Transcript Kromatografi 1

KROMATOGRAFI
Pustaka :
Sherman, J., Bernard, F., 1996, Hand book of Thin-Layer Chromatography, Second ed., Marcel Dekker INC,
New York.
Grob, R.L., 1995, Modern Practice of Gas Chromatography, 3rd edition, John Wiley & Sons INC, New York.
Neue, U.D.,1997, HPLC Columns. Theory Technology and Practice, John Wiley & Sons INC, New York.
Gritter, R.J., Bobbitt, J.M., Schwarting, A. E., 1985, Introduction to Chromatography, Holden-Day INC,
Oakland, USA.
Clarke, E.G.C., 1971, Isolation and Identification Of Drugs, in pharmaceuticals, body fluid and post-mortem
material, The Pharmaceutical Press, London.
Westermeier, R., 2005, Electrophoresis in Practice, 4st Edition, Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA,
Germany
Watson, D.G., 1999, Pharmaceutical Analysis: A textbook for pharmacy students and pharmaceutical
chemists, Churchill Livingston, UK.
Kromatografi diturunkan dari bahasa Greek
Chromato = Warna
Grafe
= Tulisan
Sejarah :
Runge, F.F. (1834-1843) melakukan spot test campuran zat
warna dari ekstrak tumbuh-tumbuhan pada pita kain dan atau
kertas.
Goppel Sroeder, F (1868) menganalisis zat warna, hidrokarbon,
alkohol-alkohol, beer, milk pada minuman dan air minum
menggunakan kertas.
Schobeinc menggunakan pita kertas untuk memeriksa cairan.
Day D.T. (1897-1903) menggunakan kolom yang diisi serbuk tanah
untuk pemisahan.
Mikhail Tswett (1906-1907) telah berhasil memisahkan pigment
kloroplast dengan fase diam CaCO3 dan petroleum eter sebagai fase
gerak.
Wilson, J.N. (1940) mempelajari tentang teori pada kromatografi kertas.
Martin, A.J.P. dan Synge, R.L.M.(1941) mengajukan pertama kali model
yang menjelaskan efesiensi kolom dan mengembangkan kromatografi
cair dan berhasil mendapatkan hadiah Nobel tahun 1952.
Van Deemter, J.J dkk yang mengembangkan teori kecepatan dengan
menyederhanakan hasil kerja Lapidus dan Ammundson pada fungsi
distribusi Gauss.
Dengan perkembangannya Nama kromatografi tidak sesuai lagi
Dasar Pemisahan :
Perbedaan kecepatan migrasi komponen (senyawa-senyawa)
yang dibawa oleh gerak dan ditahan secara selektif oleh fase
diam.
Tujuan Kromatografi :
Pemisahan senyawa-senyawa dengan waktu yang tidak
terlalu lama.
Penggolongan kromatografi
Atas dasar mekanisme pemisahan :
1.
kromatografi serapan (adsorption chromatography)
2.
kromatografi partisi (partition chromatography)
3.
kromatografi eksklusi (exclusion chromatography)
4.
kromatografi penukar ion (ion exchange chromatography)
5.
kromatografi afinitas (affinity chromatography)
Atas dasar (wujud) fase gerak:
1.
kromatografi gas (fase geraknya adalah gas)
2.
kromatografi cairan (fase geraknya adalah zat cair)
Atas dasar bentuk fase diam:
1.Kromatografi planar
a. kromatografi lapis tipis d. slab elektroforesis
b. kromatografi kertas
c. kromatotron
2.Kromatografi kolom
a. kolom terbuka
b. kromatografi gas,
c. kromatografi cair kinerja tinggi
Atas dasar cara mengalirkan fase gerak
1.
vacuum column chromatography
2.
flash column chromatography
3.
gravity column chromatography
4.
high pressure liquid chromatography
Penamaan pada umumnya didasarkan keadaan fase gerak dan fase
diamnya, misalnya :
GLC = gas liquid chromatography (KGC)
GSC = gas solid chromatography (KGP)
LLC = liquid liquid chromatography (KCC)
LSC = liquid solid chromatography (KCP)
Mekanisme Pemisahan
Pengertian :
1. Unsur elektronegatif
2. Ikatan kovalen
3. Momen dipol  Ikatan Hidrogen
4. Polar & non polar
5. Ekstraksi pelarut
6. Koeffisien Distribusi = Koeffisien partisi
KD = D
7. Counter Current Craig Extraction
(pemisahan secara partisi)
Molekul polar dan non-polar ?
Unsur elektronegatif ?
Ikatan kovalen ?
H
H
H
H
H
O
H
c
H
c
c
H
c
c
H
H
H
H
H
H
c
H
H
Pelarut organik yang sering digunakan sebagai fase gerak
(deret eluotropik)
non polar
Parafin cair
Petroleum eter
Sikloheksana
Karbon tetraklorida
Benzena
Toluena
Kloroform
Dietileter
Etilasetat
Aseton
n-propanol
etanol
asetonitril
methanol
polar
air
Fase diam
Silika
Silika gel tanpa pengikat (silika gel H dan N)
Silika gel dengan pengikat (silika gel G)
Silica gel dengan pengikat dan zat berfluoresensi (GF)
Slika gel untuk kolom kromatografi (preparatif)
O
Alumina
O
O
OH OH
O
O
O
O
Al
Al
Al
CH 2OH
O
O
OH
O
OH
OH
O
O
O
OH
CH 2OH
CH 2OH
OH
O
OH
OH
O
OH
Si
O
OH
CH 2OH
selulosa
Si
Si
Si
O
O
O
OH
OH
OH
OH
O
O
Mekanisme pemisahan secara adsorpsi
Kompetisi terjadinya ikatan hidrogen
H
H
C O
H
H
H
C O
H
H
H
O
H
H
O
OH OH
O
O
O
O
O
O
O
Si
Si
Si
Si
Si
Si
O
O
O O
OH
OH
Mekanisme secara partisi
[ HB ] fase atas
KD = ---------[ HB ]fase bawah
Misalkan :
K
D = 1
F. Craig Apparatus dan Craig Countercurrent distribution
500
500
250
250
250
250
125
125
250
125
125
62.5
187.5
187.5
62.5
187.5
187.5
31.25
31.25
Fraksi Total
250
0,0625
125
125
0,250
62.5
62.5
187.5
125
187.5
125
0,375
0,250
31.25
31.25
0,0625
Distribusi suatu senyawa (KD sama)
pada pemindahan ke sekian kali
Terpisahnya empat senyawa yang mempunyai KD berbeda
Pada pemindahan ke 15