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DIPARTIMENTO DI SCIENZE E TECNOLOGIE
BIOLOGICHE CHIMICHE E FARMACEUTICHE
STEBICEF
Lo stress ossidativo:
l’esperienza Pro Longevity
Sonya Vasto1-3, Annalisa Barera3, Marta Di Carlo3,
Calogero Caruso2
Dipartimento STEBICEF1, Dipartimento DIBIMEF2 Università di
Palermo, IBIM-CNR Palermo3
STRESS OSSIDATIVO
Stress chimico indotto dalla presenza, in un organismo vivente, di un
eccesso
di
sull’ossigeno
specie
(reactive
chimiche
oxygen
reattive,
species,
generalmente
ROS),
centrate
secondario
ad
un’aumentata produzione delle stesse e/o a una ridotta efficienza dei
sistemi fisiologici di difesa antiossidanti.
Protezione
dalle malattie
Antiossidanti
Radicali liberi
Danno cellulare
(invecchiamento
e malattie)
STRESS OSSIDATIVO
Sbilanciamento dell’equilibrio tra pro-ossidanti e antiossidanti nell’organismo a
favore dei pro-ossidanti
PRO-OSSIDANTI
ANTIOSSIDANTI
Lo stress ossidativo è la conseguenza di uno squilibrio tra processi proossidanti e processi antiossidanti (Sies, 1991)
Radiazioni, farmaci, metalli pesanti
Fumo di sigaretta, alcool, inquinamento
Esercizio fisico inadeguato, sedentarietà
Infezioni ed altre malattie
Specie reattive 
Ridotta assunzione
e/o diminuita sintesi
e/o ridotta capacità di utilizzazione
e/o aumentato consumo di antiossidanti
Difese antiossidanti 
Danno cellulare
Danno tissutale
Danno d’organo
Danno sistemico
Malattie
cardiovascolari
Demenza,
M. di Parkinson
Invecchiamento
precoce
Infiammazioni,
tumori
Altre
malattie
Cosa favorisce la produzione dei radicali
liberi?
La
produzione
è
funzione
del
metabolismo
individuale, dell’alimentazione, dello stile di vita e del
carico di aggressioni che subiamo.
Gli aggressori:








Inquinamento
Fumo di sigaretta
Cattiva alimentazione
Eccesso di alcool
Eccesso di farmaci
Sovrappeso
Stress cronico
Vita sedentaria
Le difese
Tutte le forme di vita aerobiche hanno dei sistemi di
difesa o sistemi antiossidanti
 Enzimi: proteine complesse che
disattivano i radicali
dell’ossigeno
(superossido  superossido
dismutasi)
 Nutrienti: vitamine,
betacarotene, bioflavonoidi
forniscono elettroni per saturare
i radicali liberi
 Sistema di riparazione di danni
al DNA
Alimentazione
Il cibo come medicina quotidiana. Le sostanze
antiossidanti in natura sono oltre 5000 e potenziano il
sistema immunitario con cinque modalità:
1. Migliorano
le
comunicazioni
all’interno della cellula
2. Aumentano il numero di cellule
immunitarie
rendendole
più
attive
3. Rallentano e bloccano i radicali
liberi
4. Migliorano l’ambiente all’interno
del quale lavorano le cellule del
sistema immunitario
5. Agiscono
contro
l’invecchiamento riducendo il
deterioramento
a
livello
molecolare
Obiettivo dello studio
• Esaminare la relazione tra i alcuni marker
sierici\plasmatici\urinari dello stress ossidativo e
l’assunzione per 60 giorni dell’integratore a base di
uva
• Correlare i dati in vitro con i risultati ex-vivo
Framework
SAMPLING
30ml
20ml
Analysis
siero
Sangue
intero
Glicemia
Emocromo
Comet assay
con formula
Transaminasi
Creatinemia
Gamma-gt
Uricemia
Colesterolo T
C.HDL
C.LDL
PSA
Testosterone
LDL-ox
AGE
CBA
PMBC
Test di citotossicita
(MTS)
urina
Isoprostani
Reclutamento: risultati
Soggetti
Anno
2012-2013
n
Genere ( M\F)
50
25\25
ETA’ (xSD)
593
Peso (KgSD)
776
Altezza (mSD)
169,95
BMI (Kg/m2 ± SD)
27,33
TEST IN VITRO
Test in vitro di vitalità cellulare
Confronto tra PBMCs
e LAN
+ integratore
Confronto LANPBMCs
250
150
PBMCs
LAN
%
MTS assay
200
100
50
0
1ul
2,5 ul
5ul
10ul
20ul
TEST EX VIVO
Test CBA sierico
CBA = Crocin Bleaching Assay metodo di cinetiche
chimiche che valuta la capacità antiossidante
plasmatica
Parametri di chimica clinica
Comparazione lipidi sierici
LDL ossidate sieriche
LDL-ox misurate su siero con saggio ELISA, A b anti MDA
Prodotti di glicazione finale
AGE misurate su siero con saggio ELISA, Ab anti AGE
AGE stratificato per genere
Ossidazione del DNA
Ossidazione del DNA misurata su PMBC da sangue periferico
Conclusioni
Nello studio longitudinale l’integratore alimentare a base
di estratti di uva si è dimostrato capace in vivo di:
• Influenzare positivamente la concentrazione di LDL
ossidate ed il profilo lipidico delle LDL e colesterolo
sierico
• Di agire sulla concentrazione di AGE, specialmente nel
genere femminile ove si apprezzano i risultati migliori
• Di non essere tossico per le cellule ma bensì di
determinare un efficiente divisione cellulare su
linfomonociti periferici
• Di incrementare le potenzialità antiossidanti (CBA)