Transcript 造血干细胞移植
应用异基因干细胞移植进行 细胞免疫治疗 Richard Champlin, M.D. 造血干细胞移植 Preparative Regimen D D D D HSCT R R RL RL D R D D D D 异基因造血干细胞移植有效，但对血液系统恶性肿瘤的毒性治疗与高发的 并发症和死亡率相关 (10->50%), 限制其用于无合并症的年轻患者 移植物抗肿瘤 异基因 SCT • AlloSCT的很多好处是由于GVL 的免疫效应; 因此，大剂量根治是不必要的. • 低剂量非清髓预处理方案足以防止排斥. 我 们假设减低剂量，非清髓异基因足以可以减 低毒性并使老年患者和伴有重要并发症的 患者获得成功. 非清髓移植 PreparativeDsc DT Regimen D DT DT DT DT +DLI HSCT R R RL RL R Recipient DNK RL Dsc DT R Donor Mixed Chimera DT DB Dsc DNK D D Complete Chimera 0 1.0 0.8 0.6 0.4 Event-free probability 0.6 In remission, PB.blast=0 Active Disease, PB.blast=0 Active Disease, PB.blast>0 0.2 0.4 0.2 In remission, PB.blast=0 Active Disease, PB.blast=0 Active Disease, PB.blast>0 20 40 p<0.0001 0.0 0.0 Survival Probability 0.8 1.0 异基因 HSCT 治疗 AML 的结果 60 Time(weeks) 80 100 120 0 p<0.0001 20 40 60 Time(weeks) 80 100 120 HSCT的主要问题 • 移植后自然产生的抑制物抗肿瘤作用相 对较弱 • GVM 与 GVHD相关 • 复发仍是失败的主要原因 抑制物抗肿瘤的靶点 Allo-Specific Broadly expressed minor histocompatibility antigen (GVHD) Lineage restricted minor histocompatibility antigen (G-vs-hematopoietic), or Redirected CAR T-cells vs CD19 Malignancy Specific Idiotype, Fusion peptide of translocation (bcr-abl) Overexpressed normal cellular constituent (Proteinase 3, WT1, telomerase) 供者淋巴细胞数注 • 有效治疗复发的 CML, 对复发的AML 和 ALL 有效率低 • 有计划的DLI 研究显示提高GVM 效应 • 经常伴有 GVHD – 与相比数量和移植后时间相关 Suicide Switch • Genetically modify T-cells to introduce gene to induce apoptosis upon treatment with an activating drug • Herpes virus tyrosine kinase – activated with ganciclovir • Modified Caspace 9 自毁转换 12 AML抗原特异的免疫治疗 PR1-CTL are naturally enriched (0.1-0.4%) in fetal cord blood PR1-CTL PR1 peptide NE P3 PR1 Leukemia No AML Clinical trials with cord blood-derived PR1-CTL are ongoing for transplant recipients (AML, CML) Shared Resources Molldrem et al Flow Cytometry and Cellular Imaging Facility, Genetically Engineered Mouse Facility, Monoclonal Antibody Facility; Clinical Trials Support Resource AML 通过嵌合抗原受体(CARs)介入的变更的 T细胞特异性 TCR-complex Antibody a b ge ed z z Fab vL vH CL CH1 vH vL Chimeric antigen receptor 嵌合抗原受体 Cooper et al 嵌合抗原受体T-细胞 • T-细胞特异性变更 • 能够靶向非免疫靶点，组织/治疗特异抗原如 B 细胞淋巴瘤的 CD19 • 第一、二和三代的组成，包括共刺激分子 CD28, CD137 可以提高细胞的体内生存和增 殖 • 很好设计的 CAR 尚无 • 少数患者接受自体或异体CAR+细胞, 部分CR, 清除了 CD19+ 细胞 CAR+ T细胞杀死表达CD19的肿瘤 细胞 Tumor Time lapse bioluminescent imaging CAR 存在的问题 • 自体 vs. 异体 • 体内生存、归巢 • 毒性,应用含有 CD137的 CARs可致“细 胞因子风暴” • 时间/ 费用用于制造患者特异的产物 用于过继免疫“现成的” CD19-特异的 CAR+T细胞 Cooper et al NK 细胞 • • • • • 独特的一类淋巴细胞, 固有没有系统的组成 CD3- TCR-, CD16+, CD56+ 激活和抑制受体 (KIR) 介导抗肿瘤, 抗病毒l, BM 排斥 丢失配体假说调控的细胞毒作用 – Cw alleles that bind to KIR2DL1 have amino acid K at position 80. – Cw alleles that bind to KIR2DL2 or to KIR2DL3 have amino acid N at position 80 – Bw4 or Bw6, KIR 3DL1 amino acids at positions 82-83 • NK 再激活报道称可降低复发 (抗AML), 改善植入 (抗宿主 T-细胞), 降低 GVHD (抗树突细胞) 通过激活和抑制受体调控 NK 细胞反应 Farag S S et al. Blood 2002;100:1935-1947 Kill recipient APCs = protection from GvHD Donor alloreactive NK cells DC DC DC NK Lysis NK NK Lysis T TT T Kill recipient T cells = improved engraftment Lysis leukemia Kill leukemia = GvL effect Antigen-specific proliferatio CAR+Tcells Cell Culture Bags NK cells 制造 mbIL21-扩增的 xpansion of CAR+ Tcells egrated transposon on adiated K562-aAPC Wave Bioreactor Volume Reduction Biosafe Sepax Cryopreservation Cryopreserve in Infusion aliquots Busulfan Fludarabine Haploidentical Allo reactive NK Cells Allo match PBPC ATG 25