз, оказывающий влияние на измеряемый
показатель 10 мг/дл
Причины гемолиза
Возможная причина
Способ решения проблемы
Слишком сильное сдавление
вены (больше 1 мин)
Точный контроль времени наложения жгута (не более 1
мин)
Перенос крови в пробирку с
помощью шприца
Использовать специальные двусторонние иглы для
вакуумных пробирок
Использовать вакуум-шприцы
Слишком интенсивное
перемешивание образца
Аккуратно перевернуть пробирку 6-8 раз, точное
соблюдение правил
Пробирка неадекватно
заполнена
Контролировать, чтобы пробирка была заполнена до
черной метки ( + 10%).
Не использовать пробирки, потерявшие вакуум
Маркировка образца
Выполняется с целью корректной идентификации биологического
материала
Данные могут наноситься без штрих-кода (отсутствие ЛИС в
лаборатории)
Данные сопровождаются штрихкодированием (регистрация с
помощью ЛИС)
Маркировка образца штрихкодированием
Позволяет закодировать значительную часть информации:
-
Данные пациента
Дату регистрации биоматериала
Организацию, направившую биоматериал
Другая информация (тип биоматериала, заказанные тесты и пр.)
Значимо уменьшает количество ошибок
Значимо ускоряет скорость обработки (регистрации) биоматериала
Важно соблюдение правил штрихкодирования!
Правила маркировки образцов
(вакуумные пробирки)
Правильно
Не правильно
Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ
«Триплет» штрихкодов
Образец 1
Образец 2
Направление
Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ
«Триплет» штрихкодов
Образец 1
Направление
Образец 2
Заполнить еще одно
направление
и оформить по
общим правилам
Образцы 3, 4 и т.д.
Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ
«Триплет» штрихкодов
Единственный
образец
Направление
Выбросить!
Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ
«Триплет» штрихкодов
Направление
Единственный
образец
Оставшийся штрих-код
нельзя наклеивать на другие бланки
Основные ошибки маркировки
штрихкодированных образцов
Не наклеенный штрих-код
Наклеивание поврежденного штрихкода, либо повреждение его при
наклеивании
Штрих-код наклеен поперек пробирки
Штрих-код наклеен на свободное от ярлыка пробирки место
Не соблюдено соответствие наклеенного штрихода на образец и
направление
Данные пациента нанесены на линии штрихкода
Основные ошибки маркировки
штрихкодированных образцов
Основные ошибки маркировки
штрихкодированных образцов
Правила заполнения направлений
Бланк направления в ИДЦ необходимо взять в ИДЦ. Не используйте
ксерокопированные бланки!
Пожалуйста, ничего не прикрепляйте к бланкам направлений —
скрепки, стикеры и т.д.
Бланки направлений нельзя мять, сгибать и сворачивать в трубочку.
Дата и время забора крови сделаны в полном формате – в поле дата
указывается — число.месяц, а время - час.минуты.
Правила заполнения направлений
При заказе исследований методом ПЦР необходимо указывать материал,
который отправляется на исследование. Например, так:
Правила заполнения направлений
Заполняется шариковой, капиллярной или гелевой ручкой ЧЕРНЫМИ или
ТЕМНО-СИНИМИ чернилами ЗАГЛАВНЫМИ ПЕЧАТНЫМИ БУКВАМИ.
Образец заполнения находится на лицевой стороне направления внизу
страницы.
Поля, обязательные для заполнения:
ФИО
Дата рождения (полностью!)
Данные полиса ОМС (серия, номер, номер договора, наименование
страховой медицинской организации).
Для пациентов, имеющих полисы ОМС других регионов РФ (не Иркутской
области), необходимо прикладывать к направлению копию полиса.
Контактный телефон лечащего врача
Поля, содержащие информацию о параметрах пациента и биоматериала
(срок беременности, объем суточной мочи и пр.)
Правила заполнения направлений
Заказ исследований – в клеточке напротив необходимого исследования
поставить V или Х.
Правильно
Не правильно
Правила заполнения направлений
Если вы ошиблись и поставили ненужную отметку...
Просто зачеркнуть недостаточно! Компьютер — не человек, он этого не
поймет.
Есть два варианта это исправить — воспользоваться корректором и
замазать белой краской неправильную отметку, либо полностью
закрасить квадрат с меткой чернилами.
После назначения всех исследований в поле «Общее количество отметок»
указать общее число заказанных исследований.
Транспортировка биоматериала
Основные правила работы с термосумками
Для обеспечения Т 0-8С (без заморозки)
• Уложить хладоэлементы в морозильную камеру с
температурой -20(+-4С) на 15-20 часов
• Разложить хладоэлементы на плоскую поверхность
для оттаивания на 30-40 минут
• Готовность определить путем появления первых
всплесков хладоагента при встряхивании
• Протереть хладоагенты сухой ветошью и уложить их по
боковым стенкам контейнера
Основные правила работы с термосумками
Для обеспечения Т ниже 0С (в замороженном виде)
• Уложить хладоэлементы в морозильную камеру с
температурой -30(+-4С) на 15-20 часов
• Протереть хладоагенты сухой ветошью, поместить их в
полиэтиленовые пакеты
• Уложить хладоагенты по боковым стенкам контейнера
Транспортировка биоматериала
Спасибо за внимание!