Transcript 内皮细胞起源的内源性抗炎因子Del-1在炎症相关的肾上腺功能紊乱中

Role of the Endothelial-Derived
Endogenous Anti-Inflammatory Factor Del-1 in
Inflammation-Mediated Adrenal Gland
Dysfunction
内皮细胞起源的内源性抗炎因子Del-1在炎症相
关的肾上腺功能紊乱中的作用
汇报人：王淳
2013.9.10
Role of the Endothelial-Derived Endogenous AntiInflammatory Factor Del-1 in Inflammation-Mediated
Adrenal Gland Dysfunction
Waldemar Kanczkowski,* Antonios Chatzigeorgiou,* Sylvia Grossklaus,
David Sprott, Stefan R. Bornstein,* and Triantafyllos Chavakis*
Department of Internal Medicine III, Technical University Dresden,
D-01307 Dresden, Germany
Endocrinology, March 2013, 154(3):1181–1189
IF :4.993
一、实验背景
二、实验目的
三、实验方法
四、实验结果
五、讨论
实验背景
• 脓毒症是来源于侵袭性感染和机体对感染的
不适当的反应的一个复杂的综合症状。
• 脓毒症期间HPA轴等应激系统广泛被激活，
促进垂体释放ACTH和肾上腺皮质释放皮质醇。
但是病情严重的患者破坏了肾上腺自我平衡
的适应性和糖皮质激素产生的增加，特别是
在严重疾病的慢性期或迁延期血浆ACTH与总
皮质醇水平是不相称的。
• 虽然肾上腺功能不全与高死亡率相关，但是
脓毒症引起的肾上腺功能不全机制仍不清楚。
• 在脓毒症期间炎症反应会引起致命的多器
官衰竭。
• 白细胞粘附于内皮细胞及外渗主要由白细
胞整合素介导的，Del-1是内皮细胞维持自
我稳态的一个重要因素。
• 内皮细胞功能紊乱是脓毒症相关的器官衰
竭的重要特征，而肾上腺是一个血供丰富
的器官，因此推测脓毒症期间，肾上腺内
皮细胞稳态的破坏可能引起肾上腺功能紊
乱。
实验方法
• 建立全身炎症反应综合症（SIRS）动物模型
选C57BL/6野生型和Del-1敲除小鼠小鼠（1012个月），LPS溶于PBS后腹腔注射，于注射
后0h，3h，24h处死。
• ELISA法检测血浆皮质酮和ACTH浓度。
• 半乳糖苷染色检测内源性Del-1表达。
• 免疫荧光和缺口末端标记。
• 人肾上腺皮质初代细胞的培养
成人（50-75岁）诊断肾癌，行肾癌根治
术后取肾上腺组织，提取肾上腺初代细胞。
Real-time PCR
检测小鼠Del-1，IL-1β，TNF，ICAM-1，VCAM1，PGRP，MIF，MCP-1 mRNA
图1.A 小鼠不同部位Del-1的mRNA表达
B 人不同细胞中Del-1的mRNA表达
C 半乳糖苷染色定位Del-1表达，主要位于肾上腺包膜下
D 免疫荧光对肾上腺脉管系统染色
图2.注射不同浓度LPS及注射后不同时间点Del-1的变化
图3.A 野生小鼠与Del-1敲除小鼠HPGRP表达的对比
B和C 野生小鼠与Del-1敲除小鼠HE染色的对比
图4.不同时间
点Dex-1敲除
小鼠与野生小
鼠不同炎症因
子RT-PCR结果
图5.野生小鼠和Del-1敲除小鼠术后不同时间
血浆皮质酮和ACTH
图6.缺口末端标记法（TUNEL）检测不同小鼠肾上腺
细胞凋亡
实验结果
1.在小鼠和人类肾上腺都存在Del-1
2.LPS减少了Del-1的表达
3.Del-1缺失增强了肾上腺炎症反应
4.Del-1敲除小鼠证明LPS注射后24小时HPA轴
活性降低和肾上腺细胞凋亡增加
讨论
• Del-1在SIRS中不只与炎症、白细胞聚集和细
胞凋亡相关，还与HPA轴修复功能相关。
• 由于Dex-1缺失引起肾上腺炎症反应的增加
导致与野生小鼠相比Dex-1敲除小鼠在LPS处
理后24小时肾上腺细胞凋亡明显增加并且
血浆皮质酮明显下降。
• IL-1β和TNF可能促进产生类固醇细胞的凋亡。
• Del-1对于肾上腺炎症反应起到重要的调节
作用
• 在全身炎症反应初期，血浆皮质酮与垂体
分泌的ACTH是紧密相关的，然而在Del-1敲
除小鼠中注射LPS后24小时ACTH水平下降，
除了局部炎症和凋亡意外，HPA轴功能失调
导致皮质酮产生减少也起到重要作用。
谢谢！