Transcript SSC

Traitement de la SSC par
Cellules Souches Mésenchymateuse (CSM) allogéniques?
D Farge, PHRC 2011
St Louis Hospital, AP-HP INSERM U 976,
Université Denis Diderot Paris 7, France
Pr J LARGHERO
Pr C JORGENSEN
Dr Luc SENSEBE
Pr JJ LATAILLADE
Pr Luc Mouthon
Dr MA SEVESTRE
Thérapie Cellulaire AP-HP Saint Louis, Paris
Immuno-Rhumatologie Hôpital Lapeyronie, Montpellier
Thérapie Cellulaire EFS, Tours
Thérapie Cellulaire CTSA, Hôpital Percy, Clamart
Médecine Interne
AP-HP Cochin, Paris
Medecine Vasculaire CHU Amiens
CSM: cellules stromales multipotentes
support de l‘hématopoièse
différenciation en ostéoblaste, adipocyte et chondrocyte
• Adhérentes (CFU-F)
• Fibroblast- like morphology
• (+) Molécules adhésion :
CD73, CD 90, CD105
•(-) Marqueurs hématopoïétiques
CD14/CD11a, CD34,
CD 45,CD19, HLA-II
Friedenstein,AJ Exp Hematol 1976 -> Horowitz and Le Blanc Cytotherapy, 2005
RATIONNEL POUR LE TRAITEMENT DES MAI ?
2. CSM produisent peptides,
cytokines, chémokines
1.
Cellules Souches:
Moelle osseuse
Tissu adipeux
Tissu osseux (périoste)
Sang cordon ombilical
Foie fœtal
Tissu musculaire
Auto renouvellement
+ capacités différentiation
SDF-1, PDGF, FGF-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL11, SCF, MCP-1, TGFb, M-CSF, GM-CSF
Hematopoïèse
Angiogénèse
Modulation RI
Interactions
cellulaires
Médecine Régénerative : reparation des tissus lésés ?
Immunomodulation : homing tissu inflammatoire puis effet antiinflammatoire
3. CSM : Régulation de la réponse immunitaire
CSM
(-) prolifération T
(-) prolifération et
cytotoxicité NK
Dépendante
de la dose
de CSM
Inhibition
entrée
en phase S
Par
contacts
cellulaires
contacts
Facteurs solubles
cellulaires
TGF-b
PGE2
Induction
IDO
de Treg
HGF
(-) prolifération et
de la différenciation B
Arrêt cycle
cellulaire
en phase
G0/G1
(-) différenciation et
maturation DC
↓ expression de
CD11c, CD83,
CMH classe II
↓ expression
Dépendant
facteurs
solubles
Dépendante de
facteurs solubles
PGE2
TGF-b
IDO
↓ IFN-g
chémokines et
chémotaxie
(CXCR4/CXCL12
CXCR5/CXCL13)
Liée à facteurs
solubles
IL-6
PGE2
M-CSF
↓ synthèse TNF-a,
IFN-g et IL-12
Arrêt du cycle
cellulaire
en phase
G0/G1
Cellules souches mésenchymateuses (CSM)
Aggarwal, Blood 2005
MSCs: action immunodulatrice
2 modèles expérimentaux MAI
1.
o
o
o
2.
o
o
Immunisation vis à vis AG étrangers:
AA ->PR, mais résultats encore controversés
EAE -> SEP, oui….
Diabète murin induit par STZ
A forte composante génétique :
MLR/LPR, BXSB pour LED murin
NOD and NOD/SCID pour diabète murin
FONCTIONS MSC des patients MAI ? (n < 100 )
• RA :
Papadaki H, Blood 2002 (26 pts): ↓frequency + ↑ apoptosis BM erythroid
progenitors and precursor cells due to ↑ TNF α
Kastrinaki Ann Rheum Dis 2007 : impaired clonogenic and proliferative potential
• SSC:
Del Papa N, Arthr Rheum 2006 (14 pts): no adipogenic /osteogenic differentiation
potential, ↓ long term hematopoiesis support and early senescence.
Cipriani P Arthr Rheum 2007: ↓ in vitro endothelial differentiation but normal
adipogenic/ osteogenic differentiation. Premature senescence ?
Larghero J Ann Rheum Dis 2007phénotype, prolifération (CFU-F)+bFGF,
différentiation, (-) CML, support hématopoieses
• SLE:
Papadaki H BJH 2001 (7 pts) : intrinsic deficits + altered haematopoietic support
• MS :
Papadaki H BMT 2005 : support N hematopoiesis, (-) T cell proliferation
• VARIA: 2 SLE + 3 RA + 1 Sjo + 2 PM/DM + 3 SSC
Bocelli-Tyndall C Rheumatology 2006 : Normal antiproliferative potential
CSM Normales : Sclérodermie Systémique (12 pts + 9 C):
phénotype, prolifération (CFU-F)+bFGF, différentiation, (-) CML, support hématopoieses
50
controls
CFC per well
40
patients
30
20
10
0
Controls
Patients
C1 C2 C3 C1 C2 C3 C1 C2 C3 C1 C2 C3 C1 C2 C3
week 1
week 2
week 3
week 4
week 5
C
O
N
T
R
O
L
S
SSc
MSCs
S
S
c
P
A
T
I
E
N
T
S
%PBMCresidualproliferation
ADIPOGENIC LINEAGE
120
B
100
80
60
40
20
0
1/250
1/50
1/10
1/2
MSC/PBMC ratio
OSTEOGENIC LINEAGE
Larghero J Ann Rheum Dis 2007
Des CSM à visée IMMUNOMODULATRICES
POUR TRAITER les MAI?
définition et expansion EBMT + International Society Cellular Therapies (ISCT)
• SSC:
n = 1 Christopeit M Leukemia 2007 41 yr female with advanced SSc.
Allogeneic (father) BM MSC => marked improvement“ 7 mth Follow Up
• Crohn‘s disease:
n = 6/8 Garcia-Olmo, Dis Colon Rectum 2005 fistulae
healed (adipose derived MSC) + ? Crohn‘s colitis Osiris, 2007
• Multiple Sclerosis:
n = 10 pts Mohyeddin- Bonab M, Iran J Immunol 2007
EDSS 3.5-6, intrathecal autologous cuture expanded MSC. mean FU 19 mths.
1 improved , 4 no change,
5 progressed. Feasible
Et suivant....
PHRC 2011 Etude de phase I-II muticentrique.
TRAITEMENT DES SCLERODERMIES SYSTEMIQUES SEVERES
REFRACTAIRES PAR INJECTION DE CSM ALLOGENIQUES.
•
•
•
•
Objectif principal. Analyser la faisabilité et la tolérance de l'administration de CSM
allogéniques dans le traitement de la SSc diffuse sévère ou rapidement progressive et
réfractaire aux traitements classiques par cyclophosphamide préalable :
Critère de jugement principal. Tolérance immédiate Estimer le pourcentage de patients
chez qui au moins un des critères suivant apparait : tolérance immédiate selon les effets
secondaires définis par les normes CTCAE (Common Terminology Criteria for Adverse
Events v3.0), avec un seuil d’intolérance défini d’effets secondaires grades III et IV.
Objectifs secondaires. 1) Tolérance à plus de trois mois après injection (notamment
absence de pathologies malignes) en tenant compte de la morbidité observée et la survie
globale des patients jusqu'à 2 ans après l'inclusion. 2) Réponse clinique observée et
l'efficacité sur l'évolutivité de la SSc: 3, 6, 9 et 12 mois après la procédure
Etude annexe : évaluation de l’action immunomodulatrice sur des critères biologiques
associant notamment le phénotype et la numération des sous populations lymphocytaires
et l'étude de la réponse anticorps (réalisé tous les 3 mois après la procédure pendant la
première année puis à 18 et 24 mois suivant l’injection).
PHRC 2011 Etude de phase I-II muticentrique.TRAITEMENT DES SCLERODERMIES
SYSTEMIQUES SEVERES REFRACTAIRES PAR INJECTION DE CSM ALLOGENIQUES.
Donneur sain, allogénique, intrafamilial.
Dose de CSM injectée. 1x106 CSM par kg de poids de receveur. production selon le procédé
actuellement validé et autorisé par l’Afssaps.
Sélection des patients.
• Critères d'inclusion: 1/ Age > 18 ans et < 70 ans 2) SSc de mauvais pronostic, mettant en jeu le
•
pronostic vital car avec atteinte(s) viscérale(s= sévère(s) (cardiaque, pulmonaire ou rénale) ET « a)
contre-indiquant l’uilisation de ou b) résistante aux » traitements immunosuppresseurs classiquement
utilisés dans les formes sévères de la maladie selon les recommendations Européennes de l’EUSTAR
(www.eustar.org) et de l’EBMT (www.ebmt.org) qui reposent alors sur du cyclophosphamide iv à
fortes doses (soit en bolus mensuels au moins 6 mois soit par intensification et autogreffe de Cellules
Souches Hématopoïétiques) ou avec atteinte pulmonaire fibrosante menacant le pronostic vital avec
exclusion d’une possible greffe pulmonaire. Ces formes sévères, AVEC au moins un an de recul
apres la fin des traitements immunousppresseurs préalables lorsqu’ils ont été effectué, associent à des
degrés variables une atteinte cutanée avec Rodnan > 15 et des atteintes viscérales pulmonaires ou
cardiaques s.
Critères de non inclusion: 1) Fraction d'éjection isotopique < 35 % ; 2) Clearance calculée de la
créatinine < 20 ml/mn/m2 ; 3) Pathologie tumorale associée ;4) Femme enceinte ;5) Patient HIV+,
Hépatite chronique B ou C active , 6) Absence de consentement écrit ;
PHRC 2011 Etude de phase I-II muticentrique.TRAITEMENT DES
SCLERODERMIES SYSTEMIQUES SEVERES REFRACTAIRES PAR
INJECTION DE CSM ALLOGENIQUES
•
•
•
Nombre de patients prévus.Un total de 20 patients sera inclus sur 3 ans
Analyse Statistique Dans un premier temps 10 patients à la dose initiale de 1 106
CSM par kg de poids de receveur seront inclus.Les 10 patients suivants seront
inclus à la dose : 1) - 0.5 106 CSM par kg si il y a une haute probabilité de toxicité
excessive à la dose 1 106 CSM par kg ; 2) - 3 106 CSM par kg si il y a une faible
probabilité de toxicité excessive 1 106 CSM par kg ; 3) - 1 106 CSM par kg si
aucun des critères précédent n’est rempli. Chaque cohorte de patient sera analysée
séparément suivant une approche séquentielle bayesienne afin d’estimer la
probabilité de toxicité à la dose administrée.
Nous considéreront un arrêt précoce de l’étude à la dose minimale si : 1) si
décès ou complications (notamment infectieuses) menaçant le pronostic vital ou
entrainant le décès entre l'injection et jusqu'au 3ème mois post réinjection et
reconnus par un comité d'experts indépendants comme liés à la toxicité du
conditionnement pour 2 patients sur 4 (stop si > 2/4) ; 2) neutropénie < 500 /mm3
à J30 post réinjection pour 2 patient sur 4 (stop si > 2/4) ; 3) si poussée évolutive
de la SSC pour 2 patients sur 4 (stop si > 2/4)