Buona Pratica di Laboratorio

ESAMI DI BASE IN URGENZA E ROUTINE

Ematologia

L’ESAME EMOCROMOCITOMETRICO

• WBC (leucociti) • RBC (eritrociti) • Hgb (emoglobina) • Hct (ematocrito) • MCV, MCH,

MCHC, RDW-CV, RDW-SD

• PLT (piastrine) • PDW, MPV, PLC-R • Formula Leucocitaria: • Neutrofili • Linfociti • Monociti • Eosinofili • Basofili • Reticolociti • Eritroblasti • In unica provetta

L’ESAME EMOCROMOCITOMETRICO

• Sangue intero • Provetta: tappo lilla da 3 ml • Anticoagulante: K3 EDTA • Volume minimo: 1 ml • In presenza di coaguli l’analisi non potrà

essere eseguita.

• Non conservare in frigo

LE CELLULE CIRCOLANTI NEL SANGUE

SENZA NUCLEO: Eritrociti Piastrine

NUCLEATE:

Granulociti Neutrofili Eosinofili basofili Linfociti Monociti

LE CELLULE CIRCOLANTI SENZA NUCLEO

ERITROCITI: - sono senza nucleo poiché lo hanno espulso durante i processi

maturativi midollari

- spendono tutta la vita in circolo per 120 giorni - stabilità nel prelievo a T. ambiente : 4 giorni PIASTRINE: - sono senza nucleo e risultano dalla frammentazione citoplasmatica

dei precursori

- trascorrono tutta la vita in circolo per 8-10 giorni - stabilità nel prelievo a T. ambiente: 4 giorni

PCDPS

Metodo delta check

Viene inserito su alcuni parametri per valutare se la variazione del dato rispetto a quello precedente può essere compatibile I parametri controllati con il

delta check

: •

MCV = 10 %

•Emoglobina = 20 % •Piastrine = 50 %

INTERFERENZE SUL CONTEGGIO DEGLI ERITROCITI

NEGATIVE POSITIVE

 

Eccessiva stasi venosa durante il prelievo Mancata o difettosa miscelazione del campione

   

Agglutinazione eritrocitaria da autoanticorpi Pan-agglutinazione da anticorpi EDTA-dipendenti Emolisi (in vitro, in vivo,….) Prelievo eseguito in prossimità di infusione venosa

INTERFERENZE SUL CONTEGGIO DELL’EMOGLOBINA

POSITIVE:

 

Presenza di leucocitosi vere di entità molto rilevante Torbidità del plasma dovuta a:

– elevata concentrazione di trigliceridi – nutrizione parenterale (Intralipid) – iperbilirubinemia – componenti monoclonali (per reazione col lisante) – Crioglobuline – Aumenti policlonali delle globuline sieriche

INTERFERENZE SUL CONTEGGIO DELLE PIASTRINE

PSEUDOPIASTRINOPENIA:

   

Prelievo difficoltoso Presenza di anticorpi EDTA-dipendenti Satellitismo piastrinico Presenza di piastrine giganti

PSEUDOTROMBOCITOSI:



Artefatto dovuto a interferenza da microciti, frammenti eritrocitari o leucocitari, parassiti intracellulari, emoglobinuria

La

pseudopiastrinopenia

si verifica in vitro al momento del prelievo o nella provetta e riconosce due meccanismi fondamentali  L’

agglutinazione

delle piastrine, che è un fenomeno passivo spesso mediato da anticorpi: pseudopiastrinopenia da anticorpi EDTA- dipendenti.

Ha andamento tempo e temperatura- dipendente  L’

aggregazione

piastrinica , fenomeno attivo secondario all’attivazione funzionale delle piastrine stesse: pseudopiastrinopenia da prelievo non corretto

PSEUDOPIASTRINOPENIA

Nel caso di PSEUDOPIASTRINOPENIA EDTA dipendente si consiglia la ripetizione del prelievo con anticoagulanti diversi: EMO 2 : conteggio piastrinico su provetta contenente Na-Citrato (tappo azzurro) EMO 3 : conteggio piastrinico su provetta contenente Li-Eparina (tappo verde)

LE CELLULE CIRCOLANTI NUCLEATE

GRANULOCITI ( PMN ): - hanno il nucleo - non si dividono e quindi non si moltiplicano - trascorrono 10-12 ore in circolo poi passano ai tessuti dove vivono da alcune ore ad alcuni giorni, svolgendo funzione antibatterica, senza più tornare nel torrente ematico Stabilità nel prelievo a T . ambiente : - Neutrofili: 3-12 h - Eosinofili : 12 h – 6 g.

- Basofili : 2 h – 2 g.

LINFOCITI: -vivono da pochi giorni a molti anni -hanno il nucleo e si moltiplicano intensamente -viaggiano continuamente attraverso il sangue, la linfa e gli

organi linfoidi

-la permanenza in circolo rappresenta solo una parte della loro

vita

-sono responsabili della competenza immunitaria -Stabilità nel prelievo a T. ambiente : 3 h – 4 giorni -MONOCITI: -sono le cellule del sangue di dimensione maggiore -sono i precursori dei macrofagi (dopo un’emivita di 24 ore

migrano nel tessuto connettivo dove diventano macrofagi ed hanno un’intensa attività fagocitaria)

-Stabilità nel prelievo a T. ambiente : 2-12 h

INTERFERENZE SUL CONTEGGIO DEI LEUCOCITI

PSEUDOLEUCOCITOSI:

 

Lisi incompleta dei globuli rossi Presenza di

– eritroblasti – crioglobuline – aggregati piastrinici – filamenti di fibrina – microrganismi – paraproteine – lipemia

PSEUDOLEUCOPENIE:



Autoanticorpi che provocano agglutinazione leucocitaria, in alcuni casi EDTA-dipendente

LA VES

(VELOCITA’ DI ERITROSEDIMENTAZIONE)

• Sangue intero • Provetta: tappo nero (con camicia)

da 1 ml

• Anticoagulante: Na-Citrato (rapporto

1:5)

• Attendere fino a completo

riempimento

• Applicare l’etichetta col bar-code

sull’involucro esterno

• Stabilità del campione a T. ambiente

4 h. A 4° è stabile fino a 6 h.

• In caso di campione insufficiente o

coagulato l’analisi non potrà essere eseguita.