Transcript EC._2.6.1.1
Oleh: Dewi Kurnia (20511029) Dina Soes Putri (20511037) Isi Presentasi Pendahuluan Fungsi Struktur Mekanisme katalisis Isolasi dan pemurnian Aplikasi Modifikasi Genetik Pendahuluan No Data Keterangan Nama sistematik L-aspartat:2-oksoglutarat aminotransferase Sinonim 2-oksoglutarat-glutamat aminotransferase; aspartat α-ketoglutarat transaminase; glutamat-aspartat aminotransferase, dll 3 Organisme Arabidopsis thaliana, Bacillus sp., Chamydomonas Reinhardtii, dolphin, E. coli, Homo sapiens, Gallus gallus, Oryza sativa, dll 4 Subsrat L-aspartat dan 2-oksoglutarat 5 Produk Oksaloasetat dan L-glutamat 6 Kofaktor Piridoksal 5’-fosfat 7 Logam Mg2+ (aktivasi) 1 2 8 9 Senyawa aktivator Akonitat (memberikan efek aktivasi pada bentuk enzim sitoplasmik), etanol (dalam jumlah banyak dapat meningkatkan aktivitas AST pada plasma darah), rosiglitazon, malat Inhibitor 2-metil-DL-aspartat, 2-oksoglutakonat, asam 2oksoglutakonat dimetil ester, adipat, aminoguanidin, aspartat, Ca2+, kimotripsin, CN-, fumarat, glutamat, glutarat, isositrat, pottasium fosfat, dll 10 Mekanisme bi bi ping-pong 11 Degradasi: R-sisteat, aspartat I dan II, L-sistein I, fenilalaniin IV, sulfolaktat III, dan glutamat II ; Biosintesis: aspartat dan koenzim M; siklus TCA VI Pathway 12 KM (mM) 13 Turnover number (1/S) 14 pH optimum 0,071 (pH 7.6, 25°C); 0,088 (pH 7.4, 30°C); 0,08 (isozyme Asp-DEAE-1, pH 8.0); 0,23 (isozyme AspAT1, 25°C, pH 8.0); 0,093 (cytosolic isozyme, pH 7.4, 25°C); 0,098 (mitochondrial isozyme, pH 7.4, 25°C); 0,48 (pH 8, co-subsrat: L-Phe, mutan enzim A12T/P13T/N34D/T109S/G261A/S285G/A293D/N 297S), dll 120 (wild-type, pH 8.0, 25°C); 96 (rekombinan C166A mutan, pH 7.5, 25⁰C); 176 (isozyme AAT5, pH 8.0, 25°C); (4 recombinant deletion mutant, pH 7.5, 25°C), dll 6,3 (mitochondrial enzyme); 6,8 (cytosolic isozyme); 7,5 (isozyme AST II); 8 (oxaloacetate formation, isoenzyme Asp-DEAE-2); dll Struktur 3D Struktur tiap subunit Fungsi AST berperan dalam proses gliseroneogenesis hati Secara umum, AST mengkatalisis interkonversi dari aspartat dan α-ketoglutarat menjadi oksaloasetat dan glutamat. Reaksi sederhananya sbb: Asp + α-ketoglutarat ↔ oksaloasetat + Glu Mekanisme katalisis Isolasi dan pemurnian Elektroforesis Electrofocusing Kromatografi afinitas Kromatografi penukar ion Presipitasi amonium sulfat Aplikasi industri Digunakan sebagai penanda adanya kerusakan sel hati akibat paparan pelarut organik karsinogen (CCl4, CHCl3, bahan kimi pada dry clean, dll) Sebagai alat investigasi pada pre-klinis obat baru dengan pengukuran kadar AST dalam serum Modifikasi Genetik In-frame deletion 3 asam amino gen GOT1 pada urutan nukleotida 1165-1167 (AAC) mengakibatkan penghapusan Asn 389. Urutan nukleotida tersebut diketahui sebagai conserved region cAST pada mamalia Delesi ini mengakibatkan penurunan aktifitas enzim AST secara signifikan Daftar Pustaka http://www.brenda enzymes.info/php/result_flat.php4?ecno=2.6.1.1 http://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/EC2/6/1/ 1.html http://www.wikipedia/aspartate_transaminase.htm http://omim.org/entry/138180 http://www.hepatitiscentral.com/hcv/labs/liverenzymes.htm http://www.medfriendly.com/aspartateaminotransfer ase.html www.rscbi.org/pdb/explore/pudmed.do?structureId=3 II0 Terima Kasih