Transcript 3. előadás

NMR spektroszkópia
(vegyész mesterkurzus: VEMKSI 4312S)
Polarizáció-átvitel dipolárisan csatolt
magok között:
- mag Overhauser hatás (NOE)
- csere-spektroszkópia (DNMR)
(55 ábra)
Szalontai Gábor 2014 november 5.
Cél = térszerkezet vizsgálat
Alapja: mágnesezettség-átvitel = polarizáció-átvitel
• Magtávolságok
becslése, mérése
• Érzékenységnövelés
(13C, 29Si, …103Rh, stb.
magok mérése)
• Segítség a
hozzárendelésben
Mágnesezettség (polarizáció) átvitel:
eredendő jelerősség (1H vs. 13C magpár)


H
 4

négyszer annyi proton mag
van az alsó szinten mint a 13C !
C
DH
4
DC

a proton négyszer olyan erős
dipól mint a 13C !
H
4
C

a protonok négyszer olyan
gyorsan precesszálnak mint a 13C -k!
tehát 4*4*4 = 64 = 3 -szor erősebb lesz
proton jele!
13C
Ráadásul: mivel a
természetes
előfordulás csak 1,1 %.


S
S
 1  1
64 x100
6400
H
13
C
1
a
Elvi maximumok
(besugárzott mag : 1H)
Mért mag (X)
13C
15N
103Rh
Giromágneses állandó, 
[rad T-1 s-1]10-7
6,726
-2,711
-0.84
Max. NOE hatás
I=Io(1+H/2X)
2.99
-3,94
-14,89
Max. polarizáció átvitel
I=Io| H/X|
3.98
9,87
31,78
4.2 Relaxációs folyamatok T1 és T2
z
idõ
Mo
y
Emlékeztető (1): a
relaxáció és mérése
y
x
= 0
B1 90ox

x
z
Mo
y
M z  M 0 1- e
Mo
y
y
-Tt 1

x
x
x
z
M<Mo
y
y
y
Inverzió
180o(x)
x
x
x
z
M<Mo
1
y
x
Beolvasás
90o(x)
y
y
x
x
z
M=Mo
Mxy=0
y

y
x
x
x
1
T1 időállandóval
beállás az
energiaminimumra
T2 időállandóval
beállás az
entrópiamaximumra
Az inverzió
(átfordítás) óta
eltelt t idő
4.5 Relaxációs mechanizmusok
(kis, helyi mágneses terek szükségesek)
T1SC
T1
T1DD
Q
T1 E
Emlékeztető (2): a
relaxációs
mechanizmusok

M z  M 0 1- e
-Tt 1

T1mért = teljes elfolyás
T1DD = dipoláris hozzájárulás ~ 1/rnn6
T1SC = skaláris csatolási hozzájárulás ~ J2
T1CS = kémiai árnyékolási hozzájárulás ~ Bo2*CSA2
T1Q = kvadrupoláris hozzájárulás ~ CQF2
T1E = elektron-mag relaxáció ~ 1/rne6
1
T1mért

1
T1DD

1
1
1
1



 ...
SC
CS
Q
E
T1
T1
T1
T1
Csak a dipoláris
mechanizmus
felelős a NOE
effektusért!
4.4 A relaxációs folyamatok forrásai






Emlékezzünk: a spontán emisszió valószínűsége ~ 3!!
A Larmor frekvenciához közel eső frekvenciájú kis,
helyi mágneses terekre van szükség (indukált emisszió)!
J()
hosszú c (o > 1/c)
közepes c (o ~ 1/ c)
rövid c (o < 1/c)
o = 2 = Bo
J() = spektrális sűrűségfüggvény (frekvenciaeloszlás)
c = molekuláris rotációs korrelációs idő (~10 -10-12 sec)
Emlékeztető (3).
Feltétel olyan
molekuláris
mozgások
megléte,
amelyek
frekvenciája a
Larmor
frekvenciák
tartományába
esik.
Példa nagy molekulára:
ciklodextrin
OH (3)
OH (2)
(-D-glucopyranose)-n
2
3
5
1
4
CH2-OH (6)
-CD : 174 Å3
-CD : 262 Å3 -CD : 427 Å3
alfaCD
alfaCD
alfaCD
alfaCD
alfaCD
alfaCD
alfaCD
3
3
5
8
11
9
13
1
1
1
1
1
1
1
e:\Avance400
e:\Avance400
e:\Avance400
e:\Avance400
e:\Avance400
e:\Avance400
e:\Avance400
dosy
dosy
dosy
dosy
dosy
dosy
dosy
Scale : 0.6509
Scale : 0.9159
Scale : 4.5825
Példa eltérő méretű
molekulák (-CD és etanol
(ms= 46 ) keverék)
relaxációja
 
M z  M 0 1- e
-Tt 1
t megfelelő
megválasztásával
elérhető, hogy csak a
gyorsabban relaxáló
molekula (esetünkben
az -Ciklodextrin
ms=974) jelei
látszanak!
3.6
3.4
3.2
[ppm]
A mag (Nuclear) Overhauser
(NOE) jelenség: szelektív vagy
szélessávú besugárzás hatására
bizonyos magok jeleinek
intenzitása megváltozik !!!
(valójában a mag relaxáció egy válfaja,
eredetileg elektron-mag párokon
tapasztalta Overhauser)
NOE jelenség: végy egy dipolárisan csatolt I,S magpárt
(DIS > 0 Hz) (4N mag) és alkalmazz szelektív telítést (S)!
N- d
S 1S
N
I1I
Dm átme-
egyen
S
netek súlyban telítése
után
N
I1I
S 1S
1
I
d
d
1
S
d
0
0
,

0
d

,

d
d
Nd
N- d/
S 1S
N-d/
I1I
Nd/
I1I
S 1S
Nd/
A NOE lényege: S mag besugárzása következtében
fellépő I mag betöltöttség-szint változás
(inkoherens polarizáció-átvitel)
A NOE mértéke:
W2 - W0
 S I  
2W1  W2  W1
W0, W1 és W2 a zéró-, az egy- és a két-kvantumos
relaxációs folyamatok valószínűségét jelentik
NOE = f(relaxációs szintek = 1/sI
Az átmenetek valószínűsége a szintek betöltöttségkülönbségével arányos, egy-kvantumos átmenet
esetén ez:
I ,S
1
W
3 C
~ 6
2
2
r 1  I ,S C


Ahol r az I és S magok távolsága
C a molekuláris korrelációs idő
I és S az I és S magok Larmor frekvenciái
NOE = f(relaxációs szintek = 1/sI
Az átmenetek valószínűsége a szintek betöltöttségkülönbségével arányos, zéró-kvantumos átmenet
esetén ez:
2 C
W ~ 6
r 1  I -S
I
0


2
2
C
Ahol r az I és S magok távolsága
C a molekuláris korrelációs idő
I és S az I és S magok Larmor frekvenciái

NOE = f(relaxációs szintek = 1/sI
Az átmenetek valószínűsége a szintek betöltöttségkülönbségével arányos, két-kvantumos átmenet
esetén ez:
12 C
W ~ 6
r 1  I S
I
2


2
2
C

Ahol r az I és S magok távolsága
C a molekuláris korrelációs idő
I és S az I és S magok Larmor frekvenciái
Emlékeztető: egy- és több-kvantum
koherenciák: egyszerűsített fizikai kép
(AX rendszer)
SQ: DM= +/- 1,
ezek
észlelhetőek...
A
X
A + X
MQ: DM= +/- 2, 3, ...
mindig
antifázisúak és
emiatt nem
észlelhetőek...
Több-kvantum koherenciák tulajdonságai
• A rendűséggel (p) arányosan változnak az
átmenetek frekvenciái (p*f1). Ahol f1= a gerjesztő rf
tér frekvenciája.
• Ennek megfelelően változnak a fáziscsúszások is a
gerjesztő impulzus szögéhez képest (p*f1)…
• A zéró-kvantumos átmenetek függetlenek ettől a
hatástól.
• Gerjesztési eljárás: 90o-t-180o-t-90o (p=2, 4, 6, ...stb)
A homonukleáris NOE maximális
értéke (ha 222 << 1)

maximum
S
W2 - W0
I  
 0,5
2W1  W2  W1
Független a két mag
távolságától!!?
W0, W1 és W2 a zéró, egy és két-kvantumos
folyamatok valószínűségét jelentik
A heteronukleáris NOE maximális
értéke (ha 222 << 1)

maximum
S
W2 - W0
H
I  
 0,5
2W1  W2  W1
X
W0, W1 és W2 a zéró, az egy és a két-kvantumos
folyamatok valószínűségét jelentik
A NOE függése a molekuláris mozgásoktól:
a molekulaméret, az oldószer (viszkozitás),
és a hőmérséklet hatása
NOE maximum
mw = 1000-2000
között W2~ W0
ROESY
0,5
C >> 1
-1,0
C << 1
mw > 2000
kis és közepes
molekulák W2> W0
W2< W0
NOESY
A mért NOE-kból számolható (becsülhető) magtávolságok
Két-spin esetek:
A
B
C
1
 i S 
 p*
 

 C

r6
 IS

telítés
ahol
p* = egyéb egy-kvantumos dipoláris relaxációs hozzájárulás
C = molekuláris korrelációs idő
Relatív magtávolságok két eltérő molekulán mért NOE értékek alapján
csak akkor összevethetőek, ha ....
C azonos a két mintában
teljesül a C << 1 feltétel
p* közel azonos a két molekulában
A
B
+
telítés
Több-spin esetek egy molekulán belül:
+
C
-
A(B) = C(B) = 0,5 is lehet!
A növekedés léte még nem elegendő bizonyíték
a két mag „közelségére” ...
A növekedés hiánya még nem elegendő bizonyíték a két mag „távoliságára” ...
Egyensúlyi NOE hatások mérése : kvázi folyamatos besugárzással
egy új egyensúly jön létre!
pulzus
1H
akvizició
~ 5*T 1
magtávolságok?
a kiválasztott átmenet telítése
A NOE felépülést mérő eljárások: a besugárzás időtartama rövid
a relaxáció idejéhez képest!
"Csonkolt" NOE-k mérése (TOE)
pulzus
1H
(T=truncated)
akvizició
< T1
a kiválasztott átmenet telítése
relatív
magtávolságokat
szolgáltat!
"Tranziens" NOE-k mérése egy dimenzióban: a besugárzás szelektív
és sokkal rövidebb mint a relaxációs időállandó!
pulzus
90 o
"kemény"
1 H 180 o
akvizició

NOE felépülési
szintet mér, ami
~ r 6 IS
a kiválasztott átmenet szelektív
átfordítása egy 180 o -os pulzussal
"Tranziens" NOE-k mérése két dimenzióban (NOESY kísérlet)
90 o
pulzus
90 o
90 o
t1
M
keveredési idõ ~ T 1
akvizició
f(  M ~ r 6 IS
Emlékeztető: a kettős-rezonancia kísérletek (B1, B2) (I)
Szelektív spin-lecsatolás:
B2 = lecsatoló tér
HA
A
X
J AX
JAX
Y-C-X
HX
Azonnali
hatás!
B2/2 > J
Kettős-rezonancia kísérletek (II): szélessávú protonlecsatolás X {1H}:
HA
Y-C-X
~3
pulzus
13C
be
ki
akvizició
HX
NOE
1H
J(13C-1H)
pulzus
akvizició
13C
be
ki
NOE
1H
pulzus
13C
be
ki
akvizició
nincs
NOE!
5*T 1
1H
fenn:
középen:
lenn:
normál X spektrum
{1H}
protoncsatolt X spektrum
NOE nélküli X spektrum (mennyiségi kiértékelés)
Homonukleáris NOE kísérlet:
Ez is szelektív besugárzás:
B2 = szelektív tér
A
JAX
HA
X
J
AX
Y-C-X
HX
B2/2 > J
NOE növekedés vagy csökkenés
(T1 által szabályozott!)
Heteronukleáris NOE kísérlet:
max= 0,5*H/X
13C{1H}
1,98
31P{1H}
1,14
15N{1H}
-2,94
29Si{1H}
-0,52
2D eljárások: tranziens NOE mérése a molekula összes
magja között: NOESY = DQF-COSY
90o(x)
t1változó
tm keveredési idő
t2 állandó
90o(x)
B1(90o)x
Mz=Mcos2t1
COSY
B1(90o)x
Mx=Msin2t1
NOESY
2D NOESY
Csak a zéró-kvantumos zmágnesezettséget kell megőriznünk,
az egy- és két-kvantumos
koherenciák kidobandók pl. egy
nyolclépéses fázisciklus
alkalmazásával!
NOESY: nem kívánt mellékhatások, egyéb komplikációk
• A NOE csak a z-mágnesezettséget befolyásolja (zéró rendű, ZQC), tehát
érzéketlen az rf impulzusok fázisára (tehát a fázisléptetésre immunis!)
• Zéró rendű koherenciák azonban létrejönnek a (NOESY= DQF-COSY)
szekvenciában a J-csatolt magpárok között is! Ezektől kell
megszabadulni, hiszen ezek COSY keresztcsúcsokat produkálnak!
a COSY eredetű zeró
kvantumos (ZQC)
koherenciák intenzitás
változásai
Dm
Dm kis mértékű,
véletlenszerű
változtatása törli a
COSY eredetű
keresztcsúcsokat!
NOE
keveredési idő, m
A keveredési idő, m helyes megválasztása: mennyi időt
hagyjunk az átvitelre?
NOESY
keresztcsúcs
intenzitások
kis
molekulák:
gyors
molekuláris
mozgás
A kísérlet kulcsa Dm
helyes megválasztása:
kis molekulák (< 500 D)
esetében a becsült T1 körüli (0.5
– 2.0 s) érték általában
megfelelő.
Nagyobb molekulák esetében
(1000-2000 D között) a jel
elveszhet.
Igazán nagy molekulák (a
negatív NOE-k tartománya)
esetén 0.5*T1 az ajánlott érték!
keveredési idő, m
nagy molekulák,
viszkózus oldatok:
lassú molekuláris
mozgás
Tranziens NOE: kinetika, mérés a lineáris
növekedés tartományában
I ,S
2
W
NOE
-W
I ,S
0
~
4
NOE~1/rIS-6

C
6

1
2 2
6
1  40 C
rIS


NOESk’ *rIS-6*C
a lineáris növekedés tartományában a
magok izolált spin-párként
viselkednek, ezt lehet kihasználni a
távolság mérésére!
NOE= kereszt-relaxációs szint
Dm
Vége az első résznek …
Most néhány alkalmazás következik
és az alapvető 1D és 2D NOESY és
ROESY szekvenciák szintén
alkalmazási példákkal fűszerezve.
Alkalmazási példák: magtávolság, rAB mérés
- ha a molekuláris korrelációs idő, c ismert, rAB
közvetlenül számolható (c meghatározható pl. a 13C
relaxációs idő mérésekből)
- gyakoribb megoldás egy ismert rXY
referencia távolság használata (pl. két
metilén proton távolsága állandónak
tekinthető ~1.4 Å)
ηA(B)/ηX(Y) = rAB-6 / rXY-6
Figyelem: dinamikus átlagot kapunk!
2D eljárás: NOESY példák (ciklosporin (undekapeptid) C6D6)
Gradiens-segített
fázisérzékeny NOESY
A keresztcsúcsok fázisa
ellentétes a
diagonálison levőkhöz
képest (csak a pozitív
NOE tartományban mw
< 1000 )
A kémiai csere (lásd
később) viszont a
diagonálissal azonos
fázisú jeleket hoz létre,
ennek alapján ezek
könnyen
megkülönböztethetőek!
2D eljárás: NOESY (pravastatin, noesy-gp-ph)
CH3
H3N
+
CH3
H3C
H3C
CH3
H3C
OH
CH3
O
H3C
O
HO
O
CH-O
3
CH3
Gradiens-segített
fázisérzékeny NOESY
A keresztcsúcsok fázisa
azonos a diagonálison
levőkével
(csak a negatív NOE
tartományban van így,
mw = 409 !!)
)
2D eljárások: NOESY példák (szekvencia: noesy-gp-ph)
31P-31P térbeli korreláció
NOESY-GP-PH
szélessávú proton
lecsatolással:
A főcsúcsok (a 193Pt-hoz
kötött 31P magok) nem
mutatnak térbeli
közelséget vagy cserét!
Csak a 195Pt -31P
szatellit jelei mutatnak
egymással
keresztcsúcsokat,
ezek feltehetően a 195Pt
spin-állapotváltozásai
(relaxáció) miatt
fellépő cserekeresztcsúcsok!
A fázisuk megegyezik
a diagonálison lévő
jelekével!
1D NOESY szekvenciák: differencia spektroszkópia
2.
1.
tm keveredési idő 90o(x)
t2 állandó
180o(x)
szelektív
átfordító
impulzus
1 - 2 = differencia spektrum =
NOE hatások
Általában pontos mag távolság meghatározásra használják, több keveredési idővel
veszik fel a spektrumokat, amelyek egy referencia („üres” helyen gerjesztett)
spektrumot is magukba foglalnak ...
A differencia –spektroszkópia összes hátránya jelen van!
Szelektív differencia NOE vs.
1D gradiens NOESY
tm keveredési idő
Double Pulse Field Gradient
Spin Echo:
- kiválasztja (előjelét
átfordítja) a kérdéses
90o(x)
szelektív
rezonanciát és csak az ebből
impulzus
származó polarizációt tartja
meg, a többit a gradiensek
szétszórják! Csak a
növekedést mutatja ott, ahova
180o(x)
a polarizáció került
szelektív
o
o
90 (x)
90 (x)
90o(x)
differencia spektroszkópia
impulzusok
nélkül! A viszonylag hosszú
m (>300 ms) alatt a
„szétszórt” mágnesezettség is
relaxál, ezért nem kívánatos zkomponensek jelennek meg,
„tiszta
ezeket egy négylépéses
fázisú”
gerjesztési fázisciklus (EXORCYCLE)
kiszűri, mert nem teljes,
profilt
z-gradiensek
eredményez! hanem csak kis jelekről van
Shaka et al. J.Magn.Res. 125, 302-324 (1997)
szó.
180o(x)
Tranziens vs. egyensúlyi NOE
(a tranziens eljárás sajátságai)
-a növekedés igen erősen függ a használt
keveredési (csere) időtől,
-a növekedés függ a kiválasztott (besugárzott)
jel inverziójának (átfordításának)
pontosságától is,
-a százalékos növekedés számítása nem
egyszerű, az átfordított jel itt nem használható
egyszerű referenciaként és az inverziót is
skálázni kell 100 %-ra,
-a növekedés százalékos abszolút értéke kisebb
lesz mint az egyensúlyi NOE esetében, de
általában jobban észlelhető!
Tranziens vs. egyensúlyi NOE: 1D példák (1)
pravastatin (tranziens NOE)
CH3
H3N
+
CH3
H3C
H3C
CH3
H3C
OH
CH3
O
H3C
O
HO
O
CH3
CH-O
3
A fázisciklus miatt
fellépő kivonási
maradék (selnogp
szekvencia)
(180o, pulzus forma = GAUSS 1.100)
szelektív besugárzás: 5.5 ppm, 88 ms, 67 dB,
gerjesztett tartomány kb. 25 Hz!
NOESY vs. Rotating frame nOE
SpectroscopY
NOE maximum
mw = 1000-2000 D
között W2~ W0
ROESY
0,5
ROESY
C << 1
-1,0
kis és közepes
molekulák W2> W0
NOESY
log(wC)
wC >> 1Az átmeneti
tartományban a
mw > 2000
leghasznosabb, ahol a
W2NOESY
< W0 keresztcsúcsok
nagyon kicsik, változó
előjelűek vagy teljesen
hiányoznak!!
ROtating frame noE SpectroscopY
• A hagyományos NOESY mérés (z polarizáció
változást mérünk) legnagyobb problémája, hogy
oC ~ 1 közelében (1000- 2000 D) nincs jól mérhető
jel!
• Viszont a spin-lock tér* (tranzverz polarizáció
létezik) körülményei között a molekula méretétől
függetlenül gyakorlatilag csak növekedés van ,
nagyon nagy molekulákra a maximális ROE érték
az elméleti NOE kétszerese! Lásd a keresztpolarizációra vonatkozó alábbi összefüggést!
C >> 1
I ,S
2
W
-W
I ,S
0
~
4

3
1    
2 2
0 C
2
C

6
IS
r
ROESY: a hagyományos 1D eljárás
tm keveredési idő
90o(x)
t2 (állandó)
180o(x)
szelektív
impulzus
B1 << Bo
tehát
1C << 1
Az ún. spin-lock tér
(B1) ideje alatt (keveredési
idő) változnak meg a Zszint betöltöttségek a
dipolárisan csatolt magok
között!
ROtating frame noE SpectroscopY: mit jelent
a forgó koord. rendszer és a spin-lock tér?
• Spin-lock tér: a Hartmann-Hahn feltétel teljesülése alatt
a mágnesezettség az Y-tengely mentén helyezkedik el …
180o(x)
szelektív
impulzus
90o(x)
NOE kísérlet a
forgó koordináta
rendszerben: ROE
(tranzverzális)
szélessávú
gerjesztés
tranziens NOE
kísérlet:
(longitudionális)
Rotating-frame Overhauser SpectroscopY: 2D
90o(x)
t1 idő
m spin-lock
keveredési idő
Spin-lock tér y
180o(y)
Spin-lock tér y
(homonukleáris
spin-echo
kísérlet)
d
d
n
A protonok azonos
effektív teret
éreznek, csak a
homonukleáris J és
D-csatolások
aktívak,
így polarizációátvitel játszódik le a
dipolárisan csatolt
spinek között!!
Rotating-frame Overhauser SpectroscopY: zavaró jelek
- COSY keresztcsúcsok (J-csatolás).
- TOCSY átvitel a J-csatolt magok
között a spin-lock tér ideje alatt.
- rf off-rezonancia hatások miatt
keresztcsúcs gyengülés lép fel.
ROESY vs. NOESY : pravastatin só mw= 409 (anion)
CH3
H3N
+
CH3
H3C
H3C
CH3
H3C
OH
CH3
O
H3C
O
HO
O
CH3
CH-O
3
ROESY pravastatin 400 ms DMSO ns=8 t=5 h d1=4s
TD=512 (F1)
A
keresztcsúcsok
fázisa ellentétes
a diagonálison
lévő jelekével!
Kivéve a kémiai
csere
következtében
fellépő
keresztcsúcsokat
!
NOESY pravastatin só: 400 ms DMSO ns=8 t=2,5 h d1=4s TD=256 (F1)
A keresztcsúcsok
fázisa azonos (?) a
diagonálison lévő
jelekével, annak
ellenére, hogy
viszonylag kis
molekuláról van
szó (400-500 D)!
Szokatlan eset!!
Gyengék a jelek,
különösen az F1
dimenzióban.
A cserekeresztcsúcsok itt
nem
azonosíthatóak!
Kétdimenziós csere-spektroszkópia
(EXchange SpectroscopY, EXSY)
• A kémiai környezet változása következtében változó
mag környezet természetesen befolyásolja a spektrumot.
• Hasonlóan a NOE hatásokhoz a csere is csak a zmágnesezettséget befolyásolja (zéró rendű), tehát
érzéketlen az rf impulzusok fázisára!
• A detektálás feltétele: a folyamatnak lassúnak kell lennie
a vizsgált mag NMR időskáláján (külön jeleket kell
látnunk), de nem szabad túl lassúnak sem lennie, mert a
relaxáció korlátot szab a jel detektálásának.
• Ez azt jelenti, hogy a detektálható cseresebességek, kex
kb. a 103- 10-3 s-1 tartományban vannak!
A dinamikus NMR jelenség
A spin-állapotok véges időtartamának hatása az NMR jelek
félérték-szélességére.
(a) csere nélküli állapot, csak T2 által meghatározott
(b) csere által megszélesített jelalak (egy véges időtartamú
állapot energiája nem határozható meg pontosan)
2D eljárások: csere mérése a molekula összes magja
között: szekvencia = DQF-COSY = NOESY = EXSY
90o(x)
t1változó
90o(x)
tm (keveredési) csere
idő
akvizició
B1(90o)x
Mz=Mcos2t1
COSY Mx=Msin2t1
B1(90o)x
EXSY = NOESY
2D eljárások: csere-spektroszkópia (EXSY)
(példa az azonos fázisra)
Cserekeresztcsúcsok:
fázisuk azonos a
diagonális
fázisáéval!
NOEkeresztcsúcsok:
ezek fázisa is
azonos a
diagonálissal, mert
a molekula mérete
miatt ( ~ 5000 D) a
negatív NOE
tartományban
vagyunk!
2D eljárások: csere-spektroszkópia (ROESY-EXSY)
(példa az eltérő fázisra)
Cserekeresztcsúcsok:
fázisuk mindig
azonos a
diagonálissal!
A ROEkeresztcsúcsok
fázisa mindig
ellentétes a
diagonálissal.
Ajánlott irodalom
NOE, NOESY:
• D.Neuhaus and P.Williamson: The NOE in
Structural and Conformational Analysis
VCH Publisher, 1989 Weinheim
Dinamikus NMR:
• Jackman-Cotton 1975, Academic Press
• Delpuech 1995, Wiley