Transcript 後根神経節における持続性Na電流の解析

後根神経節における持続性Na電流の解析
技術センター 医学部等部門 医学科技術班
柿村順一
電位依存性ナトリウムチャネル のα-subunits
主な発現部位
知覚神経節での存在
公式名
慣用名
TTX 感受性
Nav1.1
TypeⅠ
感受性
中枢、末梢
＋
Nav1.2
TypeⅡ
感受性
中枢
＋
Nav1.3
TypeⅢ
感受性
中枢(胎生期)
Axotomy 後に発現
Nav1.4
SkM1
感受性
骨格筋
－
Nav1.5
rH1
非感受性
心筋
－
Nav1.6
NaCh6
感受性
中枢、末梢、グリア
＋＋
Nav1.7
PN1
感受性
末梢,シュワン細胞
＋＋
Nav1.8
SNS
非感受性
知覚神経
＋＋＋
Nav1.9
NaN
非感受性
知覚神経
＋＋＋
一次知覚神経とNaチャネル
後根神経節
（DRG）
有髄Ab線維
Skin
receptor
非侵害性刺激
有髄Ad線維
侵害性刺激
Ⅰ
無髄C線維
Ⅱ
Ⅲ
自由神経終末
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
Spinal dorsal horn
Nav1.8 (SNS) NaV1.9 (NaN)
実験方法
1) Materials
NaV1.8 (SNS)-KOマウス由来DRGニューロン
2) Whole cell patch clamp recordings
細胞外液(mM)
TTX 100nM
Distribution of cell diameter in mice DRG
80
cell counts
NaCl
100
CsCl
5
CaCl2
1.8
MgCl2
1
HEPES
5
glucose
25
TEACl
30
4-AP
5
CdCl2
0.1
細胞内液(mM)
NaCl
10
CsCl
110
MgCl2
2.5
HEPES
5
EGTA
5
TEACl
20
small
55%
60
medium
26%
large
19%
40
20
0
16
18
20
22
24
26
28
30
32
34
36
38
40
cell diameter (mm）
42
44
46
48
50
DRGニューロンにおける3種のNa電流
A
TTX-S / fast
I-V curve
-80
B
TTX-R / slow
-60
-40
V (mV)
-20
0
20
40
NaN
TTX-S / fast
Nav1.8 (SNS)
C
SNS
TTX-R / persistent
Nav1.9 (NaN)
1nA
50ms
60
NaV1.9のキンドリング
炎症性疼痛の伝達経路
マウスDRGにおけるNaV1.8電流
NaV1.8電流に対するPGE2の効果
細胞内ATPによるNaV1.9のキンドリングの抑制
細胞内ATP非存在下におけるTTX-R Na電流の増大は
PGE2に依存しない｡
NaV1.９電流に対するPGE2の効果
カプサイシン誘発内向き電流に対するPGE2の効果
結論
マウスDRGにおいて、 NaV1.8 および NaV1.9電流に対す
るPGE2 の効果は認められなかった｡
これまでに報告され、支持されてきた、PGE2 によるTTX-R
Naチャネルを介した炎症性疼痛の増強という仮説に疑問を投
げかけるものである。